请教毛细管电泳的一些问题 老师 您好 请教您一个问题

\u8bf7\u6559\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7535\u6cf3\u6545\u969c\u95ee\u9898

\u5982\u679c\u5df2\u7ecf\u8fdb\u884c\u4e86\u6d17\u7535\u6781\uff0c\u6362\u7f13\u51b2\u6db2\uff0c\u51b2\u6d17\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u8fd9\u51e0\u4e2a\u6b65\u9aa4\uff0c\u8fd8\u51fa\u73b0\u7535\u6d41\u4f4e\uff0c\u4e14\u57fa\u7ebf\u4e0d\u7a33\uff0c\u6309\u5e38\u89c4\u7684\u73b0\u8c61\u6700\u6709\u53ef\u80fd\u7684\u5c31\u662f\u6709\u6c14\u6ce1\u3002\u636e\u6211\u6240\u77e5\u505aCE\u7f13\u51b2\u6db2\u65e0\u9700\u9884\u5148\u8131\u6c14\uff0c\u5982\u679c\u56e0\u4e3a\u6c14\u6ce1\u5f71\u54cd\u5b9e\u9a8c\uff0c\u53ef\u4ee5\u8003\u8651\u91c7\u7528CEC\u6216\u522b\u7684\u529e\u6cd5

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\u4ee5\u4e0b\u662f\u4e00\u4e9b\u8d44\u6599

\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7535\u6cf3\u662f\u4ee5\u5f39\u6027\u77f3\u82f1\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u4e3a\u5206\u79bb\u901a\u9053\uff0c\u4ee5\u9ad8\u538b\u76f4\u6d41\u7535\u573a\u4e3a\u9a71\u52a8\u529b\uff0c\u4f9d\u636e\u6837\u54c1\u4e2d\u5404\u7ec4\u5206\u4e4b\u95f4\u6dcc\u5ea6\u548c\u5206\u914d\u884c\u4e3a\u4e0a\u7684\u5dee\u5f02\u800c\u5b9e\u73b0\u5206\u79bb\u7684\u7535\u6cf3\u5206\u79bb\u5206\u6790\u65b9\u6cd5\u3002\u8bbe\u5907\u7684\u4e3b\u8981\u90e8\u4ef6\u67090\uff5e30kV\u53ef\u8c03\u7a33\u538b\u7a33\u6d41\u7535\u6e90\uff0c\u5185\u5f84\u5c0f\u4e8e100\u03bcm(\u5e38\u752850\uff5e75\u03bcm)\u3001\u957f\u5ea6\u4e00\u822c\u4e3a30\uff5e100cm\u7684\u5f39\u6027\u77f3\u82f1\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u3001\u7535\u6781\u69fd\u3001\u68c0\u6d4b\u5668\u548c\u8fdb\u6837\u88c5\u7f6e\u3002\u68c0\u6d4b\u5668\u6709\u7d2b\u5916\uff0f\u53ef\u89c1\u5206\u5149\u68c0\u6d4b\u5668\u3001\u6fc0\u5149\u8bf1\u5bfc\u8367\u5149\u68c0\u6d4b\u5668\u548c\u7535\u5316\u5b66\u68c0\u6d4b\u5668\uff0c\u524d\u8005\u6700\u4e3a\u5e38\u7528\u3002\u8fdb\u6837\u65b9\u6cd5\u6709\u7535\u52a8\u6cd5(\u7535\u8fc1\u79fb)\u3001\u538b\u529b\u6cd5(\u6b63\u538b\u529b\u3001\u8d1f\u538b\u529b)\u548c\u8679\u5438\u6cd5\u3002\u6210\u5957\u4eea\u5668\u8fd8\u914d\u6709\u81ea\u52a8\u51b2\u6d17\u3001\u81ea\u52a8\u8fdb\u6837\u3001\u6e29\u5ea6\u63a7\u5236\u3001\u6570\u636e\u91c7\u96c6\u548c\u5904\u7406\u7b49
\u90e8\u4ef6\u3002
\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7535\u6cf3\u6240\u7528\u7684\u77f3\u82f1\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u67f1\uff0c\u5728pH\u503c\uff1e3\u7684\u60c5\u51b5\u4e0b\uff0c\u5176\u5185\u8868\u9762\u5e26\u8d1f\u7535\uff0c\u4e0e\u7f13\u51b2\u6db2\u63a5\u89e6\u65f6\u5f62\u6210\u53cc\u7535\u5c42\uff0c\u5728\u9ad8\u538b\u7535\u573a\u4f5c\u7528\u4e0b\uff0c\u5f62\u6210\u53cc\u7535\u5c42\u4e00\u4fa7\u7684\u7f13\u51b2\u6db2\u7531\u4e8e\u5e26\u6b63\u7535\u800c\u5411\u8d1f\u6781\u65b9\u5411\u79fb\u52a8\uff0c\u4ece\u800c\u5f62\u6210\u7535\u6e17\u6d41\u3002\u540c\u65f6\uff0c\u5728\u7f13\u51b2\u6eb6\u6db2\u4e2d\uff0c\u5e26\u7535\u7c92\u5b50\u5728\u7535\u573a\u4f5c\u7528\u4e0b\uff0c\u4ee5\u5404\u81ea\u4e0d\u540c\u901f\u5ea6\u5411\u5176\u6240\u5e26\u7535\u8377\u6781\u6027\u76f8\u53cd\u65b9\u5411\u79fb\u52a8\uff0c\u5f62\u6210\u7535\u6cf3\u3002\u5e26\u7535\u7c92\u5b50\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7f13\u51b2\u6db2\u4e2d\u7684\u8fc1\u79fb\u901f\u5ea6\u7b49\u4e8e\u7535\u6cf3\u548c\u7535\u6e17\u6d41\u7684\u77e2\u91cf\u548c\u3002\u5404\u79cd\u7c92\u5b50\u7531\u4e8e\u6240\u5e26\u7535\u8377\u591a\u5c11\u3001\u8d28\u91cf\u3001\u4f53\u79ef\u4ee5\u53ca\u5f62\u72b6\u4e0d\u540c\u7b49\u56e0\u7d20\u5f15\u8d77\u8fc1\u79fb\u901f\u5ea6\u4e0d\u540c\u800c\u5b9e\u73b0\u5206\u79bb\u3002
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(1)\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u533a\u5e26\u7535\u6cf3\uff0c\u7528\u4ee5\u5206\u6790\u5e26\u7535\u6eb6\u8d28\u3002\u4e3a\u4e86\u964d\u4f4e\u7535\u6e17\u6d41\u548c\u5438\u9644\u73b0\u8c61\uff0c\u53ef\u5c06\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u5185\u58c1\u6d82\u5c42\u3002
(2)\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u51dd\u80f6\u7535\u6cf3\uff0c\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u4e2d\u88c5\u5165\u5355\u4f53\uff0c\u5f15\u53d1\u805a\u5408\u5f62\u6210\u51dd\u80f6\uff0c\u4e3b\u8981\u7528\u4e8e\u6d4b\u5b9a\u86cb\u767d\u8d28\u3001DNA\u7b49\u5927\u5206\u5b50\u5316\u5408\u7269\u3002\u53e6\u6709\u5c06\u805a\u5408\u7269\u6eb6\u6db2\u7b49\u5177\u6709\u7b5b\u5206\u4f5c\u7528\u7684\u7269\u8d28\uff0c\u5982\u8461\u805a\u7cd6\u3001\u805a\u73af\u6c27\u4e59\u70f7\uff0c\u88c5\u4eba\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u4e2d\u8fdb\u884c\u5206\u6790\uff0c\u79f0\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u65e0\u80f6\u7b5b\u5206\u7535\u6cf3\uff0c\u6545\u6709\u65f6\u5c06\u6b64\u79cd\u6a21\u5f0f\u603b\u79f0\u4e3a\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7b5b\u5206\u7535\u6cf3\uff0c\u4e0b\u5206\u4e3a\u51dd\u80f6\u548c\u65e0\u80f6\u7b5b\u5206\u4e24\u7c7b\u3002
(3)\u80f6\u675f\u7535\u52a8\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u8272\u8c31\uff0c\u5728\u7f13\u51b2\u6db2\u4e2d\u52a0\u5165\u79bb\u5b50\u578b\u8868\u9762\u6d3b\u6027\u5242\u5982\u5341\u4e8c\u70f7\u57fa\u786b\u9178\u94a0\uff0c\u5f62\u6210\u80f6\u675f\uff0c\u88ab\u5206\u79bb\u7269\u8d28\u5728\u6c34\u76f8\u548c\u80f6\u675f\u76f8(\u51c6\u56fa\u5b9a\u76f8)\u4e4b\u95f4\u53d1\u751f\u5206\u914d\u5e76\u968f\u7535\u6e17\u6d41\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u5185\u8fc1\u79fb\uff0c\u8fbe\u5230\u5206\u79bb\u3002\u672c\u6a21\u5f0f\u80fd\u7528\u4e8e\u4e2d\u6027\u7269\u8d28\u7684\u5206\u79bb\u3002
(4)\u4eb2\u548c\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7535\u6cf3\uff0c\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u5185\u58c1\u6d82\u5e03\u6216\u5728\u51dd\u80f6\u4e2d\u52a0\u5165\u4eb2\u548c\u914d\u57fa\uff0c\u4ee5\u4eb2\u548c\u529b\u7684\u4e0d\u540c\u8fbe\u5230\u5206\u79bb\u76ee\u7684\u3002
(5)\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7535\u8272\u8c31\uff0c\u662f\u5c06HPLC\u7684\u56fa\u5b9a\u76f8\u586b\u5145\u5230\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u4e2d\u6216\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u5185\u58c1\u6d82\u5e03\u56fa\u5b9a\u76f8\uff0c\u4ee5\u7535\u6e17\u6d41\u4e3a\u6d41\u52a8\u76f8\u9a71\u52a8\u529b\u7684\u8272\u8c31\u8fc7\u7a0b\uff0c\u6b64\u6a21\u5f0f\u517c\u5177\u7535\u6cf3\u548c\u6db2\u76f8\u8272\u8c31\u7684\u5206\u79bb\u673a\u5236\u3002
(6)\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7b49\u7535\u805a\u7126\u7535\u6cf3\uff0c\u662f\u901a\u8fc7\u5185\u58c1\u6d82\u5c42\u4f7f\u7535\u6e17\u6d41\u51cf\u5230\u6700\u5c0f\uff0c\u518d\u5c06\u6837\u54c1\u548c\u4e24\u6027\u7535\u89e3\u8d28\u6df7\u5408\u8fdb\u6837\uff0c\u4e24\u4e2a\u7535\u6781\u69fd\u4e2d\u5206\u522b\u4e3a\u9178\u548c\u78b1\uff0c\u52a0\u9ad8\u7535\u538b\u540e\uff0c\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u5185\u5efa\u7acb\u4e86pH\u68af\u5ea6\uff0c\u6eb6\u8d28\u5728\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u4e2d\u8fc1\u79fb\u81f3\u5404\u81ea\u7684\u7b49\u7535\u70b9\uff0c\u5f62\u6210\u660e\u663e\u533a\u5e26\uff0c\u805a\u7126\u540e\u7528\u538b\u529b\u6216\u6539\u53d8\u68c0\u6d4b\u5668\u672b\u7aef\u7535\u6781\u69fd\u50a8\u6db2\u7684pH\u503c\u4f7f\u6eb6\u8d28\u901a\u8fc7\u68c0\u6d4b\u5668\u3002
(7)\u6bdb\u7ec6\u7ba1\u7b49\u901f\u7535\u6cf3\uff0c\u91c7\u7528\u5148\u5bfc\u7535\u89e3\u8d28\u548c\u540e\u7ee7\u7535\u89e3\u8d28\uff0c\u4f7f\u6eb6\u8d28\u6309\u5176\u7535\u6cf3\u5018\u5ea6\u4e0d\u540c\u5f97\u4ee5\u5206\u79bb\u3002
\u4ee5\u4e0a\u5404\u6a21\u5f0f\u4ee5(1)\u3001(2)\u3001(3)\u79cd\u5e94\u7528\u8f83\u591a\u3002
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  毛细管电泳: 是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。
  主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器,前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。
  毛细管电泳所用的石英毛细管柱,在pH值>3的情况下,其内表面带负电,与缓冲液接触时形成双电层,在高压电场作用下,形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动,从而形成电渗流。同时,在缓冲溶液中,带电粒子在电场作用下,以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动,形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。

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