pet28a(+)
答：pet28a和pet30a载体的区别：pet - 28a载体shibiaodazaitima是表达载体，PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达。pet30a质粒类型是大肠杆菌蛋白表达，表达水平较高，克隆方法是多克隆位点，限制性内切酶；载体大小是5422 bp。pet - 28a载体shibiaodazaitima是表达载...
答：还是有必要的，Origin：Theoriginofreplication，由复制起始位点和相关调控元件组成，pET-28a(+)中的复制子属于松弛型中低拷贝型复制子，目标蛋白的高表达会对宿主菌造成较大的压力，所以表达载体的拷贝数通常较低。Kan：编码氨基糖苷磷酸转移酶，使质粒产生卡那霉素抗性，用于筛选培养过程中含有目标质粒的宿...
答：pet28a和petduet能共表达。大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系在这里必须指出的是，处于生物安全考虑，生物工程用的菌株。形态特征 最适生长温度37℃；...
答：pET28a重组蛋白的大小 是 五千三百
答：pet28a是5369bp，电泳的时候看应该是在marker的5000之上有2-3条带，带之间距离挺近的
答：pet28a不可以蓝白斑筛选。pet28a不可以蓝白斑筛选，因为没有lacZ的alpha片段编码基因。
答：1、 制备含有Amp抗生素的LB平板。2、 取一个1.5ml离心管，加入100μl感受态细胞悬液，置冰上：加入20ul质粒T+G(提取的质粒DNA稀释500X)，用移液器轻柔混匀。冰上静置20min。3、 42℃水浴中热激90秒，然后迅速置冰上3~5min。整个过程不要振荡菌液。4、 加入1ml LB液体培养基(不含抗生素)，...
答：质粒线性化的目的：主要是为了引进目的DNA。载体的主要任务就是携带目的DNA进入宿主细胞中。如果载体一直都是环状的，则目的DNA不能加载到载体上了。pET28a/HindIII、pET28b/HindIII在电泳图上处于同一水平线，pET28a和pET28b应该是相同分子量；pET28a比pET28a/HindIII慢，应是所说的例外情况，可能与构象...
答：常用的正向T7，反向T7TER
答：加上前面的融合肽以及终止子之前翻译的一个肽段，最终表达的蛋白分子量是59KD左右
网友评论：
平高18354576531：
pet28a 引物大肠杆菌表达载体pet28a的通用引物有哪些? -
10256米沈
：[答案] T7正向和反向2条引物
平高18354576531：
在原核表达蛋白时,由于用的是原核表达载体PET28a,属于卡那抗性,但忘加卡那了,这样影响大不大? -
10256米沈
： 理论上影响是比较大的,原核LB培养不加抗生素的话,很容易出现丢失了带有外源基因质粒的生长速度比目的菌的生长速度...
平高18354576531：
质粒电泳时3种构象移动速度比,以pet28a为例介绍,也就说说3条带大概位置, -
10256米沈
：[答案] pet28a是5369bp,电泳的时候看应该是在marker的5000之上有2-3条带,带之间距离挺近的
平高18354576531：
我们在做绿色银光蛋白GFP的克隆与表达时,用到的办法是酶切法,质粒分别为pET - 28a和N3质粒 -
10256米沈
： 通常来说,胶回收和NaAc乙醇沉淀得到的片段应该测浓度或者检验电泳的.毕竟胶回收或者乙醇沉淀都会有损失,而且有时候这类纯...
平高18354576531：
pet28a是低拷贝质粒,当插入GFP后,会不会影响pet28a - GFP的荧光蛋白强度? -
10256米沈
：[答案] 这个主要是看你的GFP蛋白表达量的,和质粒拷贝数多少并没有多大关系.表达量低了,一般是和你的诱导条件有关,你需要优化你的诱导条件.如IPTG浓度,诱导时间,诱导温度等等.
平高18354576531：
pet分数对照表
10256米沈
： 1、卷面30分——对应满分150分2、卷面28分——对应140分(Grade A)如果想要阅读成绩达到卓越等级,客观题,最多只能错2题.3、卷面26分——对应135分(Grade B)如果想要阅读成绩达到优秀等级,客观题,最多只能错4题.4、卷面20分——对应120分(Grade C)如果想要阅读成绩达到合格等级,客观题,最多只能错10题.
平高18354576531：
基因重组中碱基突变的原因?先用T载体将目的基因进行了连接,测序之后是正确的.但后用PET28a构建,测序发现丢失一个碱基,并有一个碱基突变.会有什... -
10256米沈
：[答案] 一般来讲有三种 物理:X射线、r射线、紫外线等 化学:烟焦油、煤等 生物(也就是病毒) 如何避免你就要你要根据自己的情况了
平高18354576531：
载体上thrombin是什么意思pET28a 上有的一个东西 位于his tag与Nde l间翻译是凝血酶这个是不是也是一个酶切的位点呢?求指教 -
10256米沈
：[答案] 是的,就是酶切位点
平高18354576531：
英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a - NULP1.先通过PCR扩增出了nulp1,并将nulp1连接入pMD18 - T载... -
10256米沈
：[答案] This aritcle through the steps such as PCR,transformation,distilling plasmid,EcoRI,connecting main links,purification and so on,in order to built the plasmid pET28a-NULP1.First,amplifing the nulp1 thr...
平高18354576531：
湖北2区+15的古老的雕文巨剑几多钱 -
10256米沈
： 1500w吧,毕竟不是50级的
