MEM培养基的配制步骤哪里有详细介绍? MEM培养基的配制步骤哪里有详细介绍

\u5982\u4f55\u6dfb\u52a0MEM\u57f9\u517b\u57fa\u4e2d\u8865\u5145\u6210\u5206

\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u9178\u78b1\u5ea6\u5e94\u7b26\u5408\u7ec6\u83cc\u751f\u957f\u8981\u6c42\u3002\u6309\u5404\u79cd\u57f9\u517b\u57fa\u8981\u6c42\u51c6\u786e\u6d4b\u5b9a\u8c03\u8282pH\u503c\u3002\u591a\u6570\u7ec6\u83cc\u751f\u957f\u7684\u9002\u5b9cpH\u503c\u4e3a7.2\uff5e7.6\uff0c\u5448\u5f31\u78b1\u6027\u3002


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\u7b54\u6848\u8865\u5145
\u6240\u6709\u7684\u5fae\u751f\u7269\u5f53\u7136\u4e0d\u4f1a\u76f8\u540c\u7684\uff0c\u4f46\u591a\u6570\u7ec6\u83cc\u751f\u957f\u7684\u9002\u5b9cpH\u503c\u4e3a7.2\uff5e7.6\uff0c\u5448\u5f31\u78b1\u6027\u3002

MEM\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\uff08\u8f6c\u81ea\u767e\u5ea6\u767e\u79d1\uff0c\u4ec5\u4f9b\u53c2\u8003\uff09
\u914d\u7f6e\u524d\u51c6\u5907\uff1a\u914d\u7f6e\u57f9\u517b\u57fa\u65b0\u5236\u5907\u7684milli water\u3002\u8c03\u8282pH\u503c\u7684\u9178\u78b1\u6eb6\u6db2\u4e5f\u5e94\u8be5\u4f7f\u7528\u8fd9\u79cd\u6c34\u914d\u7f6e\u3002\u5236\u5907\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u5668\u76bf\u6e05\u6d17\u5e72\u51c0\uff0c\u5e76\u7528milli water\u6da6\u6d17\u4e24\u6b21\u3002
\u6eb6\u89e3\u57f9\u517b\u57fa\uff1a\u53d65%\u7ec8\u4f53\u79ef\u7684milli water\uff0c\u52a0\u5165\u52301L\u73bb\u7483\u676f\u4e2d\uff0c\u5c06\u5e72\u7c89\u57f9\u517b\u57fa\u5012\u5165\u70e7\u676f\uff0c\u6c34\u6d17\u5305\u88c5\u888b\u5185\u9762\u4e24\u6b21\uff0c\u5012\u5165\u57f9\u517b\u6db2\u4e2d\u3002\u78c1\u529b\u6405\u62cc\u52a9\u6eb6\u3002
\u8865\u52a0\u8bd5\u5242\uff1a\u6839\u636e\u5305\u88c5\u888b\u8bf4\u660e\u52a0\u5165NaHCO3(2.2g)\uff0cHEPES(2.383,10mmol)\u3001\u975e\u5fc5\u9700\u6c28\u57fa\u9178(\u53ef\u4e0d\u52a0\uff0c10ml)\u3002
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\u8fc7\u6ee4\u9664\u83cc\uff1a\u91c7\u75280.22um\u6ee4\u819c\u3002\u8fc7\u6ee4\u540e\u5206\u88c5\u4e8e\u5c0f\u74f6\u4e2d(100\u6216200ml)\u3002\u8fc7\u6ee4\u540epH\u503c\u4e00\u822c\u4e0a\u53470.1-0.3\u3002
\u52a0\u5c0f\u725b\u8840\u6e05\uff1a\u6839\u636e\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u7f6e\u7684\u91cf\u5c06\u5c0f\u725b\u8840\u6e05\u5206\u88c5\uff0c\u51b7\u51bb\u4fdd\u5b58(-20\u5ea6)\u3002\u4e34\u7528\u524d\u5c06\u52a0\u5165\u5c0f\u725b\u8840\u6e0510%\u3002

MEM 1L 配方
1配置前准备:配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净,并用milli water润洗两次。
2.溶解培养基:取5%终体积的milli water,加入到1L玻璃杯中,将干粉培养基倒入烧杯,水洗包装袋内面两次,倒入培养液中。磁力搅拌助溶。
3.补加试剂:根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。
4.加抗生素:一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。
5.调pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2.
6.过滤除菌:采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3.
7.加小牛血清:根据培养基配置的量将小牛血清分装,冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%。
生物帮上面有的, http://doc.bio1000.com/list-12.html 基因技术,Southern Blotting,DNA甲基化,基因组学,DNA技术,基因克隆,DNA测序。

2k11生涯模式怎么保存不了

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