t-spot结果解读

t-spot结果解读如下:

阳性解读:

1、提示患者体内存在结核分枝杆菌特异性效应T细胞,患者存在结核感染(在病原学确诊的活动性结核病患者中,T-SPOT的敏感性90%,特异性95%;在卡介苗广泛接种人群或发展中国家敏感性88%、特异性59%)。在我国T-SPOT用于协助诊断活动性结核病时,假阳性率较高。

2、T-SPOT阳性结果不能作为单独或是决定性的诊断结核病的依据。

3、虽然ESAT-6和CFP-10在所有的卡介苗菌株以及绝大多数环境分枝杆菌中缺失,但T-SPOT的阳性结果有可能是其他分支杆菌的感染引起的,如堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌(注:这些分枝杆菌可致HIV患者机会感染)

4、HIV感染者并发结核的筛查T-SPOT受CD4细胞计数水平的影响比QFT-GIT(用于检测IFN-v值)小,可以减少HIV感染后细胞免疫功能受损而导致的假阴性结果。

5、结核菌素试验TST也许会造成T-SPOT假阳性结果,因此需同时检测T-SPOT和TST时,T-SPOT的血样最好在TST实验前或者实验后3天内采取。

t-spot简介:

1、T-SPOT.TB检测,采用T-SPOT.TB试剂盒(Oxford Immunote Ltd.英国)。抽取患者新鲜静脉血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用AIM-V培养液重悬细胞,制备成浓度为2.5×105/mL的细胞悬液。

2、在已包被干扰素(IFN)-γ抗体微量板的4个孔中,分别加入等量(50μL)细胞悬液,以AIM-V培养液作阴性对照,植物血凝素作阳性对照,结核杆菌特异混合多肽A抗原(ESAT-6)作测试孔A,结核杆菌特异混合多肽B抗原(CFP-10)作测试孔B。

3、将微量板放入37℃孵箱培养16~20h后,洗板并加入碱性磷酸酶标记的二抗,将培养板置于2~8℃孵育1h后PBS洗板。

4、最后加入BCIP/NBT底物工作液显色,于显微镜下计数判读:若阴性对照孔斑点数为0~5个,此时测试孔斑点数减去阴性对照孔斑点数≥6个;或者当阴性对照孔斑点数≥6个,此时测试孔斑点数≥2倍阴性对照孔斑点数时判定为阳性。



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