黑木耳一级种(母种)菌种培养基如何配制? 平菇菌种(母种)如何使用?

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(1)培养基常用配方

PDA培养基:马铃薯(或玉米粉或麦麸)100克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升,pH为6.5。

(2)一级种培养基制作

①将马铃薯洗净去皮(已发芽的要挖掉芽眼),称量取200克切成薄片,置于铝锅加水煮沸30分钟,用4层纱布过滤取汁,补足1000毫升容量;称取琼脂20克,用剪刀剪碎后加入马铃薯汁液内,微火加热,不时搅拌直至琼脂全部溶化,加入葡萄糖,稍煮几分钟后,用4层湿纱布过滤,其液汁装入试管。

②趁热分装入管,装量为试管长度的1/5,塞紧棉塞,立放于试管笼上。分装时应注意不使培养基粘附在试管口上,以免杂菌感染。

③及时高压灭菌,灭菌时将试管每10支扎成一捆,棉塞一端用牛皮纸包好,垂直放入高压锅内进行蒸汽灭菌,当压力达0.05兆帕时,微开排气阀,使压力降至“0”,重新加热灭菌,在0.110兆帕的压力下保持30分钟,待压力表自动降到“0”时,再打开锅盖,取出试管趁热排斜面。

④试管取出后趁热将试管口一端垫高,斜靠在桌上的小木棒上,使管内培养液斜面上长度达4/5,试管上面覆盖毛巾,冷却后即成斜面固体培养基。

⑤灭菌后置常温下48小时,未发现有杂菌产生,即可作为一级种斜面培养基用于接种,一级种培养的适宜温度为22~28℃,大约经10~15天菌丝可长满斜面。琼脂斜面培养基配制工艺流程如图9所示。

图9 琼脂培养基配制工艺流程

1.分装试管 2.管口塞棉 3.包扎成捆 4.高压灭菌 5.摆成斜面



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