如何鉴定培养出来的细胞是A549细胞 求助：A549细胞和H1299细胞的区别和特点
h1299\u7ec6\u80de\u548ca549\u7ec6\u80de\u7684\u533a\u522b\u3000\u3000h1299\u7ec6\u80de\u6765\u6e90\u4e8e\u4e00\u4e2a\u6dcb\u5df4\u7ed3\u8f6c\u79fb\u3002\u60a3\u8005\u63a5\u53d7\u4e86\u521d\u671f\u653e\u7597\u3002\u7ec6\u80de\u5747\u4e00\u6027\u7684\u90e8\u5206\u7f3a\u5931p53\u86cb\u767d\uff0c\u5e76\u7f3a\u5c11p53\u86cb\u767d\u8868\u8fbe\u3002\u7ec6\u80de\u53ef\u4ee5\u5408\u62100.1pmol/\u6beb\u514b\u86cb\u767d\u7684NMB\u86cb\u767d\uff0c\u800c\u4e0d\u5408\u6210\u4fc3\u80c3\u6db2\u91ca\u653e\u80bd(GRP)\u3002
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\u4f7f\u7528\u6743\u9650 A\u7c7b
除非你给A549做了的荧光或者抗原标记，我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的.
培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素.传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化（100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右）,可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大（我的细胞大概要2min左右）,即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞（我们这大概吹打150次左右,注意四周边缘的细胞较密,要多吹打几次,最好慢慢吹不要产生泡泡）,然后分装,如果分装时细胞液不够,可再分别加入培养基.
体外细胞转化试验是以细胞形态恶性转化为检测终点。对转化细胞的判定通常采用细胞灶法，计数克隆数，观察鉴定转化灶，单盲法观察，由2人共同认定。转化灶的判定标准采用“第二届全国细胞和组织培养专题研讨会”通过的鉴定指标[1]：凡有50个以上聚集的细胞可认为是一个细胞灶。正常细胞灶,灶内细胞排列规则,束状,细胞灶外围区的细胞单层生长,规则。转化细胞灶,灶内细胞由正常的长梭形变为短梭状,失去接触抑制,呈复层生长,排列紊乱,形成交叉和旋涡。
目的通过对大鼠下丘脑神经元培养方法的改进研究,寻找更佳的下丘脑神经元培养方法。方法基于目前常用的Neurobasal+B27+GlumaxⅠ的神经元培养体系,采用多重过滤替代原来的取上清过滤的方法处理神经元,并对换液方式作出相应调整。以NF-200对细胞进行免疫组织化学染色鉴定。通过观察比较培养下丘脑神经元的细胞密度、神经元轴突长度和胞体面积等指标,对培养方法作出评价。结果2种培养方法均获得良好的培养效果,改进的方法在细胞密度,3、7、10、12d4个时间点均优于原培养方法;神经元轴突长度和胞体面积方面,新方法只在3d时优于原方法,至7d时二者差异已不明显。结论新方法具有稳定的可重复性,可应用于神经元的培养实验。
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