啤酒酵母扩培的方法
一、实验目的：本实验旨在学习酵母菌种的扩大培养方法，以便为实验室啤酒发酵准备充足的菌种。
二、实验原理：
在进行啤酒发酵之前，需要准备足够量的发酵菌种。啤酒发酵中，接种量通常应为麦芽汁量的10%，以确保发酵液中的酵母量达到1×10^7个酵母/mL。因此，为了进行大规模发酵，首先必须进行酵母菌种的扩大培养。扩大培养的目的不仅是为了获得足量的酵母，还包括让酵母逐渐适应发酵温度（10℃），因为它们最初是在最适生长温度（28℃）下培养的。
三、清烂实验器材：
实验所需的器材包括恒温培养箱、生化培养箱、显微镜等。
四、实验步骤：
本次实验预计使用60升麦芽汁，因此需要制备含有1×10^8个酵母/mL的菌种，按照每班10个组计算，每个组应制备约600 mL菌种。建议的流程如下：
1. 菌种扩大：
麦汁斜面菌种 → 麦汁平板 — 28℃，培养2天 → 镜检，挑选单个菌落3个 → 接种到50mL麦汁试管（或三角瓶）— 20℃，每天摇动3次，培养2天 → 接种到550mL麦汁三角瓶— 15℃，每天摇动3次，培养2天 → 进行计数备用。
2. 培养基的制备：
取协定法制备的麦芽汁滤液（约400 mL），加水定容至约600 mL，取50 mL装入250 mL三角瓶中，剩余550 mL装入1000 mL三角瓶中，包上瓶口布后，在0.05 MPa下灭菌30分钟。
3. 菌种扩大培养：
按照上述流程进行菌种的扩大培养（斜面活化菌种由教师提供），注意无菌操作技巧。
五、注意事项：
灭菌后的培养基可能会有较多沉淀，但这不会影响酵母菌的繁殖。若要减少沉淀，可以在灭菌前将培养基充分煮沸并过滤。
六、思考题：
在菌种扩大过程中为什么要逐步扩大培养规模？培养温度为什么要逐渐降低？
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