如何设计条件性基因敲除小鼠模型？ 如何设计条件性基因敲除小鼠模型
\u5982\u4f55\u8bbe\u8ba1\u6761\u4ef6\u6027\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u5c0f\u9f20\u6a21\u578b\u5c0f\u9f20\u548c\u5927\u9f20\u53ef\u8c13\u662f\u751f\u547d\u79d1\u5b66\u5b9e\u9a8c\u5ba4\u91cc\u7684\u660e\u661f\uff0c\u6210\u529f\u7684\u5c0f\u9f20\u548c\u5927\u9f20\u6a21\u578b\u53ef\u8c13\u662f\u751f\u547d\u79d1\u5b66\u7684\u597d\u5e2e\u624b\u3002\u5f88\u591a\u4eba\u53ef\u80fd\u60f3\u81ea\u5df1\u8bbe\u8ba1\u6216\u662f\u4e86\u89e3\u6761\u4ef6\u6027\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u5c0f\u9f20\uff0c\u5728\u6b64\u505a\u4e2a\u5c0f\u7ed3\uff0c\u4f9b\u5927\u5bb6\u53c2\u8003\u3002
\u6761\u4ef6\u6027\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u5c0f\u9f20\u7684\u8bbe\u8ba1\u5229\u7528\u4e86Cre/LoxP\u6216Flipe/Frt\u539f\u7406\u3002\u5b83\u4eec\u90fd\u662f\u4f4d\u70b9\u7279\u5f02\u6027\u91cd\u7ec4\u9176\u7cfb\u7edf\u3002\u8fd9\u91cc\u4ee5Cre/LoxP\u7cfb\u7edf\u4e3a\u4f8b\u3002\u6bd4\u5982\u5728\u5f85\u6572\u9664\u7684\u4e00\u6bb5\u76ee\u6807DNA\u5e8f\u5217\u7684\u4e24\u7aef\u5404\u653e\u7f6e\u4e00\u4e2aloxP\u5e8f\u5217\uff0c\u5f97\u5230flox(flanked by loxP)\u5c0f\u9f20\u3002\u5c06flox\u5c0f\u9f20\u4e0e\u5e26\u6709\u7ec6\u80de\u7279\u5f02\u6027\u8868\u8fbeCre\u7684\u5c0f\u9f20\u4ea4\u914d\u7e41\u6b96\uff0c\u4ee5\u83b7\u5f97\u5728\u7279\u5b9a\u7ec6\u80de\u91cc\u628a\u76ee\u6807\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u6389\u7684\u5c0f\u9f20\uff0c\u5373\u6761\u4ef6\u6027\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u5c0f\u9f20\u3002\u6b64\u5916\uff0c\u82e5\u4e0e\u63a7\u5236Cre\u8868\u8fbe\u7684\u5176\u4ed6\u8bf1\u5bfc\u7cfb\u7edf(\u6bd4\u5982CreERT2)\u76f8\u7ed3\u5408\uff0c\u8fd8\u53ef\u4ee5\u5bf9\u67d0\u4e00\u57fa\u56e0\u540c\u65f6\u5b9e\u73b0\u65f6\u7a7a\u4e24\u65b9\u9762\u7684\u8c03\u63a7\u3002
Cre/loxP\u7cfb\u7edf\u6765\u6e90\u4e8e\u566c\u83cc\u4f53\uff0c\u53ef\u4ee5\u4ecb\u5bfc\u4f4d\u70b9\u7279\u5f02\u7684DNA\u91cd\u7ec4\u3002\u8be5\u7cfb\u7edf\u542b\u6709\u4e24\u4e2a\u7ec4\u6210\u6210\u5206\uff1a\u4e00\u4e2a\u662f\u4e00\u6bb5\u957f34bp\u7684DNA\u5e8f\u5217(LoxP\u5e8f\u5217)\uff0c\u542b\u6709\u4e24\u4e2a13 bp\u7684\u53cd\u5411\u91cd\u590d\u5e8f\u5217\u548c\u4e00\u4e2a8 bp\u7684\u6838\u5fc3\u5e8f\u5217\u3002 LoxP\u7684\u65b9\u5411\u7531\u4e2d\u95f4\u8fd98\u4e2a\u78b1\u57fa\u51b3\u5b9a\u3002\u8fd9\u6bb5LoxP\u5e8f\u5217\u662fCre\u91cd\u7ec4\u9176\u8bc6\u522b\u7684\u4f4d\u70b9\u3002 \u4ee4\u4e00\u4e2a\u7ec4\u6210\u90e8\u5206\u662fCre\u91cd\u7ec4\u9176\u3002\u5b83\u662f\u7531\u566c\u83cc\u4f53\u7f16\u7801\u7684\u4e00\u79cd\u7531343\u4e2a\u6c28\u57fa\u9178\u7ec4\u6210\u7684\u86cb\u767d\u3002Cre\u53ef\u4ee5\u4ecb\u5bfc\u4e24\u4e2aLoxP\u4f4d\u70b9\u7684\u91cd\u7ec4\uff0c\u4ece\u800c\u5f15\u8d77\u4e24\u4e2aLoxP\u4e4b\u95f4DNA\u5e8f\u5217\u7684\u7f3a\u5931\u3002\u5982\u679c\u5c06Cre\u91cd\u7ec4\u9176cDNA\u901a\u8fc7\u57fa\u56e0\u5de5\u7a0b\u7684\u624b\u6bb5\u7f6e\u4e8e\u7ec4\u7ec7\u6216\u7ec6\u80de\u7279\u5f02\u6027\u542f\u52a8\u5b50\u4e4b\u4e0b\uff0c\u53ef\u4ee5\u5f97\u5230Cre\u7ec4\u7ec7/\u7ec6\u80de\u7279\u5f02\u6027\u8868\u8fbe\u7684Cre\u5c0f\u9f20\uff0c\u4e5f\u53ebCre\u5de5\u5177\u5c0f\u9f20\u3002 \u8ddfFlox\u5c0f\u9f20\u4ea4\u914d\u4e4b\u540e\uff0c\u53ef\u4ee5\u5f97\u5230\u6761\u4ef6\u6027\u57fa\u56e0\u6572\u9664\u5c0f\u9f20\u3002
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根据研究项目具体情况和要求把目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA 片段都重组到带有标记基因(如neo基因，TK基因等)的载体上，成为重组的Knockout载体。
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