组培培养基的配制方法 组培中的1/4MS培养基如何配置
\u6c42\u7ec4\u57f9\u7528\u57f9\u517b\u82b1\u7c89\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u914d\u65b9\u4e00\u79cd\u88f8\u5b50\u690d\u7269\u82b1\u7c89\u7684\u79bb\u4f53\u57f9\u517b\u65b9\u6cd5\u53ca\u5176\u4e13\u7528\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u8be5\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u4e3a\uff1a\u8517\u7cd6120\uff0d150g\uff0c\u787c\u91780\uff0e1\uff0d0\uff0e2g\uff0c\u6c2f\u5316\u94990\uff0e1\uff0d0\uff0e3g\uff0c\u7528\u6c34\u5b9a\u5bb9\u81f31000ml\u3002\u57f9\u517b\u65b9\u6cd5\u662f\u5c06\u88f8\u5b50\u690d\u7269\u82b1\u7c89\u5728\u5ba4\u6e29\u4e0b\u6c34\u540820\uff0d30\u5206\u949f\u540e\uff0c\u7f6e\u4e8e\u6240\u8ff0\u57f9\u517b\u57fa\u4e2d\u57f9\u517b16\uff0d72\u5c0f\u65f6\uff0c\u82b1\u7c89\u840c\u53d1\uff0c\u5f97\u5230\u82b1\u7c89\u7ba1\u3002\u672c\u53d1\u660e\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u4e3a\u82b1\u7c89\u7684\u840c\u53d1\u548c\u751f\u957f\u63d0\u4f9b\u5fc5\u9700\u7684\u73af\u5883\u6761\u4ef6\u3002\u7528\u672c\u53d1\u660e\u7684\u65b9\u6cd5\u8fdb\u884c\u88f8\u5b50\u690d\u7269\u82b1\u7c89\u7684\u79bb\u4f53\u57f9\u517b\uff0c\u4e0d\u4ec5\u5feb\u901f\u3001\u7b80\u5355\u6613\u884c\uff0c\u800c\u4e14\u57f9\u517b\u6548\u679c\u597d\uff0c\u53ef\u83b7\u5f97\u5927\u91cf\u5177\u6709\u751f\u6d3b\u529b\u7684\u88f8\u5b50\u690d\u7269\u82b1\u7c89\u7ba1\uff0c\u5177\u6709\u8f83\u5927\u7684\u5b9e\u9645\u5e94\u7528\u4ef7\u503c\u3002
\u4e0b\u9762\u662f\u690d\u7269\u7ec4\u57f9\u7684\u4e00\u822c\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u5236\uff1a
\u914d\u5236\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u5177\u4f53\u64cd\u4f5c
\u2460\u6839\u636e\u914d\u65b9\u8981\u6c42\uff0c\u7528\u91cf\u7b52\u6216\u79fb\u6db2\u7ba1\u4ece\u6bcf\u79cd\u6bcd\u6db2\u4e2d\u5206\u522b\u53d6\u51fa\u6240\u9700\u7684\u7528\u91cf\uff0c\u653e\u5165\u540c\u4e00\u70e7\u676f\u4e2d\uff0c\u5e76\u7528\u7c97\u5929\u5e73\u79f0\u53d6\u8517\u7cd6\u3001\u743c\u8102\u653e\u5728\u4e00\u8fb9\u5907\u7528\u3002
\u2461\u5c06\u2460\u4e2d\u79f0\u597d\u7684\u743c\u8102\u52a0\u84b8\u998f\u6c34300\uff5e400\u6beb\u5347\uff0c\u52a0\u70ed\u5e76\u4e0d\u65ad\u6405\u62cc\uff0c\u76f4\u81f3\u716e\u6cb8\u6eb6\u89e3\u5448\u900f\u660e\u72b6\uff0c\u518d\u505c\u6b62\u52a0\u70ed\u3002
\u2462\u5c06\u2460\u4e2d\u6240\u53d6\u7684\u5404\u79cd\u7269\u8d28(\u5305\u62ec\u8517\u7cd6)\uff0c\u52a0\u5165\u716e\u597d\u7684\u743c\u8102\u4e2d\uff0c\u518d\u52a0\u6c34\u81f31000\u6beb\u5347\uff0c\u6405\u62cc\u5747\u5300\uff0c\u914d\u6210\u57f9\u517b\u57fa\u3002
\u2463\u75281N\u7684\u6c22\u6c27\u5316\u94a0\u6216\u76d0\u9178\uff0c\u6ef4\u5165\u2462\u4e2d\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u91cc\uff0c\u6bcf\u6b21\u53ea\u6ef4\u51e0\u6ef4\uff0c\u6ef4\u540e\u6405\u62cc\u5747\u5300\uff0c\u5e76\u7528pH\u8bd5\u7eb8\u6d4b\u5176pH\u503c\uff0c\u76f4\u5230\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u7684pH\u503c\u8c03\u52305.8\u3002
\u2464\u5c06\u914d\u597d\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u7528\u6f0f\u6597\u5206\u88c5\u5230\u4e09\u89d2\u74f6(\u6216\u8bd5\u7ba1)\u4e2d\uff0c\u5e76\u7528\u68c9\u585e\u585e\u7d27\u74f6\u53e3\uff0c\u74f6\u58c1\u5199\u4e0a\u53f7\u7801\u3002\u74f6\u4e2d\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u91cf\u7ea6\u4e3a\u5bb9\u91cf\u76841/4\u62161/5\u3002
\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u6210\u5206\u6bd4\u8f83\u590d\u6742\uff0c\u4e3a\u907f\u514d\u914d\u5236\u65f6\u5fd9\u4e71\u800c\u5c06\u4e00\u4e9b\u6210\u5206\u6f0f\u6389\uff0c\u53ef\u4ee5\u51c6\u5907\u4e00\u4efd\u914d\u5236\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u6210\u5206\u5355\uff0c\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u5168\u90e8\u6210\u5206\u548c\u7528\u91cf\u586b\u5199\u6e05\u695a\u3002\u914d\u5236\u65f6\uff0c\u6309\u8868\u5217\u5185\u5bb9\u987a\u5e8f\uff0c\u6309\u9879\u6309\u91cf\u79f0\u53d6\uff0c\u5c31\u4e0d\u4f1a\u51fa\u73b0\u5dee\u9519\u3002\u6210\u5206\u5355\u7684\u683c\u5f0f\u4e0e\u5185\u5bb9\u89c1\u88689\uff0d2\u3002
3.\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u706d\u83cc\u4e0e\u4fdd\u5b58
\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u5236\u5b8c\u6bd5\u540e\uff0c\u5e94\u7acb\u5373\u706d\u83cc\u3002\u57f9\u517b\u57fa\u901a\u5e38\u5e94\u5728\u9ad8\u538b\u84b8\u6c7d\u706d\u83cc\u9505\u5185\uff0c\u5728\u6c7d\u76f8120\u2103\u6761\u4ef6\u4e0b\uff0c\u706d\u83cc20\u5206\u949f\u3002\u5982\u679c\u6ca1\u6709\u9ad8\u538b\u84b8\u6c7d\u706d\u83cc\u9505\uff0c\u4e5f\u53ef\u91c7\u7528\u95f4\u6b47\u706d\u83cc\u6cd5\u8fdb\u884c\u706d\u83cc\uff0c\u5373\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u716e\u6cb810\u5206\u949f\uff0c24\u5c0f\u65f6\u540e\u518d\u716e\u6cb820\u5206\u949f\uff0c\u5982\u6b64\u8fde\u7eed\u706d\u83cc\u4e09\u6b21\uff0c\u5373\u53ef\u8fbe\u5230\u5b8c\u5168\u706d\u83cc\u7684\u76ee\u7684\u3002
\u7ecf\u8fc7\u706d\u83cc\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u5e94\u7f6e\u4e8e10\u2103\u4e0b\u4fdd\u5b58\uff0c\u7279\u522b\u662f\u542b\u6709\u751f\u957f\u8c03\u8282\u7269\u8d28\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u57284\uff5e5\u2103\u4f4e\u6e29\u4e0b\u4fdd\u5b58\u8981\u66f4\u597d\u4e9b\u3002\u542b\u5432\u54da\u4e59\u9178\u6216\u8d64\u9709\u7d20\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u8981\u5728\u914d\u5236\u540e\u7684\u4e00\u5468\u5185\u4f7f\u7528\u5b8c\uff0c\u5176\u5b83\u57f9\u517b\u57fa\u6700\u591a\u4e5f\u4e0d\u5e94\u8d85\u8fc7\u4e00\u4e2a\u6708\u3002\u5728\u591a\u6570\u60c5\u51b5\u4e0b\uff0c\u5e94\u5728\u6d88\u6bd2\u540e\u4e24\u5468\u5185\u7528\u5b8c\u3002
\u5927\u91cf\u5143\u7d20
500ml\u6bcd\u6db2 \u4e2d\u542b
KH2PO4 4.25g
MgSO4\u00b77H2O 9.25g
MgSO4 4.525g
KNO3 47.5g
NH4NO3 41.25g
\u4f7f\u7528\u65f6 \u53d65ml
\u9499\u76d0
500ml\u6bcd\u6db2\u4e2d\u542b
CaCl2\u00b72H2O 11g
\u4f7f\u7528\u65f6\u53d6 5ml
\u5fae\u91cf\u5143\u7d20
500ml\u6bcd\u6db2\u4e2d\u542b
KI 0.0415g
MnSO4\u00b74H2O 1.115g
ZnSO4\u00b77H2O 0.43g
Na2MoO4\u00b72H2O 0.0125g
CuSO4\u00b75H2O 0.00125g
CoCl2\u00b76H2O 0.00125g
H3BO3 0.31g
\u4f7f\u7528\u65f6\u53d610ml
\u94c1\u76d0
500ml\u6bcd\u6db2\u4e2d\u542b
FeSO4\u00b77H2O 1.3925g
Na2-EDTA\u00b72H2O 1.8625g
\u4f7f\u7528\u65f6\u53d610ml
\u6709\u673a\u7269
500ml\u6bcd\u6db2\u4e2d\u542b
\u808c\u9187 5g
VB6 0.025g
VB1 0.005g
\u7518\u6c28\u9178 0.1g
\u70df\u9178 0.025g
\u4f7f\u7528\u65f6\u53d610ml
\u5206\u522b\u5c06\u4ee5\u4e0a\u4e94\u5927\u7c7b\u6309\u89c4\u5b9a\u91cf\u52a0\u5165\u52301L\u5bb9\u5668\uff08\u5982\u642a\u74f7\u676f\uff09\u5e76\u5b9a\u5bb9\u5373\u4e3a1/4ms\u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9
\u8517\u7cd6\u3001\u743c\u8102\u53ca\u6fc0\u7d20\u6839\u636e\u4e0d\u540c\u6750\u6599\u3001\u4e0d\u540c\u57f9\u517b\u9636\u6bb5\u3001\u8bf1\u5bfc\u76ee\u7684\uff0c\u52a0\u7684\u91cf\u6709\u6240\u4e0d\u540c\u3002
一、组成培养基的五类成分
目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
1.无机营养物
无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源
培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3.维生素
在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。
4.有机附加物
包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。
5.生长调节物质
常用的生长调节物质大致包括以下三类：
(1)植物生长素类。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。
(2)细胞分裂素。如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。
(3)赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸(GA3)。
二、常用培养基配方
1.常用培养基配方
组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点，适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时，应对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择使用。下面介绍组织培养几种常用培养基的配方见表9－1。
培养基中的激素种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料而有变化，因此各配方中均不列入。
2.几种常用培养基的特点
(1) MS培养基。 MS培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度，对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响离子间的平衡。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖及花药培养，它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这种培养基中的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况下，无须再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。与其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的明显特点。
(2)B5培养基。B5培养基的主要特点是含有较低的铵，这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用。经过试验发现，有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好，而另一些植物，在B5培养基上更适宜。
(3)N6培养基。N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养，在国内外得到广泛应用。在组织培养中，经常采用的还有怀特(While，1963)培养基、尼许(Nitsch，1951)培养基等。它们在基本成分上大同小异。怀特培养基由于无机盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。
其余的培养基还有很多，可根据所培养的植物所决定。
组培培养基的配制：
MS培养基。
MS培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度，对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响离子间的平衡。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖及花药培养，它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这种培养基中的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况下，无须再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。与其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的明显特点。
B5培养基。
B5培养基的主要特点是含有较低的铵，这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用。经过试验发现，有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好，而另一些植物，在B5培养基上更适宜。
N6培养基。
N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养，在国内外得到广泛应用。在组织培养中，经常采用的还有怀特(While，1963)培养基、尼许(Nitsch，1951)培养基等。它们在基本成分上大同小异。怀特培养基由于无机盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。
不同的植物，所需要营养不一样，比如我是做国兰的，把洋兰的那些配方拿到国兰上面来试验，效果不是很好，有些成分要自己慢慢去试验才能得出结果的
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