一代测序原理及步骤
答：一代测序仪利用Sanger测序——双脱氧末端终止法的原理，将被荧光标记的ddNTP掺入到dNTP中，由于ddNTP随机掺入，PCR产物从引物之后的第一个碱基开始，每一个位置都有可能是ddNTP。由于ddNTP缺乏链延伸所需要的3'-OH，链的延伸就选择性地在G、A、T或C处终止。这样的PCR产物与普通PCR不一样，不能形成一...
答：1、一代测序原理是使用Sanger测序技术，通过对DNA链延伸过程中释放的逐个核苷酸残基进行检测，获得DNA序列信息。2、Sanger测序技术是一种经典的DNA测序方法，也被称为dideoxy链终止法，这种方法首先利用DNA聚合酶和单链DNA模板，以及一些特殊的dNTP副产物进行DNA的延伸，会在连接后停止链的生长，ddNTP比普通的...
答：第二代测序：Illumina的突破 Illumina，科技的璀璨明星，以其独特的步骤引领着测序技术的进步。首先，样本通过文库构建，DNA被打断并末端处理，接着adapter连接，PCR扩增使其数量倍增。然后，这些片段在Flowcell（测序芯片）上形成簇，每个簇代表一个独特的DNA片段。在Sequencing阶段，荧光标记的dNTP以边合成边...
答：1. 第一代DNA测序技术：以双脱氧链终止法和化学裂解法为代表。这些技术主要通过测定DNA链上不同位置的终止片段来确定整个DNA序列。双脱氧链终止法是通过使用特定的核苷酸终止子来生成一系列长度不同的DNA片段，从而得到序列信息。化学裂解法则是利用化学方法裂解DNA链中的特定碱基，再通过凝胶电泳分离不同...
答：上机测序：先在毛细管中注入丙烯酰胺溶液，丙烯酰胺在紫外线的电离作用下发生聚合反应变成聚丙烯酰胺凝胶，将DNA片段混合物加入到有聚丙烯酰胺凝胶的一端，在毛细管的两端加上电压进行电泳，在毛细管的正极的末端用激光照射，经过光学传感器记录荧光信号。BigDye试剂中包括四种荧光标记的ddNTP，dNTP，DNA聚合酶，...
答：其原理是测序反应的核心就是利用ddNTP（由于缺少3'-OH基团，不具有与另一个dNTP连接形成磷酸二酯键的能力），这些ddNTP可用来中止DNA链的延伸。此外，这些ddNTP上连接有放射性同位素或荧光标记基团，因此可以被自动化的仪器或凝胶成像系统所检测到。其测序步骤如下：首先，将待测序的DNA扩增，就是复制出...
答：新一代（第二代）测序技术的测序原理是“边合成边测序”.先把基因组打断成100kb左右的小片段,每个片段单独测序,测完以后依靠大型计算机进行拼接,所以新一代测序仪测序简单,难在拼接.测序时,以待测DNA片段为模板,进行互补链的合成,每延伸一个碱基就进行一次激光扫描,读出是哪种碱基（四种碱基事先进行不...
答：主要过程： 如下图所示，类似于Illumina部分展示的模式图，也是边合成边测序。第四代测序技术 纳米孔测序技术是单分子实时测序的新一代技术，主要是通过ssDNA或RNA模板分子通过纳米孔而带来的“电信号”变化推测碱基组成进行实时测序。基本原理： 当纳米孔充满导电液时，两端加上一定电压，分子模板通过纳米...
答：由于Illumina测序技术使用扩增成簇的信号放大原理,使其读长无法达到一代测序水平,因为当扩增至数百碱基后,受核苷酸浓度、酶活等影响,簇内碱基添加将不再同步,不同步则信号混乱,导致读序不准。 该技术是Pacific BioSciences推出的 单分子实时(single molecular real time)DNA测序技术 ,基于边合成边测序原理。该技术主要...
答：2.化学降解法 同年，Gilbert等人提出了化学降解法，首先也是对DNA的末端进行放射性同位素标记，用特异的化学试剂去降解DNA链，产生几组长度不同的DNA链。同样，通过聚丙烯酰胺凝胶分离后放射自显影，直接读取待测DNA的序列长度。了解了原理之后，可以发现，sanger的测序是在DNA合成的过程种进行测序的，而化学...
网友评论：
金鸦19525968233：
全基因测序的原理和方法是什么?以测细菌基因组为例? -
51238终浅
： 不同的测序原理不一样,分别概述如下:第一代测序,1.1 Sanger 测序 采用的是直接测序法;1.2 连锁分析 采用的是间接测序法.新一代测序 (NGS)主 要 包 括 全 基 因 组 重 测 序 (whole-genomesequencing,WGS)、全外显子组测序 (...
金鸦19525968233：
能简单说说测序仪是什么原理吗 -
51238终浅
： 什么测序仪,现在主要的测序有一代二代三代,一代测序主要原理就是sanger测序法,也叫双脱氧末端终止法,二代测序主要是illumina 的边合成边测序的方法,还有life的H变化导致的ph变化的半导体芯片法,三代测序主要是长链测序,但错误率较高,比较少用,主要是单分子测序法.
金鸦19525968233：
一二三代测序的区别
51238终浅
： 第一代测序:指双脱氧末端终止法,扩增后通过毛细管电泳读取序列,每次获取数据量少.第二代测序:为高通量测序,采用微珠或高密度芯片边合成边测序,代表有454,solexa,solid,高通量,可一次获得数G数据,相对与第三代,都仍然需要扩增的方法放大信号,扩增后再检测.第三代测序:特点是单分子测序,多基于纳米科技,无需扩增,对单分链DNA/RNA直接用合成、降解、通过纳米孔等方式直接测序,核心特点是无需扩增所以成本更低.
金鸦19525968233：
现有的测序技术有哪些,技术原理和应用有哪些. -
51238终浅
： 这要写出来得多少字··简单说下吧. 第一代测序:以ABI公司为代表的sanger测序,测序仪为3730.原理是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物,直到掺入一种带有荧光标记的终止核苷酸为止,通过捕获荧光来进行分析,最后得到一系列的峰图,分析可得知其序列. 第二代测序就多了,罗氏为代表的454测序,illumina的solexa测序以及ABI的solid测序,各有特色.不过现阶段应该是illumina的solexa最为普遍.测序原理都是SBS(边合成边测序),具体LZ度娘吧,资料很多.
金鸦19525968233：
一代测序技术的发明人是谁 -
51238终浅
： 第一代测序:以ABI公司为代表的sanger测序,测序仪为3730.原理是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物,直到掺入一种带有荧光标记的终止核苷酸为止,通过捕获荧光来进行分析,最后得到一系列的峰图,分析可得知其序列.
金鸦19525968233：
谈谈基因测序技术经历了哪几个发展阶段,这些技术的特点分别是什么 -
51238终浅
： 基因测序也称DNA测序,是现代生物学研究中重要的手段之一.基因测序技术经过了三个发展阶段.第一代DNA测序技术是1975年由桑格(Sanger)和考尔森(Coulson)提出的链终止法.第一代技术准确率高,读取长,是至今唯一可以进行...
金鸦19525968233：
基因测序的步骤是什么? -
51238终浅
： 基因测序的方法很多. 最早是用sanger测序法,原理是双脱氧链终止法; Sanger法是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,并且在每个
金鸦19525968233：
DNA测序方法有哪些 -
51238终浅
： 第1 代测序技术——荧光标记的Sanger 法 第一代就不说了. 第2 代测序技术——循环阵列合成测序法 述第2 代测序技术中, 序列都是在荧光 或者化学发光物质的协助下, 通过读取DNA 聚合酶 或DNA 连接酶将碱基连接到DNA 链上过程中释放 ...
金鸦19525968233：
基因测序的步骤是什么? -
51238终浅
：[答案] PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克...
金鸦19525968233：
DNA测序原理及方法 -
51238终浅
： 这位是搞分子生物学的吗? DNA测序的方法有很多种. 目前最常见的是双脱氧终止法了. 在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶. 测序时分成四个反应, 每个反应除上述成分外分别加入2,3-双脱氧的A, C, G, T核苷三磷酸(称为ddATP, ...
