酒炙数据考（二）续断
续断现代研究表明续断经酒炙后，可引药向外行散，增强通血脉之效，在治疗跌扑毁伤、筋骨疼痛、风湿痹痛上，有生品无法比拟的效果， 临床上酒炙品应用最为广泛。目前对于续断炮制的物质基础研究多集中在三萜皂苷 微量元素的研究上，对其挥发油的研究报道较少， 而中药的功效是由多个组分协同发挥药效的， 仅仅从续断中皂苷和无机元素来研究是不够的。续断生品和酒炙品共有的成分有 8个，分别为异戊醛、己醛 2-戊基呋喃、右旋柠檬烯、癸醛 、丁香酚、1-石竹烯 十五烷， 两者含有的共有成分分别占各自挥发性成分总量的58.66%和40.70%，其中丁香酚是共有成分中相对含量最高的 ( 生品占28.37%，酒炙品占6.76% ) 续断生品中主要挥发性成分相对含量较高，如丁香酚 右旋柠檬烯在生品挥发性成分中占39.28%; 经酒炙后，挥发性成分种类少于生品，含量也明显降低。以峰面积为考察指标， 酒炙后续断中丁香酚 右旋柠檬烯和 1-石竹烯的相对含量分别仅占生品的11.60%、29.71%、27.98%，生品中含有的芳樟醇在酒炙品中未检测出，而很多醛类成分在酒炙品中被检测出， 推测可能是酒炙辅料黄酒中成分或续断中挥发性成分在炒制加热过程新产生成分，在续断酒炙品中还检测出了2，6-二甲基吡嗪、2-乙基- 6-甲基吡嗪等吡嗪类成分和5-甲基呋喃醛等呋喃类成分。呋喃和吡嗪类成分具有浓郁的芳香性气味，被广泛运用于药物合成及食用香料等领域。由实验可知，续断酒炙品较生品具有香气，推测可能是醛类、吡嗪、呋喃类引起的， 而萜类成分较生品明显降低，推测可能是由于高温炒制过程中，挥发性成分挥发或被氧化分解所致。续断生品和酒炙品中挥发性成分大多具有明显的药理作用，丁香酚有抑菌、麻醉、解热、抗氧化、抗肿瘤等药理作用; 右旋柠檬烯具有抗肿瘤活性，并成量效关系，芳樟醇具有镇痛抗炎的药理活性。酒炙品中新产生成分 5-羟甲基糠醛( 5-HMF) 具有舒张血管平滑肌，抑制血小板的聚集，减轻血管内皮细胞的损伤作用， 这为续断酒炙品具有调血脉，除痹痛的功效提供了一种参考依据 综上所述，本试验表明续断炮炙前后的挥发性成分差异明显， 临床使用时应加以区别。
续断古代炮制的方法很多， 始载于南北朝刘宋时代， 主要包括净制、 切制、 酒制、 米泔制、 焙制、 面制、 炒制等。南朝宋时有酒浸焙制， 唐代有米泔浸制， 宋代有酒浸炒、 酒浸， 元代有面水炒制， 明代增加了酒洗、 酒拌、 酒蒸、 炒制等， 清代有酒洗蒸、酒煎制。酒制又包括酒焙、 酒炒、 酒浸、 酒洗、 酒拌、 酒蒸、 酒煎等。在古代炮制方法中， 以酒制法为主， 续断酒炙后可引药上行、 行散， 增强通血脉、 强筋骨的功效。酒炙品以文火炒续断，颜色至微黑或灰褐色，略有酒气，辅料黄酒用量多以100∶10和100∶15为度，加酒形式以 “先拌匀、 后闷润至透” 为主，北京对闷润时间进行了量化， 为1～2 h。盐炙品以文火炒续断，颜色至黑褐色，味微咸，辅料盐用量多以100∶2为度，加盐形式以“拌匀、 闷润至透” 为主。、 1995年以及之前的 《中国药典》 只收载生续断，均强调洗净润透、切薄片。2000年版和2005年版 《中国药典》开始收载续断酒炙品和盐炙品：酒炙时用文火炒颜色至微带黑色，辅料黄酒用量为100∶10为度，加酒形式以拌匀、闷透；盐炙时用文火炒干，辅料盐用量为100∶2为度，加盐形式以盐水拌匀、闷透。2000年版和2005年版《中国药典》新增生续断浸出物测定项目，不得＜45.0％。2010年版《中国药典》中，酒炙时辅料黄酒用量变为 “100∶10～20”，续断片增加含量测定（川续断皂苷Ⅵ＞1.5％）、鉴别、检查（水分＜15％，总灰分＜12％，酸不溶性灰分＜3％）3个项目，酒炙品和盐炙品也增加了上述3个项目，而且盐炙品还增加了性状标准 （表面黑褐色）。大部分教材均要求续断酒炙时黄酒被吸尽后，再用文火进行炒制，辅料黄酒用量为100∶10或100∶12为度，加酒形式以拌匀、闷透。续断盐炙时，大部分教材要求用文火炒干，1985年版教材要求炒至黄黑色。辅料盐用量均为100∶2为度，加盐形式以盐水拌匀、闷透。在质量要求方面，2007年版和2008年版教材均要求水溶性浸出物含量不得＜45.0％，而2012年版教材增加了水分（不得＜10.0％）、 总灰分（不得＞12.0％）、酸不溶性灰分（不得＞3.0％）、水溶性浸出物（不得＜45.0％）、川续断皂苷Ⅵ（不得＜1.5％）这些标准，与2010年版《中国药典》标准一致。
张丹等采用正交设计法对炒制温度、用盐量、闷润时间和炒制时间进行考察，优化续断盐炙工艺，得到最优盐炙条件为500g续断药材，加10g盐水浸润45min，在150 ℃条件炒制8min。许腊英等使用正交设计法对续断酒炙工艺条件如黄酒用量（10％、20％、30％）、 炒制温度 （150 ℃、170 ℃、190 ℃）、炒制时间 （6 min、8 min、10 min）进行优化， 得到最佳酒炙工艺为：续断片用10％的黄酒浸润，下锅温度150 ℃，炒制6 min。陈华曦应用正交试验法和方差分析对续断水洗工艺进行优化，最佳水洗工艺为5倍量水、水洗4次、洗3 min；最佳干燥工艺为60 ℃烘制17 h；最佳酒炙工艺为在150 ℃条件下用10％黄酒炒炙6 min。宋丽采用正交试验法，选择不同黄酒用量（10％、 15％、 20％、25％）、酒炙温度 （100 ℃、130 ℃、160 ℃、190 ℃）和酒炙时间（6 min、8 min、10 min、12 min）对酒炙工艺进行优化，最后得到最优酒炙条件为：在100 ℃条件下用10％黄酒炒制6 min。金奇等对续断盐炙过程中多个工艺参数进行了优化，选择不同盐用量、炒制温度、炒制时间和炒药机转速，得到最优盐炙条件为100 kg续断用2 kg食盐，在转速40r/min且温度210 ℃下炒制12min。
陈旭等前期研究比较了炮制对续断抗凝血作用的影响。研究结果显示，续断不同炮制品均具抗凝血作用，以酒炙续断的作用最强。同时还进行了炮制品的镇痛和抗炎药效测定。研究结果显示，酒续断镇痛效果最好，盐续断和生品镇痛效果一般；酒续断抗炎效果最好，生品次之，盐续断最差。炮制对续断成分和药效作用影响的结果显示，续断经酒炙后对续断皂苷等成分产生不同程度的影响，且酒炙后活血通络作用明显增强。
陈华曦对生续断和酒续断水煎液的镇痛抗炎作用差异进行比较，发现两者皆有镇痛作用，但是酒续断的镇痛作用更强。抗炎结果显示，两者都能抑制小鼠耳廓炎症和肿胀，无明显差异。辛继兰等制备了续断酒炙品、清炒品、盐炙品，并比较3种炮制品和生品的镇痛、抗炎和消血肿作用的差异。研究结果显示，酒续断的镇痛效果和抗炎效果最好，可能与酒的行散作用有关；而盐续断的消血肿作用最好，可能与盐的软坚散节作用有关。Li F等利用脂多糖 （LPS）诱导RAW264.7细胞模型筛选中药中的抗炎成分发现，续断提取物具有较好的抗炎活性，从而进一步对其进行分离，得到21个单体化合物，并对这些单体化合物进行炎症测试。研究结果显示，dipasperoside A、咖啡酸、续断苷A、续断苷B、川续断皂苷Ⅵ、4′-O-乙酰基续断皂苷Ⅵ、续断皂苷A这7个化合物具有抗炎活性， 其中dipaspero-side A和川续断皂苷Ⅵ活性最好，由此推断这两个成分是续断中的主要抗炎成分。
Kim BS等报道续断二氯甲烷部分对人肺泡、骨髓来源的间充质干细胞成骨分化的作用。与对照组比较，续断二氯甲烷部分可以明显增强碱性磷酸酶活性、蛋白表达骨涎蛋白和骨钙素。研究结果显示，二氯甲烷部份具有促进间充质干细胞成骨分化的潜能。此外，从二氯甲烷部分分离到单体化合物常春藤3-O-（2-O-乙酰基）-α-L-阿拉伯吡喃糖苷，也能明显增加碱性磷酸酶（ALP）活性、蛋白表达水平的骨涎蛋白和骨钙素。以上研究结果显示，续断二氯甲烷部分和单体常春藤3-O- （2-O-乙酰基）-α-L-阿拉伯吡喃糖苷在骨再生方面可能有临床应用前景。
Zhou YQ等[制备了川续断的5个不同组分（生物碱、挥发油、皂苷、 环烯醚萜苷和多糖）， 以Aβ25-35诱导PC12细胞为模型，研究5个不同组分对β-淀粉样肽诱导的细胞毒性的保护作用。研究结果显示，皂苷组分具有明显的保护作用。作者对皂苷组分进行了液相分析，结果显示，其主要成分为川续断皂苷Ⅵ。进一步对川续断皂苷Ⅵ及其常春藤苷元单独进行活性测试， 结果显示，川续断皂苷Ⅵ有明显的活性，而其苷元没有活性。
据报道，从川续断根部分离得到马钱苷酸乙酯、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、茶茱萸苷、丁香树脂醇-4′，4′ ′-O-双葡糖苷、 asperosaponin A、asperosaponin B、asperosaponin C等， 其中马钱苷酸乙酯、马钱苷、茶茱萸苷、asperosaponin A、asperosapon- in B、 asperosaponin C具有神经细胞保护作用，可以抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡。
Jiang WL等研究了川续断皂苷Ⅹ抗心肌缺血和再灌注损伤的潜在机制，给予10 mg/kg剂量的川续断皂苷Ⅹ，大鼠心肌抗心肌缺血和再灌注损伤的梗死体积减少，血流动力学改善，心肌损伤程度减少。此外，川续断皂苷Ⅹ可以降低大鼠血清促炎症因子，减少高迁移率族蛋白B1、 IκB-α的磷酸化和NF-κB在缺血心肌组织中的表达。
Song JS等报道，中药提取物可能会有引起血栓的风险，所以对21种中药提取物进行筛选， 试图发现具有促血小板凝血活性和促血栓形成风险的中药。研究结果显示，续断提取物有促凝血活性。作者使用液相对续断提取物进行表征，发现10个化合物，其中续断皂苷C的促凝血作用最强。
Liu JJ等报道，续断皂苷Ⅻ和续断皂苷ⅫⅠ具有促进UMR106细胞增殖的作用，并在4 μm浓度下提高UMR106细胞中的碱性磷酸酶活性，而碱性磷酸酶是成骨细胞分化早期和中期的关键物质。研究结果显示，续断皂苷Ⅻ和续断皂苷ⅫⅠ具有促进成骨细胞分化的作用。
Jung HW等用Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型，研究续断水提物在治疗类风湿关节炎方面的疗效。在造模后的21 d，续断水提液按50 mg/kg和100 mg/kg提取物灌胃给药，43d后，处死小鼠， 取血样和关节组织进行分析。研究结果显示，与模型组比较， 续断水提取物给药组小鼠的关节炎得分明显降低，血清抗Ⅱ型胶原 IgG 2α抗体、前列腺素、TNF-α、IL-1β和IL-6等指标也明显降低。此外，从病理组织切片中观察到续断水提取物给药组小鼠的关节构筑得到明显改善。研究结果显示，续断水提取物具有较好的关节炎治疗效果。
许建安采用常规抗炎模型 （二甲苯致小鼠耳廓肿胀）和镇痛模型（热板法和醋酸扭体法） 等实验研究续断的抗炎、镇痛作用。结果显示，与模型组比较，100g/kg剂量续断水煎液对大鼠耳廓肿胀度抑制率为45.2％， 60g/kg剂量续断水煎液给药后，大鼠足跖肿胀度明显减轻，10 g/kg剂量续断水煎液对大鼠肉芽组织增生抑制率达到44.8％， 2g/kg剂量续断水煎液给药可以明显增加大鼠痛阈时间，对大鼠扭体抑制率为55.8％。以上研究结果显示，续断水煎液具有良好的抗炎和镇痛效果。
武密山等研究川续断皂苷Ⅵ对骨骼干细胞分化成熟的作用。研究结果显示， 1μm和10μm浓度川续断皂苷Ⅵ可以明显提高成骨细胞中骨钙素含量和增强碱性磷酸酶的活性。此外，川续断皂苷Ⅵ明显增加核结合因子α-1 （Cbfα-1）mRNA的表达，而 Cbfα-1是调节骨钙素基因表达的关键转录因子。因此，续断皂苷Ⅵ主要通过调节Cbfα1、骨钙素、碱性磷酸酶起到促进成骨细胞增殖和分化的作用。
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