为什么可用皂化后的叶绿素盐来测定叶绿素的吸收光谱? 叶绿素提取 实验报告,有谁知道?紧急!!!

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7


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D\uff1dKCL
D\uff1a\u5438\u5149\u5ea6\uff0c\u5373\u5438\u6536\u5149\u7684\u91cf\uff0cC\uff1a\u6eb6\u6db2\u6d53\u5ea6, K\uff1a\u4e3a\u6bd4\u5438\u6536\u7cfb\u6570\uff08\u5438\u5149\u7cfb\u6570\uff09\uff0c L\uff1a\u6db2\u5c42\u539a\u5ea6\uff0c\u901a\u5e38\u4e3a1cm.
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1.\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u7684\u63d0\u53d6
\uff081\uff09\u53d6\u690d\u7269\u65b0\u9c9c\u53f6\u72471\u514b\uff0c\u6d17\u51c0\uff0c\u64e6\u5e72\uff0c\u53bb\u6389\u4e2d\u8109\u526a\u788e\uff0c\u653e\u4eba\u7814\u94b5\u4e2d\u3002
\uff082\uff09\u7814\u94b5\u4e2d\u52a0\u5165\u5c11\u91cf\u77f3\u82f1\u7802\u53ca\u78b3\u9178\u9499\u7c89\uff0c2-3 mL95%\u4e59\u9187\uff0c\u7814\u78e8\u81f3\u7cca\u72b6\uff0c\u518d\u52a02-3 mL95\uff05\u4e59\u9187\uff0c\u8fc7\u6ee4\uff0c\u5373\u5f97\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\u3002
2.\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u7684\u5206\u79bb
\u70b9\u6837\uff1a\u53d6\u524d\u7aef\u526a\u6210\u4e09\u89d2\u5f62\u7684\u6ee4\u7eb8\u6761\uff0c\u7528\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u53d6\u53f6\u7eff\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\uff0c\u5982\u56fe\u70b9\u6837\u4e8e\u201c\u8272\u70b9\u201d\u5904\uff0c\u6ce8\u610f\u6bcf\u6b21\u6240\u70b9\u6eb6\u6db2\u4e0d\u53ef\u8fc7\u591a\uff0c\u70b9\u6837\u540e\u667e\u5e72\uff0c\u518d\u91cd\u590d\u64cd\u4f5c\u6570\u6b21\u3002



0/0/00



12


\u7406\u5316\u6027\u8d28\u6d4b\u5b9a


2.\u6c22\u548c\u94dc\u5bf9\u53f6\u7eff\u7d20\u5206\u5b50\u4e2d\u9541\u7684\u53d6\u4ee3\u4f5c\u7528
\u65b9\u6cd5\u4e00\uff1b\u53d6\u4e24\u652f\u8bd5\u7ba1\u3002\u7b2c\u4e00\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db22mL\uff0c\u4f5c\u4e3a\u5bf9\u7167\u3002\u7b2c\u4e8c\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db22 mL\uff0c\u518d\u52a0\u5165\u7a00\u76d0\u91781\u6ef4\uff0c\u6447\u5300\uff0c\u89c2\u5bdf\u6eb6\u6db2\u989c\u8272\u53d8\u5316\u3002\u5f53\u6eb6\u6db2\u53d8\u7aed\u540e\uff0c\u518d\u52a0\u5165\u5c11\u91cf\u918b\u9178\u94dc\u7c89\u672b\uff0c\u5fae\u5fae\u52a0\u70ed\uff0c\u89c2\u5bdf\u8bb0\u5f55\u6eb6\u6db2\u989c\u8272\u53d8\u5316\u60c5\u51b5\uff0c\u5e76\u4e0e\u5bf9\u7167\u8bd5\u7ba1\u76f8\u6bd4\u8f83\u3002\u89e3\u91ca\u5176\u989c\u8272\u53d8\u5316\u539f\u56e0\u3002


\u5c06\u4e0a\u4e00\u4e2a\u5b9e\u9a8c\u4e2d\u63d0\u53d6\u7684\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u6eb6\u6db2\u9002\u5f53\u7a00\u91ca\u540e\uff0c\u8fdb\u884c\u4ee5\u4e0b\u5b9e\u9a8c\uff1a
1.\u8367\u5149\u73b0\u8c61\u7684\u89c2\u5bdf\u3002
\u53d6l\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u5165\u6d53\u7684\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\uff0c\u5728\u76f4\u5c04\u5149\u4e0b\u89c2\u5bdf\u6eb6\u6db2\u7684\u900f\u5c04\u5149\u4e0e\u53cd\u5c04\u5149\u989c\u8272\u6709\u4f55\u4e0d\u540c\uff0c\u53ef\u89c2\u5bdf\u5230\u53cd\u5c04\u51fa\u6697\u7ea2\u8272\u7684\u8367\u5149\u3002



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13


\u7406\u5316\u6027\u8d28\u6d4b\u5b9a


2.\u6c22\u548c\u94dc\u5bf9\u53f6\u7eff\u7d20\u5206\u5b50\u4e2d\u9541\u7684\u53d6\u4ee3\u4f5c\u7528
\u65b9\u6cd5\u4e00\uff1b\u53d6\u4e24\u652f\u8bd5\u7ba1\u3002\u7b2c\u4e00\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db22mL\uff0c\u4f5c\u4e3a\u5bf9\u7167\u3002\u7b2c\u4e8c\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db22 mL\uff0c\u518d\u52a0\u5165\u7a00\u76d0\u91781\u6ef4\uff0c\u6447\u5300\uff0c\u89c2\u5bdf\u6eb6\u6db2\u989c\u8272\u53d8\u5316\u3002\u5f53\u6eb6\u6db2\u53d8\u7aed\u540e\uff0c\u518d\u52a0\u5165\u5c11\u91cf\u918b\u9178\u94dc\u7c89\u672b\uff0c\u5fae\u5fae\u52a0\u70ed\uff0c\u89c2\u5bdf\u8bb0\u5f55\u6eb6\u6db2\u989c\u8272\u53d8\u5316\u60c5\u51b5\uff0c\u5e76\u4e0e\u5bf9\u7167\u8bd5\u7ba1\u76f8\u6bd4\u8f83\u3002\u89e3\u91ca\u5176\u989c\u8272\u53d8\u5316\u539f\u56e0\u3002


\u5c06\u4e0a\u4e00\u4e2a\u5b9e\u9a8c\u4e2d\u63d0\u53d6\u7684\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u6eb6\u6db2\u9002\u5f53\u7a00\u91ca\u540e\uff0c\u8fdb\u884c\u4ee5\u4e0b\u5b9e\u9a8c\uff1a
1.\u8367\u5149\u73b0\u8c61\u7684\u89c2\u5bdf\u3002
\u53d6l\u652f\u8bd5\u7ba1\u52a0\u5165\u6d53\u7684\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\uff0c\u5728\u76f4\u5c04\u5149\u4e0b\u89c2\u5bdf\u6eb6\u6db2\u7684\u900f\u5c04\u5149\u4e0e\u53cd\u5c04\u5149\u989c\u8272\u6709\u4f55\u4e0d\u540c\uff0c\u53ef\u89c2\u5bdf\u5230\u53cd\u5c04\u51fa\u6697\u7ea2\u8272\u7684\u8367\u5149\u3002



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14


\u7406\u5316\u6027\u8d28\u6d4b\u5b9a


4. \u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u5438\u6536\u5149\u8c31\u66f2\u7ebf
\u5c06\u4e0a\u8ff0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\u6ce8\u51651cm\u6bd4\u8272\u676f\u4e2d\uff0c\u53e6\u53d695%\u4e59\u9187\u4f5c\u7a7a\u767d\uff0c\u4e8e400-700nm\u4e4b\u95f4\uff0c\u6bcf\u95f4\u969410nm\u8bfb\u53d6\u5149\u5bc6\u5ea6\u503c\u3002\u6839\u636e\u6d4b\u5b9a\u7ed3\u679c\uff0c\u4ee5\u6ce2\u957f\u4e3a\u6a2a\u5750\u6807\u7ed8\u5236\u66f2\u7ebf\uff0c\u6b64\u5373\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u7684\u5438\u6536\u5149\u8c31\u66f2\u7ebf\u3002\u7528\u540c\u6837\u7684\u65b9\u6cd5\u6d4b\u5b9a\u7682\u5316\u4f5c\u7528\u4e2d\u5206\u79bb\u51fa\u7eff\u8272\u7d20\u4e0e\u9ec4\u8272\u7d20\u7684\u5438\u6536\u5149\u8c31\u66f2\u7ebf\uff0c\u5e76\u5bf9\u7ed3\u679c\u8fdb\u884c\u5206\u6790\u3002


3.\u7682\u5316\u4f5c\u7528\uff08\u7eff\u8272\u7d20\u4e0e\u9ec4\u8272\u7d20\u7684\u5206\u79bb\uff09
\u53d6\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db22 mL\u4e8e\u5927\u8bd5\u7ba1\u4e2d\uff0c\u52a0\u51654mL\u4e59\u919a\uff0c\u6447\u5300\uff0c\u518d\u6cbf\u8bd5\u7ba1\u58c1\u6162\u6162\u52a0\u4eba3\uff5e6mL\u84b8\u998f\u6c34\uff0c\u8f7b\u8f7b\u6df7\u5300\uff0c\u9759\u7f6e\u7247\u523b\uff0c\u6eb6\u6db2\u5373\u5206\u4e3a\u4e24\u5c42\uff0c\u8272\u7d20\u5df2\u5168\u90e8\u8f6c\u5165\u4e0a\u5c42\u4e59\u919a\u4e2d\u3002\u7528\u6ef4\u7ba1\u5438\u53d6\u4e0a\u5c42\u7eff\u8272\u5c42\u6eb6\u6db2\uff0c\u653e\u5165\u53e6\u4e00\u8bd5\u7ba1\u4e2d\uff0c\u518d\u7528\u84b8\u998f\u6c34\u51b2\u6d17\u4e00\u3001\u4e8c\u6b21\u3002\u5728\u8272\u7d20\u4e59\u919a\u6eb6\u6db2\u4e2d\u52a0\u516530\uff05KOH\uff0d\u7532\u9187\u6eb6\u6db2\uff0c\u5145\u5206\u6447\u5300\uff0c\u518d\u52a0\u5165\u84b8\u998f\u6c34\u7ea63 mL\uff0c\u6447\u5300\u9759\u7f6e\u3002\u53ef\u4ee5\u770b\u5230\u6eb6\u6db2\u9010\u6e10\u5206\u4e3a\u4e24\u5c42\uff0c\u4e0b\u5c42\u662f\u6c34\u6eb6\u6db2\uff0c\u5176\u4e2d\u6eb6\u6709\u7682\u5316\u7684\u53f6\u7eff\u7d20a\u548cb\uff0c\u4e0a\u5c42\u662f\u4e59\u919a\u6eb6\u6db2\uff0c\u5176\u4e2d\u6eb6\u6709\u9ec4\u8272\u7684\u80e1\u841d\u535c\u7d20\u548c\u53f6\u9ec4\u7d20\u3002\u5c06\u4e0a\u4e0b\u5c42\u653e\u5165\u4e24\u8bd5\u7ba1\u4e2d\uff0c\u53ef\u4f9b\u89c2\u5bdf\u5438\u6536\u5149\u8c31\u7528\u3002



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15


\u542b\u91cf\u6d4b\u5b9a


(3\uff09\u8f6c\u79fb\u523025mL\u68d5\u8272\u5bb9\u91cf\u74f6\u4e2d\uff0c\u7528\u5c11\u91cf80\uff05\u4e19\u916e\u51b2\u6d17\u7814\u94b5\u3001\u7814\u68d2\u53ca\u6b8b\u6e23\u6570\u6b21\uff0c\u6700\u540e\u8fde\u540c\u6b8b\u6e23\u4e00\u8d77\u5012\u5165\u5bb9\u91cf\u74f6\u4e2d\u3002\u6700\u540e\u752880\uff05\u4e19\u916e\u5b9a\u5bb9\u81f325mL\uff0c\u6447\u5300\u3002\u79bb\u5fc3\u6216\u8fc7\u6ee4\u3002

(4\uff09\u5c06\u4e0a\u8ff0\u8272\u7d20\u63d0\u53d6\u6db2\u5012\u5165\u5149\u5f841cm\u7684\u6bd4\u8272\u676f\u5185\u3002\u4ee580\uff05\u4e19\u916e\u4e3a\u7a7a\u767d\uff0c\u5728\u6ce2\u957f663nm\u3001645nm\u3001652nm\u548c440nm\u4e0b\u6d4b\u5b9a\u5149\u5bc6\u5ea6\u3002


\uff081\uff09\u53d6\u65b0\u9c9c\u690d\u7269\u53f6\u7247\uff0c\u64e6\u51c0\u7ec4\u7ec7\u8868\u9762\u6c61\u7269\uff0c\u526a\u788e\uff0c\u6df7\u5300\u3002
\uff082\uff09\u79f0\u53d6\u526a\u788e\u7684\u65b0\u9c9c\u6837\u54c10.5g\uff0c\u653e\u5165\u7814\u94b5\u4e2d\uff0c\u52a0\u5c11\u91cf\u77f3\u82f1\u7802\u548c\u78b3\u9178\u9499\u7c89\u53ca2\uff5e3mL80\uff05\u4e19\u916e\uff0c\u7814\u6210\u5300\u6d46\uff0c\u518d\u52a080\uff05\u4e19\u916e5mL\uff0c\u7ee7\u7eed\u7814\u78e8\u81f3\u7ec4\u7ec7\u53d8\u767d\u3002



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16




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17




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18


\u56db\u3001\u5b9e\u9a8c\u7ed3\u679c\u8ba1\u7b97


\u5c06\u6d4b\u5f97\u7684\u5149\u5bc6\u5ea6\u503c\u4ee3\u5165\u516c\u5f0f\uff0c\u5206\u522b\u8ba1\u7b97\u53f6\u7eff\u7d20a\u3001b\u3001a+b\u548c\u7c7b\u80e1\u841d\u535c\u7d20\u7684\u6d53\u5ea6\uff08mg\uff0fL\uff09\u3002
\u5e76\u6309\u4e0b\u5f0f\u8ba1\u7b97\u7ec4\u7ec7\u4e2d\u5355\u4f4d\u9c9c\u91cd\u6216\u5e72\u91cd\u7684\u5404\u8272\u7d20\u7684\u542b\u91cf\uff1a
\u8272\u7d20\u6d53\u5ea6\uff08mg\uff0fL\uff09\u00d7\u63d0\u53d6\u6db2\u603b\u4f53\u79ef\u00d7\u7a00\u91ca\u500d\u6570
\u8272\u7d20\u5728\u53f6\u7247\u4e2d\u7684\u542b\u91cf\uff08%\uff09= \u00d7100% \u6837\u54c1\u91cd\u91cf\uff08mg\uff09\u00d71000
\u7a00\u91ca\u500d\u6570\uff1a\u82e5\u63d0\u53d6\u6db2\u672a\u7ecf\u7a00\u91ca\uff0c\u5219\u53d61



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19


\u5b9e\u9a8c\u62a5\u544a


1.\u8bd5\u8ff0\u53f6\u7eff\u4f53\u8272\u7d20\u7684\u5438\u6536\u5149\u8c31\u7279\u70b9\u53ca\u751f\u7406\u610f\u4e49\u3002
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因为由于叶绿素皂化反应后的叶绿素盐并不影响叶绿素分子的骨架结构,叶绿素对光的吸收规律与叶绿素盐对光的吸收规律几乎是相同的,而且皂化反应可以从叶绿体色素中只筛选出叶绿素,排除了其他色素的干扰,所以可用皂化后的叶绿素盐来测定叶绿素的吸收光谱。

叶绿素(chlorophyll)是一类与光合作用(photosynthesis)有关的最重要的色素。光合作用是通过合成一些有机化合物将光能转变为化学能的过程。叶绿素实际上存在于所有能营造光合作用的生物体,包括绿色植物、原核的蓝绿藻(蓝菌)和真核的藻类。叶绿素从光中吸收能量,然后能量被用来将二氧化碳转变为碳水化合物。

提取
叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下:
(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。
(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。
(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。
(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。
(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。
(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。
(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。
(8)将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。

因为由于叶绿素皂化反应后的叶绿素盐并不影响叶绿素分子的骨架结构,叶绿素对光的吸收规律与叶绿素盐对光的吸收规律几乎是相同的,而且皂化反应可以从叶绿体色素中只筛选出叶绿素,排除了其他色素的干扰,所以可用皂化后的叶绿素盐来测定叶绿素的吸收光谱。

叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定

http://www.docin.com/p-748995723.html

因为由于叶绿素皂化反应后的叶绿素盐并不影响叶绿素分子的骨架结构,叶绿素对光的吸收规律与叶绿素盐对光的吸收规律几乎是相同的,而且皂化反应可以从叶绿体色素中只筛选出叶绿素,排除了其他色素的干扰,所以可用皂化后的叶绿素盐来测定叶绿素的吸收光谱。

采纳吧~

由于叶绿素造化反应后的叶绿素盐并不影响叶绿素分子的骨架结构,所以可用皂化后的叶绿素盐来测定叶绿素的吸收光谱。(哥也是浙大的,回答一下攒一下RP吧)

目测浙大的!!!!

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