观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的过程 “观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,正确的实验步骤是...
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观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的过程是取口腔上皮细胞制片→水解→冲洗→染色→观察。(图1-图4)
1、制片:制作人口腔上皮细胞临时装片
在洁净的载玻片上用滴管滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。用消毒牙签在自己的口腔内侧壁上轻刮几下,再把牙签上附有碎屑的一端放在液滴中涂抹几下。用火柴点燃酒精灯,将涂有口轻上皮细胞的载玻片烘干。
2、水解,在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。在大烧杯中加入30℃温水。将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
3、冲洗,用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
4、染色,用吸水纸吸去载玻片上的水分。将吡罗红甲基绿混合染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min。吸去多余染色剂,盖上盖玻片。
如图:
5、观察,低倍镜观察:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰。高倍镜观察:调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。可以清楚地看到被染成绿色的DNA主要集中于细胞核中,而被染成红色的RNA主要集中于细胞质中。如图所示:
参考资料来源:百度百科-叶绿体DNA
一、问题研究
1、原理与解析
(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。
(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(3)盐酸的作用
① 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;
② 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。
注意事项�
1.材料的选择
① 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;
② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)
2.取材要点
① 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质;
② 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。
3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。�
4.安全要点�
① 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;
② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。
5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。
主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例)
1.取材�
① 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液;�
② 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;�
③ 涂: 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;�
④ 烘: 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。�
2.水解
① 解: 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解;
② 保: 将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。�
3.冲洗涂片
① 冲: 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟;
② 吸: 用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4.染色�
① 染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;
② 吸: 吸去多余染色剂;
③ 盖: 盖上盖玻片。
5.观察�
① 低: 在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;
② 高: 转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
实验3DNA和RNA在细胞中的分布
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