酵母双杂交技术和免疫工共沉淀技术在研究蛋白质相互作用方面的优缺点的比较 研究蛋白质之间相互作用的实验方法有哪些?

\u86cb\u767d\u8d28\u7ec4\u5b66\u4e3b\u8981\u5305\u62ec\u54ea\u4e9b\u5206\u6790\u6280\u672f\u53ca\u5404\u81ea\u7279\u70b9

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\u3000\u3000MALDI \u7684\u7535\u79bb\u65b9\u5f0f\u662f Karas\u548cHillenkamp\u4e8e1988\u5e74\u63d0\u51fa\u3002MALDI\u7684\u57fa\u672c\u539f\u7406\u662f\u5c06\u5206\u6790\u7269\u5206\u6563\u5728\u57fa\u8d28\u5206\u5b50\uff08\u5c3c\u53e4\u4e01\u9178\u53ca\u5176\u540c\u7cfb\u7269\uff09\u4e2d\u5e76\u5f62\u6210\u6676\u4f53\uff0c\u5f53\u7528\u6fc0\u5149\uff08337nm\u7684\u6c2e\u6fc0\u5149\uff09\u7167\u5c04\u6676\u4f53\u65f6\uff0c\u57fa\u8d28\u5206\u5b50\u5438\u6536\u6fc0\u5149\u80fd\u91cf\uff0c\u6837\u54c1\u89e3\u5438\u9644\uff0c\u57fa\u8d28-\u6837\u54c1\u4e4b\u95f4\u53d1\u751f\u7535\u8377\u8f6c\u79fb\u4f7f\u6837\u54c1\u5206\u5b50\u7535\u79bb\u3002\u5b83\u4ece\u56fa\u76f8\u6807\u672c\u4e2d\u4ea7\u751f\u79bb\u5b50\uff0c\u5e76\u5728\u98de\u884c\u7ba1\u4e2d\u6d4b\u5b9a\u5176\u5206\u5b50\u91cf\uff0cMALDI-TOF-MS\u4e00\u822c\u7528\u4e8e\u80bd\u8d28\u91cf\u6307\u7eb9\u56fe\u8c31\uff0c\u975e\u5e38\u5feb\u901f\uff08\u6bcf\u6b21\u5206\u6790\u53ea\u97003~5min\uff09\uff0c\u7075\u654f\uff08\u8fbe\u5230fmol\u6c34\u5e73\uff09\uff0c\u53ef\u4ee5\u7cbe\u786e\u6d4b\u91cf\u80bd\u6bb5\u8d28\u91cf\uff0c\u4f46\u662f\u5982\u679c\u5728\u5206\u6790\u524d\u4e0d\u4fee\u9970\u80bd\u6bb5\uff0cMALDI-TOF-MS\u4e0d\u80fd\u7ed9\u51fa\u80bd\u7247\u6bb5\u7684\u5e8f\u5217\u3002

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我没看过朱玉贤的书,但是根据我所看文献资料,能提供一些信息:

酵母双杂交技术
优势:
1。大规模筛选,
2。操作简单,直观(可以用荧光做报告基因,也可以用氨基酸缺陷型平板筛选等)
缺点:
1。传统的酵母双杂交(好像发表在1989年的nature杂志上,你可以去查看下,记的不确切了)技术不能研究膜蛋白的相互作用。由此派生出的新技术研究膜蛋白的相互作用较困难。
2。酵母双杂交技术研究的目的蛋白相互作用需在酵母细胞核内发生相互作用,那么新的问题产生了:如果酵母双杂交技术显示两个蛋白相互作用(也就是在酵母细胞核内,这两个蛋白确实相互作用),但是两个相互作用蛋白在原宿主内却位于不同细胞器(也就是他们不可能出现在同一个位置),那么假阳性就产生了,由此出现的例子很多。

虽然有上述不足,但是酵母双杂交技术还是大大推动了蛋白质相互作用研究。

免疫共沉淀技术:

能弥补上述酵母双杂交技术的不足,但是没有上述酵母双杂交技术的优势。

两个技术结合使用,能互相补充彼此缺陷,叠加优势。

扩展阅读:酵母单杂交科普 ... 酵母双杂交自激活验证 ... 免疫荧光共沉淀 ... 膜体系酵母双杂交步骤 ... 如何看懂免疫共沉淀图 ... 免疫共沉淀技术应用 ... 免疫沉淀中的ip和ib ... 酵母双杂交系统原理及方法 ... 双酵母杂交蛋白质相互作用 ...

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