转染试剂哪种好 什么样的转染试剂转染效果比较好呢

293T\u7ec6\u80de\u54ea\u79cd\u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\u597d

\u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\u5728\u7ec6\u80de\u8f6c\u67d3\u3001\u7ec6\u80de\u8bc6\u522b\u3001\u6297\u4f53\u86cb\u767d\u7814\u53d1\u7b49\u9886\u57df\u5e7f\u6cdb\u4f7f\u7528\uff0c\u901a\u5e38\u53ef\u4ee5\u76f4\u63a5\u8d2d\u4e70\u6216\u8005\u8fc7\u5b9e\u9a8c\u5ba4\u4e2dDIY\u914d\u5236\u3002
Lipofectamine\u3001fugene\u3001\u78f7\u9178\u9499\u3001\u662f\u8f83\u4e3a\u5e38\u89c1\u7684\u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\uff0c\u5176\u5b9e\u76ee\u524d\u5e02\u573a\u4e0a\u7684\u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\u76d2\u9488\u5bf9\u67d0\u4e9b\u8f6c\u67d3\u8fdb\u884c\u4e86\u4f18\u5316\uff0c\u4f7f\u7528\u8d77\u6765\u8f83\u4e3a\u65b9\u4fbf\u3002\u6bd4\u5982\uff1a\u7ec6\u80de\u7c7b\u578b\u6765\u81ea\u4e8e Lonza \u7cfb\u5217\u7684Amaxa \u4eba\u5355\u6838\u7ec6\u80de\u6838\u56e0\u5b50\u8bd5\u5242\u76d2\u3001Invitrogen\u7684 Silencer(R) siRNA Transfection II Kit \u7b49\u8bd5\u5242\u76d2\u5728\u7ec6\u80de\u8f6c\u67d3\u65b9\u9762\u90fd\u6709\u7740\u8f83\u597d\u7684\u6548\u679c\u3002
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\u4e8c\u3001Lipofectamine RNAiMAX \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\uff08Invitrogen\uff09
Lipofectamine \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\u53ef\u4ee5\u5c06 siRNA \u5feb\u901f\u3001\u8f6c\u67d3\u5230\u591a\u79cd\u7ec6\u80de\u7c7b\u578b\u4e2d\uff0c\u5e76\u4e14\u5177\u6709\u8f83\u9ad8\u7684\u6548\u7387\u3002\u76ee\u524d\u4e5f\u5e38\u88ab\u7528\u4e8e\u5c06 siUch-L1 \u4ece Ambion \u4f20\u9012\u5230HEK-293 \u7ec6\u80de\uff0c\u5728\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\u4e2d\u5bfc\u5165Accell siRNA \u7b49\u5be1\u6838\u82f7\u9178\u4e5f\u4f1a\u7528\u5230\u8be5\u8f6c\u67d3\u4ecb\u8d28\u3002\u56fd\u5916\u6709\u79d1\u7814\u56e2\u961f\u4e5f\u5728\u5c1d\u8bd5\u4f7f\u7528 RNAiMax\u5c06FlexiTube \u548c SMARTpool siRNA \u8f6c\u67d3\u5230 HUVEC \u7ec6\u80de\u4e2d\u3002
\u4e09\u3001Lipofectamine 2000/3000 \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242 (Invitrogen)
\u8fd9\u79cd Lipofectamine \u8bd5\u5242\u4e3b\u8981\u7528\u4e8e\u5c06 siRNA \u548c shRNA \u8f7d\u4f53\u8f6c\u67d3\u5230\u8d34\u58c1\u548c\u60ac\u6d6e\u7ec6\u80de\u7cfb\u4e2d\u3002\u4e00\u822c\u60c5\u51b5\u4e0bLipofectamine 2000 \u5e38\u7528\u4e8e\u8f6c\u67d3\u4f8bHEK293T \u7ec6\u80de\u6216 Hela\u7ec6\u80de\u3002 Lipofectamine 3000\uff0c\u591a\u7528\u4e8e A498 \u7ec6\u80de\u8f6c\u67d3\u7b49 \u3002
\u56db\u3001Lipofectamine® \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242 (Invitrogen)
Lipofectamine \u5c5e\u4e8e\u9633\u79bb\u5b50\u8102\u8d28\u4f53\uff0c\u56e0\u4e3a\u5176\u5934\u90e8\u57fa\u56e2\u5e26\u6709\u6b63\u7535\u8377\u548c -CH2-]n-CH3\u3002\u6240\u4ee5\u9876\u90e8\u53ef\u4ee5\u4e0e\u5177\u6709\u6838\u9178\u7684\u78f7\u9178\u9aa8\u67b6\u5f7c\u6b64\u4f5c\u7528\u4ece\u800c\u52a0\u901f\u7ec6\u80de\u8f6c\u67d3\u3002 Lipofectamine/RNA \u6df7\u5408\u5f62\u6210\u7684\u8102\u8d28\u4f53\u7684\u8868\u9762\u7535\u8377\u4e5f\u5141\u8bb8\u8102\u8d28\u4f53/\u6838\u9178\u590d\u5408\u7269\u4e0e\u5e26\u8d1f\u7535\u8377\u7684\u7ec6\u80de\u878d\u5408\u3002
\u4e94\u3001Oligofectamine \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\uff08Invitrogen\uff09
Oligofectomine \u662f\u4e00\u79cd\u4e13\u6709\u914d\u65b9\uff0c\u53ef\u4e0e\u6838\u9178\u5f62\u6210\u7a33\u5b9a\u7684\u590d\u5408\u7269\uff0c\u4ee5\u4fbf\u5c06 siRNA \u8f6c\u67d3\u5230\u771f\u6838\u7ec6\u80de\u4e2d\u3002\u5b83\u5177\u6709\u7279\u5f02\u6027\u4e14\u65e0\u6bd2\u3002
\u516d\u3001MISSION® siRNA \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242 Millipore Sigma
MISSION® siRNA \u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\u5141\u8bb8\u5c06 siRNA \u9012\u9001\u5230\u771f\u6838\u7ec6\u80de\u4e2d\uff0c\u4ece\u800c\u4ea7\u751f >90% \u7684\u6c89\u9ed8\u6548\u7387\u3002\u4f7f\u7528\u8f83\u4f4e\u6d53\u5ea6\u7684 siRNA \u53ef\u51cf\u5c11\u8131\u9776\u6548\u5e94\u3002
N-Ter \u7eb3\u7c73\u7c92\u5b50 siRNA \u8f6c\u67d3\u7cfb\u7edf Millipore Sigma
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\u7f8e\u56fdSignaGen\u516c\u53f8\u7684GenJet \uff08Ver.II\uff09\uff0cLipoD293\u53caPolyJet\u9488\u5bf9\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\u7684DNA\u4f53\u5916\u8f6c\u67d3\u8bd5\u5242\uff0c\u5747\u4e3a\u60a8\u63d0\u4f9b\u4e24\u79cd\u4e0d\u540c\u7684\u8f6c\u67d3\u6b65\u9aa4\u2014\u2014\u4e00\u822c\u6b65\u9aa4\u53ca\u9ad8\u7ea7\u6b65\u9aa4\uff0c\u8fd9\u4e24\u79cd\u6b65\u9aa4\u5206\u522b\u9488\u5bf9\u4e0d\u540c\u7684\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\u3002\u9ad8\u7ea7\u6b65\u9aa4\u4e3b\u8981\u9488\u5bf9\u96be\u8f6c\u7684\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\uff0c\u4f8b\u5982\uff1aMDCK\uff0cMDA-MB231\uff0cCaco-2\u7b49\u7ec6\u80de\u3002\u4f7f\u7528\u4e00\u822c\u7684\u8f6c\u67d3\u6b65\u9aa4\u82e5\u662f\u8f6c\u67d3\u6548\u7387\u4f4e\u4e8e5%\uff0c\u90a3\u4e48\u4f7f\u7528\u9ad8\u7ea7\u8f6c\u67d3\u6b65\u9aa4\u5219\u53ef\u4ee5\u5c06\u8f6c\u67d3\u6548\u7387\u63d0\u5347\u81f360%\u3002
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\u9700\u8981\u7684\u8bdd\u53ef\u4ee5\u8054\u7cfb\u6211\[email protected]

不同的细胞系所用的转染试剂是不同的,转染效率低跟细胞的生长状态也有较大关系。细胞转染反应的效率取决于转染试剂类型、所用转染试剂的体积以及被转染的细胞类型、细胞密度、培养基中的成分等因素。

常见细胞系的转染试剂如下:

1. 3LL 细胞系转染试剂:用于 Lewis 肺癌细胞的转染试剂。该细胞主要用于研究人类肺癌的类型。

2. A204细胞系转染试剂:用于人横纹肌肉瘤细胞的转染试剂。A204 细胞系可用于研究肿瘤癌症研究。

3. A549 细胞系转染试剂:用于人肺癌细胞的转染试剂。A549 是指腺癌人肺泡基底上皮细胞。

4.ASMC 转染试剂:用于主动脉平滑肌细胞 (ASMC) 的转染试剂。可用于促炎因子的研究。

5.ASPC-1 细胞系转染试剂:用于人胰腺细胞的转染试剂。可用于胰腺癌的研究。

6.星形胶质细胞系转染试剂:星形胶质细胞是生物体内的细胞,构成神经系统的一部分。所以这类转染试剂主要用于原代星形胶质细胞的转染。

7.BMS2细胞系转染试剂:骨髓是大多数骨骼内部的柔性物质,在大骨骼中,它是新血细胞的来源。这类转染试剂是一种用于骨髓基质细胞(BMS) 的转染试剂。

8.CAKI-1 细胞系转染试剂:主要用于肾癌细胞的转染试剂。Caki-1 细胞系可用于研究人类近端小管上皮。

9.CALU-6 细胞系转染试剂:主要用于人肾素表达细胞的转染试剂。

10.CFPEO细胞系转染试剂:CFPEO细胞系研究主要方向是哮喘、病毒感染、纤维化肺病和囊性纤维化等呼吸道问题。而CFPEO细胞系转染试剂一般适用于用于人气管上皮细胞的转染。

11.CHO细胞系转染试剂:CHO细胞系来源于我国仓鼠卵巢细胞。CHO细胞通常用来表达重组DNA的蛋白等新药开发。

12.嗜铬细胞系转染试剂:嗜铬细胞系转染试剂用于人嗜铬细胞培养的转染试剂。

13.CLBPEC 细胞系转染试剂:用于人神经母细胞瘤细胞的转染试剂。该细胞系通常用于研究影响幼儿的癌症。

14.COS-7 细胞系转染试剂:这是一种主要用于猴肾细胞的转染试剂。通过转染的方式来生产用于研究目的的重组蛋白。

15. D-407 细胞系转染试剂:用于研究视网膜色素上皮细胞的转染试剂。

16. D-451 细胞系转染试剂:主要用于鼠成纤维细胞的转染试剂。

17.DI-TNC1 细胞系转染试剂:用于大鼠脑星形胶质细胞的转染试剂,也可用于研究啮齿动物的神经系统。潜在的应用包括医学研究或受损脑细胞的修复。

18.DU145细胞系转染试剂:用于人类前列腺癌细胞的转染试剂。通常与 PC3 细胞系一起用于前列腺癌的研究。

19.FADU细胞系转染试剂:用于人下咽癌细胞的转染试剂。FADU细胞系的应用领域包括咽鳞状细胞癌细胞的研究,已知 FaDu 细胞系与 HT-29 一起在体外产生促炎细胞因子并激活中性粒细胞。

20.成纤维细胞系转染试剂:应用于原代成纤维细胞中的转染试剂。

21.HCAEC细胞系转染试剂:该细胞系具有高细胞活力。可用于研究循环系统和心脏。HCAEC细胞系转染试剂用于人冠状动脉内皮细胞。

22. HCN-1A细胞系转染试剂:用于人类皮质神经元细胞的转染试剂。HCN-1A 细胞系可用于研究脑组织或其他神经系统组织。

23.HCS-2细胞系转染试剂:用于人软骨肉瘤细胞的转染试剂。HC S-2 是软骨研究中广泛使用的细胞系。其它细胞系的转染试剂有哪些?

24.HEK-293 细胞系转染试剂:用于人上皮肾细胞的转染试剂。HEK-293是由胚胎肾细胞发育而来主要用于生产开发功能性蛋白质和抗体。

25.HELA 细胞系转染试剂:用于人宫颈腺癌细胞的转染试剂。

26.HEPG2 细胞系转染试剂:用于人肝细胞癌细胞的转染试剂。

27.HMEC 细胞系转染试剂:用于人乳腺上皮癌 (HMEC) 细胞的转染试剂。

28.HT-29细胞系转染试剂:用于人结直肠腺癌细胞的转染试剂。

29.HUH-7细胞系转染试剂:用于人肝癌细胞的转染试剂。

30.HUVEC 细胞系转染试剂:用于人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 的转染试剂。

31.KB 细胞系转染试剂:用于人口腔表皮癌细胞的转染试剂。

32.角质形成细胞系转染试剂:用于角质形成细胞的转染试剂。

33.LNCAP 细胞系转染试剂:用于前列腺癌细胞的转染试剂。

34.MCF-7、MDA-MB细胞系转染试剂:用于人乳腺癌细胞的转染试剂。

35.MDA-MB细胞系转染试剂:用于乳腺癌细胞的转染试剂。

36.MEF 细胞系转染试剂:用于鼠胚胎成纤维细胞的转染试剂。

37.MRC-5细胞系转染试剂:用于人二倍体成纤维细胞的转染试剂。

38.NIH3T3细胞系转染试剂:用于小鼠成纤维细胞的转染试剂。

39.PANC1 细胞系转染试剂:用于人胰腺癌细胞的转染试剂。

40.PC-3 细胞系转染试剂:用于人类前列腺癌细胞的转染试剂。

41.PC-12 细胞系转染试剂:用于大鼠嗜铬细胞瘤细胞的转染试剂。

42.PGHAM 细胞系转染试剂:用于仓鼠胰腺癌细胞的转染试剂。

43.SKNAS细胞系转染试剂:用于神经母细胞瘤细胞的转染试剂。

44.SK-N-MC细胞系转染试剂:用于神经母细胞瘤细胞的转染试剂。

45.U87 细胞系转染试剂:用于胶质母细胞瘤细胞的转染试剂。

46.VERO 细胞系转染试剂:用于非洲绿猴肾细胞的转染试剂。

47.WERI-RB-1 细胞系转染试剂:用于视网膜母细胞瘤细胞的转染试剂。

        苏州阿尔法生物主要的生物试剂包括 细胞转染试剂、转染试剂盒、天根试剂盒、碧云天试剂等细胞学、分子生物学、生命科学相关的试剂及耗材,另外还有生物反应器、发酵罐、振荡培养箱、移液器、离心机、显微镜、纯水机等实验室设备等。



转染试剂种类繁多,选择哪种转染试剂没有绝对标准,还得参考实验中细胞的状态。但由于不同转染试剂作用机理不同,所以同一种细胞对于不同转染试剂出的效果也是不同的,可以根据目标细胞特点优先选择一些优质转染试剂。目前市场上主流的转染试剂有:lipo系列转染试剂和Quickshuttle快速转染试剂。

lipo系列转染试剂,目前拥有lipo2000、lipo3000产品。转染效率高,目前很多动物细胞实验室在使用,但由于毒性大,对细胞要求相对会高些。

Quickshuttle快速转染试剂是一种新型转染试剂(转染时间短),目前拥有Quickshuttle-Basic、Quickshuttle-Enhanced、Quickshuttle-Superfast、Quickshuttle-293、Quickshuttle-Hela、Quickshttle-BHK-21产品,种类比较齐全,转染效率与lipo转染试剂不分伯仲。



这个试剂没有绝对的好与不好,也要看是转siRNA还是质粒DNA,我们课题组用的DEOFECT EU转染的DNA.

转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。
DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。
基因转染技术不仅是研究转基因和基因表达的重要工具,而且是目前基因治疗的关键步骤。

Transfectamine 5000转染试剂是一种功能强大且用途广泛的转染试剂,可将核酸引入真核细胞,引入动物细胞。它可以有效地将各种有效载荷转染到各种粘附和悬浮细胞系中。它可用于质粒DNA转染以及基于siRNA和shRNA的基因敲低实验和基因表达研究。它对所有转染细胞均提供卓越的转染效率。Transfectamine 5000的低毒性也使转染细胞具有更高的生存能力。与大多数其他转染试剂相比,Transfectamine 5000更易于使用,并且不需要特殊的介质。百萤生物为您提供最优质的Transfectamine 5000转染试剂。

样品示例及操作

1.细胞培养准备

1.1转染时将细胞培养至约90%融合。

1.2转染前用新鲜的生长培养基替换。 例如,对于6孔板,每孔用2 mL培养基替换,对于10 cm板,用6 mL培养基替换。

2.转染方案

将Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培养板并培养过夜。 注意:重组蛋白最早可在转染后16小时开始检测。转染后72〜96小时可观察到最大表达水平。



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