原位杂交和核酸杂交是一种吗 免疫组化和原位杂交的区别

\u5728\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u4e2d \u4e3a\u4ec0\u4e48rna\u53ef\u4ee5\u548cdna\u6742\u4ea4\uff1f\u6c42\u89e3\u91ca

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RNA\u539f\u4f4d\u6838\u9178\u6742\u4ea4\u53c8\u79f0RNA\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u7ec4\u7ec7\u5316\u5b66\u6216RNA\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u3002\u8be5\u6280\u672f\u662f\u6307\u8fd0\u7528cRNA\u6216\u5be1\u6838\u82f7\u9178\u7b49\u63a2\u9488\u68c0\u6d4b\u7ec6\u80de\u548c\u7ec4\u7ec7\u5185RNA\u8868\u8fbe\u7684\u4e00\u79cd\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u6280\u672f\u3002\u5176\u57fa\u672c\u539f\u7406\u662f\uff1a\u5728\u7ec6\u80de\u6216\u7ec4\u7ec7\u7ed3\u6784\u4fdd\u6301\u4e0d\u53d8\u7684\u6761\u4ef6\u4e0b\uff0c\u7528\u6807\u8bb0\u7684\u5df2\u77e5\u7684RNA\u6838\u82f7\u9178\u7247\u6bb5\uff0c\u6309\u6838\u9178\u6742\u4ea4\u4e2d\u78b1\u57fa\u914d\u5bf9\u539f\u5219\uff0c\u4e0e\u5f85\u6d4b\u7ec6\u80de\u6216\u7ec4\u7ec7\u4e2d\u76f8\u5e94\u7684\u57fa\u56e0\u7247\u6bb5\u76f8\u7ed3\u5408\uff08\u6742\u4ea4\uff09\uff0c\u6240\u5f62\u6210\u7684\u6742\u4ea4\u4f53 (Hybrids\uff09\u7ecf\u663e\u8272\u53cd\u5e94\u540e\u5728\u5149\u5b66\u663e\u5fae\u955c\u6216\u7535\u5b50\u663e\u5fae\u955c\u4e0b\u89c2\u5bdf\u5176\u7ec6\u80de\u5185\u76f8\u5e94\u7684mRNA\u3001rRNA\u548ctRNA\u5206\u5b50\u3002RNA\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u6280\u672f \u7ecf\u4e0d\u65ad\u6539\u8fdb\uff0c\u5176\u5e94\u7528\u7684\u9886\u57df\u5df2\u8fdc\u8d85\u51faDNA\u539f\u4f4d\u6742\u4ea4\u6280\u672f\u3002\u5c24\u5176\u5728\u57fa\u56e0\u5206\u6790\u548c\u8bca\u65ad\u65b9\u9762\u80fd\u4f5c\u5b9a\u6027\u3001\u5b9a\u4f4d\u548c\u5b9a\u91cf\u5206\u6790\uff0c\u5df2 \u6210\u4e3a\u6700\u6709\u6548\u7684\u5206\u5b50\u75c5\u7406\u5b66\u6280\u672f\uff0c\u540c\u65f6\u5728\u5206\u6790\u4f4e\u4e30\u5ea6\u548c\u7f55\u89c1\u7684mRNA\u8868\u8fbe\u65b9\u9762\u5df2\u5c55\u793a\u4e86\u5206\u5b50\u751f\u7269\u5b66\u7684\u4e00\u91cd\u8981\u65b9\u5411\u3002

1\u3001\u5b9a\u4e49\u4e0d\u540c
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2\u3001\u4f5c\u7528\u4e0d\u540c
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3\u3001\u610f\u4e49\u4e0d\u540c
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核酸杂交方法是一种分子生物学的标准技术,用于检测DNA或RNA分子的特定序列(靶序列).经典的核酸杂交方法是将DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记,在膜上杂交时,探针通过氢键与其互补的靶序列结合,洗去未结合的游离探针后,经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针.
经典的核算杂交方法主要包括:DNA印迹杂交(Southern blot)RNA印迹杂交(Northern blot)以及斑点杂交和原位杂交:
1、 DNA印迹杂交(DNA blot hybridization)——有两种核酸印迹法:
将DNA或RNA溶液直接点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上(斑点或狭线印迹)
经琼脂糖凝胶电泳将片段的DNA或RNA转移到膜上(Southern和Northern印迹法).DNA在电泳前先用限制性内切酶消化.
2、 RNA印迹杂交(RNA blot hybridization):
RNA印迹杂交是一种检测已固定在滤膜上的总RNA或mRNA特定靶序列的技术.
3、 斑点杂交
将少量核酸样品点样在硝酸纤维素滤膜上,80℃烘烤后可牢固地固定在膜上,再用探针进行杂交.尼龙膜,特别是聚偏氟乙烯(PVDF)与DNA结合力更高,坚韧、易操作.点样可手工,也可用手工点样品.检测可用放射性探针自显影或非放射性探针显色.可用于DNA或RNA分析.
4、 原位杂交
在保持细胞形态条件下,进行细胞内杂交,显影或显色.可用于DNA或RNA分析.荧光原位杂交(FISH)进行染色体DNA分析可用于生物学研究的许多领域以及临床细胞遗传学研究.其主要优点是不仅可以在细胞分裂的中期,而且可在分裂间期核中诊断染色体的变化.
广义的核酸杂交就是指非同源的核酸分子间的复性(氢键结合)过程.因此可以说,目前的基因检测技术,除了质普法外都或多或少的涉及了核酸杂交原理.如PCR的引物复性过程、基因芯片的杂交检测过程、基因测序的引物复性过程以及各种SNP检测方法等等.

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