怎么选择各公司的流式抗体? 流式抗体如何选择?

\u5982\u4f55\u9009\u62e9\u9002\u5408\u7684\u6d41\u5f0f\u6297\u4f53\uff08\u4e94\uff09\uff1a\u4e3e\u4f8b

\u4e3e\u4f8b\u4e00\uff1aBD\u6d41\u5f0f\u4eea\u5668FACSCalibur\u8bd5\u5242\u9009\u62e9\u53ca\u5e38\u89c1\u95ee\u9898\u89e3\u7b54
\u4e00\u3001\u5982\u4f55\u642d\u914d\u6d41\u5f0f\u6297\u4f53\u8367\u5149\u6807\u8bb0
\u6d41\u5f0f\u6297\u4f53\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u642d\u914d\u4e3b\u8981\u75313\u4e2a\u56e0\u7d20\u51b3\u5b9a\u7684\uff1a\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u80fd\u68c0\u6d4b\u591a\u5c11\u4e2a\u901a\u9053\u3001\u9700\u8981\u540c\u65f6\u68c0\u6d4b\u68c0\u6d4b\u591a\u5c11\u4e2a\u6307\u6807\u3001\u5382\u5bb6\u7684\u6297\u4f53\u6709\u591a\u5c11\u79cd\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u3002\u5982\u679c\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u7684\u901a\u9053\u8d8a\u591a\uff0c\u90a3\u4e48\u540c\u4e00\u4efd\u6837\u672c\u80fd\u540c\u65f6\u505a\u7684\u8868\u9762/\u80de\u5185\u6807\u5fd7\u5c31\u8d8a\u591a
A\u3001 \u5982\u4f55\u6839\u636e\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u642d\u914d\u6d41\u5f0f\u6297\u4f53
1\uff09 BD\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\uff0806\u7248\u76ee\u5f55\u7b2c614\u9875\uff09
\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u80fd\u68c0\u6d4b\u591a\u5c11\u4e2a\u901a\u9053\u662f\u7531\u6709\u591a\u5c11\u6839\u6fc0\u5149\u51b3\u5b9a\u7684\u4ee5\u53ca\u6bcf\u6839\u6fc0\u5149\u7684\u529f\u80fd\u51b3\u5b9a\u7684\uff0c\u6240\u4ee5\u9996\u5148\u9700\u8981\u6ce8\u610f\u4e24\u70b9\uff1a
\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u6709\u54ea\u4e9b\u6fc0\u5149\u3002\u6bd4\u5982\u6807\u914d\u7684FACSCalibur\u53ea\u6709\u4e00\u6839488nm\u7684\u6fc0\u5149\uff0c\u80fd\u505aFL1\u3001FL2\u3001FL3\u4e09\u4e2a\u8367\u5149\u901a\u9053/\u4e09\u4e2a\u989c\u8272\uff0c\u800c\u9009\u914d\u7684Calibur (FACSCalibur\u7684\u7b80\u79f0)\u914d\u6709488nm\u548c635nm\u4e24\u6839\u6fc0\u5149\uff0c\u53ef\u4ee5\u68c0\u6d4bFL1-FL4\u56db\u4e2a\u901a\u9053/4\u4e2a\u989c\u8272\u3002
\u4e0d\u540c\u578b\u53f7\u7684\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u7684\u540c\u6837\u7684\u4e00\u4e2a\u901a\u9053\u68c0\u6d4b\u8367\u5149\u7d20\u7684\u80fd\u529b\u662f\u4e0d\u4e00\u6837\u7684\uff0c\u6bd4\u5982Calibur\u7684FL3\uff08\u7b2c3\u901a\u9053\uff09\u80fd\u68c0\u6d4bPE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,\u800cAria\u7684\u7b2c3\u901a\u9053\u53ea\u80fd\u68c0\u6d4bPE-TexasRed, PE-Cy5, PerCP\u3002Calibur\u7b2c3\u901a\u9053\u80fd\u68c0\u6d4b\u7684PerCP-Cy5.5\u5728FACSAria\u4e0a\u662f\u7b2c4\u901a\u9053\u68c0\u6d4b\u3002Calibur\u548cLSR\u90fd\u80fd\u68c0\u6d4b4\u4e2a\u989c\u8272\uff0c\u4f46\u662f\u7b2c4\u4e2a\u901a\u9053\u68c0\u6d4b\u8367\u5149\u7d20\u662f\u4e0d\u4e00\u6837\u7684
\u642d\u914d\u8367\u5149\u7d20\u539f\u5219
\u642d\u914d\u6d41\u5f0f\u8367\u5149\u7d20\u67092\u4e2a\u539f\u5219\uff1a\u6bcf\u4e2a\u901a\u9053\u53ea\u80fd\u9009\u62e91\u79cd\u8367\u5149\u7d20\uff1b\u5404\u4e2a\u901a\u9053\u4e4b\u95f4\u7684\u8367\u5149\u7d20\u53ef\u4ee5\u968f\u610f\u642d\u914d\uff0c\u4f46\u9700\u6ce8\u610f
1\u3001\u6bcf\u4e2a\u901a\u9053\u53ea\u80fd\u9009\u62e91\u79cd\u8367\u5149\u7d20\u3002\u4ee5Calibur\u4e3a\u4f8b\u8bf4\u660e\uff0cCalibur\u7684FL1\u901a\u9053\u9009\u62e9\u4e86FITC\u5c31\u4e0d\u80fd\u9009\u62e9AlexaFluro488\uff0c\u6216\u8005\u9009\u62e9\u4e86Alexa Fluro488\u5c31\u4e0d\u80fd\u9009FITC Calibur\u7684FL3\u901a\u9053\u5c3d\u7ba1\u80fd\u68c0\u6d4bPE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7\u4e94\u4e2a\u8367\u5149\u7d20\uff0c\u4f46\u662f\u6211\u4eec\u6211\u4eec\u642d\u914d\u7684\u65f6\u5019\u53ea\u80fd\u9009\u62e9\u5176\u4e2d1\u4e2a\u3002
2\u3001\u5404\u4e2a\u901a\u9053\u4e4b\u95f4\u7684\u8367\u5149\u7d20\u53ef\u4ee5\u968f\u610f\u642d\u914d\uff1a\u5982\u679c\u5ba2\u6237\u7684\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u80fd\u505a4\u4e2a\u901a\u9053\uff0c\u5728\u7b2c1\u4e2a\u539f\u5219\u4e4b\u4e0b\uff0c\u90a3\u4e48\u6bcf\u4e2a\u901a\u9053\u968f\u4fbf\u9009\u51fa1\u4e2a\u8367\u5149\u7d20\u5c31\u53ef\u4ee5\u7ec4\u5408\u62104\u4e2a\u989c\u8272\u3002\u4ee52\u8ddf\u6fc0\u5149\u7684Calibur\u4e3a\u4f8b\uff0cCalibur\u5404\u4e2a\u8367\u5149\u7d20\u4e4b\u95f4\u53ef\u4ee5\u642d\u914d\u51fa16\u79cd\u7ec4\u5408\u3002
\u6bd4\u5982\u5e38\u7528\u7684\u642d\u914d\u662fF I T C( F L 1 )\uff0bP E\uff08F L 2\uff09\uff0bPerCP\uff08FL3\uff09+APC(FL4), \u8fd9\u4e2a\u642d\u914d\u7ec4\u5408\u53ef\u4ee5\u66f4\u6539\u6210Alex Fluro(FL1)\uff0bPE\uff08FL2\uff09\uff0bPerCP\uff08FL3\uff09+APC(FL4), \u6216\u8005FITC(FL1)\uff0bPE\uff08FL2\uff09\uff0bPerCP\uff08FL3\uff09+Alex Fluro(FL4)\uff0c\u6216\u8005FITC(FL1)\uff0bPE\uff08FL2\uff09\uff0bPE-Cy5\uff08FL3\uff09+APC(FL4)\u7b49\u7b49\u3002\u603b\u4e4b\uff0c\u5728\u7b2c1\u539f\u5219\u4e4b\u4e0b\uff0c\u6211\u4eec\u53ef\u4ee5\u968f\u610f\u642d\u914d\u548c\u7ec4\u5408\u5404\u4e2a\u8367\u5149\u7d20\u3002\u4f46\u662f\u9700\u8981\u6ce8\u610f\u7684\u662f\uff0cAPC\u548cPE-Cy5\u4e00\u8d77\u4f7f\u7528\u7684\u8bdd\uff0c\u4e0a\u6d41\u5f0f\u4ee5\u540e\uff0c\u5bb9\u6613\u5bfc\u81f4\u8865\u507f\u8fc7\u5ea6
B\u3001 BD\u516c\u53f8\u6297\u4f53\u6709\u591a\u5c11\u79cd\u8367\u5149\u7d20
1\uff09 \u4f9b\u5e94\u5546\u80fd\u63d0\u4f9b\u7684\u6bcf\u79cd\u6297\u4f53\u7684\u8367\u5149\u7d20\u662f\u4e0d\u4e00\u6837\u7684\u6211\u4eec\u9700\u8981\u6839\u636e\u540c\u65f6\u7ed3\u5408\u4f9b\u5e94\u5546\u80fd\u63d0\u4f9b\u7684\u6bcf\u79cd\u6297\u4f53\u7684\u8367\u5149\u7d20\u8fdb\u884c\u642d\u914d\u3002\u539f\u5219\u4e0a\u540c\u4e00\u4e2a\u6807\u5fd7\u7684\u4e0d\u540c\u7684\u514b\u9686\u53f7\u5e26\u540c1\u4e2a\u8367\u5149\u7d20\u5728\u5e94\u7528\u4e0a\u6ca1\u6709\u533a\u522b\u7684\uff0c\u4f46\u662f\u6709\u4e9b\u4e0d\u540c\u514b\u9686\u53f7\u7684\u6297\u4f53\u4e4b\u95f4\u53ef\u80fd\u4f1a\u6709\u4e00\u4e9b\u7a0d\u5fae\u7684\u5dee\u5f02\uff0c\u9700\u8981\u4ed4\u7ec6\u770b\u8bf4\u660e\u4e66\u3002\u6211\u4eec\u53ef\u4ee5\u5c3d\u91cf\u9009\u62e9\u5728\u8bf4\u660e\u4e66\u4e0a\u6709\u6d41\u5f0f\u56fe\u5f62\u7684\u6297\u4f53\uff0c\u6216\u8005\u9009\u62e9\u8367\u5149\u7d20\u79cd\u7c7b\u6700\u591a\u7684\u514b\u9686\u53f7\u7684\u6297\u4f53
2\uff09 \u8367\u5149\u7d20
\u53ef\u4ee5\u767b\u9646www.bdbiosciences.com/spetra\uff0c\u8f93\u5165\u8367\u5149\u7d20\u548c\u68c0\u6d4b\u7684BD\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u673a\u578b\u53ca\u6fc0\u53d1\u5149\uff0c\u5c31\u53ef\u4ee5\u67e5\u5230\u76f8\u5e94\u7684\u6ce2\u957f\u3002
\u4e3a\u4ec0\u4e48\u8981\u63a8\u8350\u4f7f\u7528Alex Fluro488\u548cAlex Fluro647\u5462\uff1f
\u56e0\u4e3a\u8fd9\u4e9b\u8367\u5149\u975e\u5e38\u660e\u4eae\uff0c\u5bf9\u6fc0\u5149\u975e\u5e38\u7a33\u5b9a\uff0c\u9002\u5408\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u7684\u5149\u8c31\u6027\u8d28\uff0c\u5bf9PH\u503c\u4e0d\u654f\u611f\uff0c\u5177\u6709\u6c34\u6eb6\u6027\u3002\u6b64\u5916\uff0c\u4ed6\u4eec\u8054\u5408\u4f7f\u7528\u65f6\u53d1\u5c04\u5149\u8c31\u5b58\u5728\u5de8\u5927\u5dee\u5f02\uff0c\u65e0\u9700\u8865\u507f\u3002

C\u3001\u5982\u679c\u68c0\u6d4b\u7684\u6307\u6807\u6570\u76ee\u8d85\u8fc7\u4e86\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u7684\u901a\u9053\uff0c\u600e\u4e48\u529e\uff1f
\u5982\u679c\u9700\u8981\u505a5\u4e2a\u6307\u6807\uff0c\u800c\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u53ea\u80fd\u505a4\u4e2a\u901a\u9053\uff0c\u9996\u5148\u5c06\u6307\u6807\u5f52\u62102\u7c7b\uff0c\u518d\u5c06\u6837\u672c\u5206\u62102\u4efd\uff0c\u5206\u522b\u68c0\u6d4b\u3002\u6bd4\u5982\u9700\u8981\u540c\u65f6\u68c0\u6d4bCD3\u3001CD4\u3001CD8\u3001IL-4\u548cIFN-gamma\uff0c\u90a3\u4e48\u5c06\u6837\u672c\u5206\u6210\u4e24\u4efd\uff0c\u7b2c1\u4efd\u52a0CD3\u3001CD4\u3001CD8\u548cIL-4\uff0c\u800c\u7b2c2\u4efd\u52a0CD3\u3001CD4\u3001CD8\u548cIFN-gamma\u3002

\u4e8c\u3001\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff08Isotypy Control\uff09
1\u3001\u4e3a\u4ec0\u4e48\u8981\u7528\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff1f
\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u662f\u4f7f\u7528\u4e0e\u4e00\u6297\u76f8\u540c\u79cd\u5c5e\u6765\u6e90\u3001\u76f8\u540c\u4e9a\u578b\u3001\u76f8\u540c\u5242\u91cf\u548c\u76f8\u540c\u7684\u514d\u75ab\u7403\u86cb\u767d\u53ca\u4e9a\u578b\u7684\u514d\u75ab\u7403\u86cb\u767d\uff0c\u7528\u4e8e\u6d88\u9664\u7531\u4e8e\u6297\u4f53\u975e\u7279\u5f02\u6027\u4e0e\u7ec6\u80de\u7ed3\u5408\u800c\u4ea7\u751f\u7684\u80cc\u666f\u67d3\u8272\u3002\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u662f\u771f\u6b63\u610f\u601d\u4e0a\u7684\u9634\u6027\u5bf9\u7167\uff0c\u5b83\u4e0d\u4f46\u53ef\u4ee5\u7528\u6765\u8bbe\u5b9a\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u7684\u7535\u538b\uff0c\u800c\u4e14\u8fd8\u53ef\u4ee5\u5e2e\u5fd9\u7701\u53bb\u6602\u8d35\u4e0e\u7e41\u7410\u7684\u91cd\u7ec4\u7ec6\u80de\u56e0\u5b50\u7ade\u4e89\u5c01\u95ed\u6b65\u9aa4\u3002\u5728\u6d41\u5f0f\u7ec6\u80de\u4eea\u4e0a\u6837\u524d\uff0c\u67d3\u8272\u65b9\u5f0f\u5982\u4e0b\uff1a
\u6837\u672c\u7ba1\uff1a\u4e00\u6297\uff0b\u6837\u672c
\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u7ba1\uff1a\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff0b\u6837\u672c

2\u3001\u5982\u4f55\u9009\u62e9\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff1f
\u4e00\u822c\u9009\u62e9\u4e0e\u4e00\u6297\u7684\u6210\u5206\u5b8c\u5168\u76f8\u540c\u79cd\u5c5e\u6765\u6e90\u3001\u76f8\u540c\u4e9a\u578b\u548c\u4e9a\u94fe\u3001\u76f8\u540c\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u7684\u6297\u4f53\uff0c\u6bd4\u5982\u6297\u4eba\u7684CD56 APC\u6807\u8bb0\u7684\u6297\u4f53\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555518,\u6210\u4efd\u662fMouse IgG1,\u03ba\u3002\u90a3\u4e48\u5b83\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5e94\u8be5\u662fAPC\u6807\u8bb0\u7684Mouse IgG1,\u03ba\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555751\u3002\u6ce8\u610f\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u7684\u6210\u4efd\u8ddf\u5b83\u7684\u540d\u79f0\u662f\u76f8\u540c\u7684.\u5982\u679c\u662f\u6297\u4f53\u7684\u7ec4\u5408\u5f62\u5f0f\u662f\u7eaf\u5316\u7684\u4e00\u6297\uff0b\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u7684\u4e8c\u6297\uff0c\u90a3\u4e48\u5e94\u8be5\u9009\u62e9\u4e00\u6297\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u3002\u6bd4\u5982CDw125\u7684\u7eaf\u5316\u6297\u4f53\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555901\uff0c\u6210\u5206\u662fMouse IgG1,\u03ba\u3002\u5b83\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u662f\u7eaf\u5316\u7684Mouse IgG1,\u03ba\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555746\u3002\u5b83\u7684\u4e8c\u6297PE\u6807\u8bb0\u7684\u6297\u5c0f\u9f20IgG1,\u8d27\u53f7\u662f550083\u3002\u90a3\u4e48\u67d3\u8272\u65b9\u5f0f\u5982\u4e0b\uff1a
\u6837\u672c\u7ba1\uff1a\u7eaf\u5316\u7684CDw25\uff0bPE\u6807\u8bb0\u7684\u6297Mouse IgG1\uff0b\u6837\u672c
\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u7ba1\uff1a\u7eaf\u5316\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff0bPE\u6807\u8bb0\u7684\u6297Mouse IgG1\uff0b\u6837\u672c

\u5982\u679c\u6ca1\u6709\u627e\u5230\u9002\u5408\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff0c\u5728\u4fdd\u6301\u6765\u6e90\u76f8\u540c\u3001\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u76f8\u540c\u3001\u514d\u75ab\u7403\u86cb\u767d\u7c7b\u522b\u76f8\u540c\u6761\u4ef6\u4e0b\uff0c\u90a3\u4e48\u4f18\u5148\u9009\u62e9\u7684\u987a\u5e8f\u5e94\u8be5\u662f\u4e9a\u94fe\u4e0d\u540c\uff0d\uff0d\u4e9a\u578b\u4e0d\u540c\uff0d\uff0d\u76f8\u540c\u7c7b\u522b\u3002\u6bd4\u5982\uff0c\u67d0\u79cd\u7684\u6297\u4f53\u7684\u6765\u6e90\u662fMouse IgG2\u0430,\u03ba\u3002\u5982\u679c\u5728\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u8868\u91cc\u9762\u627e\u5230\u4e0d\u5230\u5b8c\u5168\u76f8\u540c\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff0c\u90a3\u4e48\u4f18\u5148\u9009\u62e9\u76f8\u540c\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u7684Mouse IgG2\u0430\u4e3a\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u3002\u5982\u679c\u4e5f\u6ca1\u6709\u627e\u5230Mouse IgG2\u0430\uff0c\u90a3\u4e48\u4f18\u5148\u9009\u62e9\u76f8\u540c\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u7684Mouse IgG2b\u4f5c\u4e3a\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u3002\u5982\u679c\u6700\u540e\u8fd8\u662f\u6ca1\u6709\u627e\u5230Mouse IgG2b\uff0c\u90a3\u4e48\u9009\u8005\u76f8\u540c\u8367\u5149\u6807\u8bb0\u7684Mouse IgG2\u4f5c\u4e3a\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u3002

3\u3001\u5982\u4f55\u67e5\u627e\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff1f
\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5728BD\u82f1\u6587\u76ee\u5f55\u4e2d\u6216\u8005BD\u7f51\u7ad9\u4e0a\u8ddf\u5b83\u5bf9\u7167\u7684\u6297\u4f53\u7684\u4f4d\u7f6e\u662f\u4e00\u81f4\u7684\u3002BD\u76ee\u5f55\u4e2d\uff0c\u6297\u4eba\u7684\u6297\u4f53\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u90fd\u5728HUMAN\u7ae0\u8282\u540e\u9762\u3002\u6297\u5c0f\u9f20\u7684\u6297\u4f53\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5728MOUSE\u7ae0\u8282\u540e\u9762\uff0c\u975e\u4eba\u7c7b\u7075\u957f\u7c7b\u7684\u6297\u4f53\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5728NON HUMAN PRIMATE\u7ae0\u8282\u540e\u9762\u3002\u7531\u4e8e\u6297\u5927\u9f20\u7684\u6297\u4f53\u975e\u5e38\u5c11\uff0c\u5927\u90e8\u5206\u6297\u4f53\u90fd\u662f\u5c0f\u9f20\u6765\u6e90\u7684\uff0c\u6240\u4ee5\u5b83\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u8ddf\u5c0f\u9f20\u7684\u4e00\u6837\uff0c\u653e\u5728MOUSE\u7ae0\u8282\u540e\u9762\u3002\u80de\u5185\u7ec6\u80de\u56e0\u5b50\u3001\u8d8b\u5316\u56e0\u5b50\u3001\u8865\u4f53\u3001\u708e\u75c7\u4ecb\u8d28\u53ca\u5176\u53d7\u4f53\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u653e\u5728\u5176\u7ae0\u8282\u7684\u540e\u9762\uff08\u6ce8\u610f\uff1a\u4eba\u7684\u80de\u5185\u7ec6\u80de\u56e0\u5b50\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u8ddf\u4eba\u7684\u8868\u9762\u6807\u5fd7\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u662f\u4e0d\u5728\u4e00\u8d77\u7684\uff09\u3002Phosflow\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5728Phosflow\u7684\u4ecb\u7ecd\u540e\u9762\u3002\u6bd4\u5982\uff0c\u6bd4\u5982\u6297\u4eba\u7684CD56 APC\u6807\u8bb0\u7684\u6297\u4f53\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555518\uff0c\u572806\u7248BD\u76ee\u5f55\u7684169\u9875\uff0c\u6210\u4efd\u662fMouse IgG1,\u03ba\u3002\u90a3\u4e48\u5b83\u7684\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u5e94\u8be5\u662f\u5728HUMAN\u7ae0\u8282\u4e2dMouse Immunoglobulin Isotype\u8868\u683c\u4e2d\uff0c\u7b2c191\u9875\uff0cAPC\u6807\u8bb0\u7684Mouse IgG1,\u03ba\uff0c\u8d27\u53f7\u662f555751\u3002

4\u3001\u54ea\u4e9b\u5ba2\u6237\u9700\u8981\u4f7f\u7528\u540c\u578b\u5bf9\u7167\uff1f
A \u5bf9\u6d41\u5f0f\u4e0d\u662f\u975e\u5e38\u719f\u6089\u7684\u5ba2\u6237\u3002
B \u505a\u80de\u5185\u6d41\u5f0f\u5ba2\u6237\uff0c\u6bd4\u5982\u80de\u5185\u7ec6\u80de\u56e0\u5b50\u3001\u8d8b\u5316\u56e0\u5b50\u548c\u4fe1\u53f7\u86cb\u767d\u7b49\u3002
C \u4f7f\u7528\u4e0d\u5e38\u89c1\u7684\u6807\u5fd7\u6216\u8005\u7279\u5f02\u6027\u4e0d\u9ad8\u7684\u6807\u5fd7\u7684\u5ba2\u6237\uff0c\u56e0\u4e3a\u5ba2\u6237\u4e0d\u719f\u6089\u4e0d\u5e38\u89c1\u6807\u5fd7\u7684\u8868\u8fbe\u60c5\u51b5\uff0c\u6839\u636e\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u53ef\u4ee5\u5224\u65ad\u9633\u6027\u7ec6\u80de\u7684\u4f4d\u7f6e\u3002\u4e00\u4e9b\u7279\u5f02\u6027\u4e0d\u9ad8\u7684\u6297\u4f53\uff0c\u5982\u591a\u6297\uff0c\u975e\u7279\u5f02\u6027\u7ed3\u5408\u975e\u5e38\u591a\uff0c\u4f7f\u7528\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u53ef\u6392\u9664\u5047\u9633\u6027\u3002
D \u5bf9\u6d41\u5f0f\u975e\u5e38\u719f\u6089\u53c8\u4f7f\u7528\u5e38\u7528\u7684\u8868\u9762\u6807\u5fd7\u7684\u5ba2\u6237\u4e00\u822c\u53ef\u4ee5\u4e0d\u4f7f\u7528\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u3002

5\u3001\u4e3a\u4ec0\u4e48\u6709\u65f6\u5019\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u7684\u8868\u8fbe\u4f1a\u6bd4\u6297\u4f53\u7684\u8868\u8fbe\u9ad8\uff1f
\u9996\u5148\u9700\u8981\u68c0\u67e5\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u7684\u6297\u4f53\u662f\u5426\u52a0\u9519\u7c7b\u578b\u3001\u5242\u91cf\u7b49\u3002\u5176\u6b21\uff0c\u56e0\u4e3a\u6709\u4e9b\u6807\u5fd7\u5728\u7ec6\u80de\u7684\u8868\u9762\u6216\u8005\u80de\u5185\u8868\u8fbe\u4e0d\u9ad8\uff0c\u800c\u8ddf\u5176\u7c7b\u4f3c\u7684\u6297\u539f\u975e\u5e38\u591a\uff0c\u90a3\u4e48\u52a0\u5165\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u65f6\uff0c\u540c\u578b\u5bf9\u7167\u975e\u7279\u5f02\u6027\u7684\u7ed3\u5408\u4f1a\u8d85\u8fc7\u6297\u4f53\u7684\u7279\u5f02\u6027\uff0c\u6240\u4ee5\u4f1a\u9020\u6210\u8fd9\u79cd\u73b0\u8c61\uff0c\u5728\u7ec6\u80de\u8868\u9762\u65f6\u5982\u56fe\u6240\u793a\u3002\u8fd9\u4e2a\u65f6\u5019\u63a8\u8350\u4f7f\u7528\u5176\u4ed6\u9634\u6027\u5bf9\u7167\uff0c\u5982\u7a7a\u767d\u5bf9\u7167\u7b49\u3002

\u4e09\u3001\u8865\u507f\u5fae\u7403
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一、如何搭配流式抗体荧光标记

流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多

A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体

1) BD流式细胞仪(06版目录第614页)

流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:

流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色,而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光,可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。

不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的,比如Calibur的FL3(第3通道)能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能检测PE-TexasRed, PE-Cy5, PerCP。Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。Calibur和LSR都能检测4个颜色,但是第4个通道检测荧光素是不一样的

搭配荧光素原则

搭配流式荧光素有2个原则:每个通道只能选择1种荧光素;各个通道之间的荧光素可以随意搭配,但需注意

1、每个通道只能选择1种荧光素。以Calibur为例说明,Calibur的FL1通道选择了FITC就不能选择AlexaFluro488,或者选择了Alexa Fluro488就不能选FITC Calibur的FL3通道尽管能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五个荧光素,但是我们我们搭配的时候只能选择其中1个。

2、各个通道之间的荧光素可以随意搭配:如果客户的流式细胞仪能做4个通道,在第1个原则之下,那么每个通道随便选出1个荧光素就可以组合成4个颜色。以2跟激光的Calibur为例,Calibur各个荧光素之间可以搭配出16种组合。

比如常用的搭配是F I T C( F L 1 )+P E(F L 2)+PerCP(FL3)+APC(FL4), 这个搭配组合可以更改成Alex Fluro(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4), 或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+Alex Fluro(FL4),或者FITC(FL1)+PE(FL2)+PE-Cy5(FL3)+APC(FL4)等等。总之,在第1原则之下,我们可以随意搭配和组合各个荧光素。但是需要注意的是,APC和PE-Cy5一起使用。



Biolegend的抗体是越做越好了,看好他家。BD的CD盒子不错,价格也还实惠,比自己配的要便宜得多。我感觉BD、ebioscience、Beckman三家都差不多,另外BD的一般都是20ul/Test,实际用量可以考虑5ul,相对来说比较能接受。。。。eB的部分抗体特异性跟效价都要差一些,价格便宜的优势反而不重要。至于Beckman的,跟BD差距不是很大,单价格上会贵一些。你可以参考www.my-fcm.com.cn,哪家的都有,自己斟酌吧。

看你自己做实验的需求了,做多色肯定bd好,有很多新的荧光抗体,弱表达的指标的也比较好设计实验。缺点就是价格贵货期长。Biolegend抗体也不错,比bd便宜很多,货期快,eb的现在用的很少了

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