用聚酰胺色谱柱如何分离黄酮类化合物？
聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的规律如下：
分子中酚羟基数目越多则吸附力越强，在色谱柱上越难以被洗脱。
与酚羟基位置有关，如所处位置易于形成分子内氢键，则吸附力减小，在色谱柱上易洗脱。
分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强，在色谱柱上难洗脱。
分离苷与苷元时，若以含水溶剂如甲醇-水洗脱，苷比苷元先洗脱，若以有机溶剂如氯仿-甲醇洗脱，则苷元比苷先洗脱。
聚酰胺（Polyamide）是通过酰胺基聚合而成的一类高分子化合物，层析分离中常用的聚酰胺是由己内酰胺聚合而成的尼龙6和由己二酸和己二胺聚合而成的尼龙66。
聚酰胺分子中含有丰富的酰胺基团，可与酚类、醌类、硝基化合物等形成氢键而被吸附，与不能形成氢键的化合物分离。所以，利用聚酰胺作为层析柱填料，可使一定极性范围的某类物质得以分离精制。
加样
聚酰胺的样品容量较大，一般每100ml聚酰胺粉可上样1.5～2.5g，可根据具体情况适当增加或减少。若利用聚酰胺除去鞣质，样品上柱量可大大增加，通常观察鞣质在柱上形成的橙红色色带的移动，当样品加至该色带移至柱的近底端时，停止加样。
样品常用洗脱剂溶解，浓度在20～30%。不溶样品可用甲醇、乙醇、丙酮、乙醚等易挥发溶剂溶解，拌入聚酰胺干粉中，拌匀后将溶剂减压蒸去，以洗脱剂浸泡装入柱中。
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