酿酒酵母是怎样培出来的? 求酿酒酵母培养基的成分。

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2\u3001SD\u57f9\u517b\u57fa\uff08\u53ef\u7528\u4e8e\u6c28\u57fa\u9178\u7f3a\u9677\u578b\u7684\u7b5b\u9009\uff0c\u5177\u4f53\u7b5b\u9009\u6807\u8bb0\u4ee5\u6c28\u57fa\u9178\u6df7\u5408\u7269\u4e3a\u51c6\uff09
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酵母菌的分离纯化
一、实验原理 酵母菌常见于含糖份比较高的环境中,如果园土果皮等的表面。多数酵母菌喜欢偏酸条件,最适pH为4.5-6.0.酵母菌生长迅速,容易分离培养。在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长快,利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养,然后在固体培养基上划线分离纯化。
二、器材和用品 1、苹果皮、葡萄皮、果园土等。
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基:
3、无菌吸管、无菌培养皿、100ml无菌水1瓶/组、涂棒、美兰染液、显微镜、接种环等。
三、实验方法
1、接种:取果皮(不需冲洗)或土壤5克,加入到100ml无菌水中,充分搅拌后,用无菌吸管取1ml接入到9ml乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,在28-30℃培养箱中培养24h,可见培养液变浑浊。
2、加富培养:用无菌吸管取上述培养液1ml,注入另1管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,在28-30℃培养箱中培养24h。
3、镜检:用无菌操作法用接种环取少量菌液置于载玻片上,中央滴一滴美兰染液,混合均匀后制成水浸片,在高倍镜下观察酵母菌的形态及出芽方,并可根据菌体是否.染色来区分酵母菌的死活细胞,因活细胞使美兰染液液还原,故菌体不着色.,
4、涂皿:用马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板,用无菌吸管取0.1ml加富培养液到平板中,用涂棒涂匀后培养24h。
5、分离纯化:用接种环挑取单个酵母菌菌落,在平板上四区划线,培养后分离得到单个菌落。
6、镜检:挑取单菌落,制片观察其形态。
7、菌种保藏:接种酵母菌到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上,长出菌苔后冰箱保藏
培养基制备
(一)YPD培养基 YPD 或YPED,又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基 用于酵母菌的培养
配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固体培养基,加入2%琼脂粉
配制方法: 1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉 2 高压 121度 20min 3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液灭菌后加入)
(二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
1、培养基成分
马铃薯 20g
葡萄糖 2 g
琼脂 1.5-2g
水 100ml
自然pH
2.配制方法
(1)配制20%马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。
(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。
(3)分装、加塞、包扎。
(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 m

如果你有菌种,则只需相应的酵母培养基和合适的培养温度,经过2-3天就可培养好。如果没有菌种则需要分离与纯化所需菌种,这个过程比较麻烦。

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