原生质体培养的方法有哪些发现? 原生质体的培养方法有哪些.各有何优缺点

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由于很多实验已证实了琼脂糖比琼脂更适于原生质体培养,近年来又发展了琼脂糖固体培养和液体培养相结合的方法。用几种植物的原生质体做实验,发现尽管琼脂糖提高了植板率,但到细胞团阶段后就难以再继续发育。

这可能是由于培养物把固体培养基中的营养耗尽所造成的。已发展一种“念珠培养”法,即把含有原生质体的琼脂糖培养基切成块放到大体积的液体培养基中,并在旋转摇床上振荡以利于通气。使用大体积的液体是为了防止琼脂糖块过渡破碎。用这种方法,不仅进一步提高一些种(如番茄原生质体)的植板率,而且使一些以前从未超过细胞团阶段的种,如芜菁和矮牵牛原生质体能够持续地分裂。在水稻原生质体培养中使用的琼脂糖泡培养法也是固、液结合的一个好方法。

把含有原生质体的琼脂糖念珠培养基以大约50μL一滴,滴在直径5.5cm的培养皿中,固化后,再向其中添加3mL液体培养基,这样,琼脂糖滴就处于液体培养基的包围之中。在培养过程中,可以通过改变液体培养基的渗透浓度来逐渐降低固体培养基的渗透浓度,以便使培养物持续地生长发育。



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