免疫组织化学应用的基本原则

免疫组织化学技术在生物医学研究中扮演着关键角色,广泛应用于多个研究领域。然而,技术的运用需注意其限制,如待测物质需具有抗原性且有一定的浓度才能检测到。免疫反应阳性蛋白的来源可能不确定,新合成的蛋白或细胞间转运蛋白难以区分。在设计实验时,需充分考虑这些特性。例如,确认已知蛋白的细胞合成来源,需采用分子原位杂交技术。


在实验设计上,基本原则包括:



  1. 利用标记性蛋白,如GFAP和NF,它们只在特定细胞类型中表达,通过特异性抗体鉴定细胞种类。对于不易识别的细胞,如朗格汉斯细胞和黑色素细胞,免疫组化染色有助于识别其形态。

  2. 通过免疫组织化学染色,鉴定内分泌细胞产物的来源,如激素,以研究细胞分泌功能和内分泌肿瘤的分类。

  3. 通过鉴定细胞分化程度不同的标志性蛋白,如巢蛋白、波形蛋白和神经丝蛋白,来判断细胞的发育阶段。

  4. 结合轴浆运输示踪法,如辣根过氧化酶和荧光金,研究神经元间的联系和神经纤维投射区域。

  5. 在临床病理中,免疫组织化学的应用广泛,如疾病诊断、病灶检测、肿瘤评估和治疗指导等。


理解并遵循这些基本原则,可以帮助初学者更有效地运用免疫组织化学技术,提高研究的准确性和可靠性。


扩展资料

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化技术近年来得到迅速发展。50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术。



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