为什么加引物还要加探针
答:引物,又名引子。是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,之所以需要引物是因为在DNA合成中DNA聚合酶仅仅可以把新的核苷酸加到已有的DNA链上。
答:引物是用来扩增片段用的,而探针,探针上面有荧光基团,完整时检测不到荧光,与两引物之间的目的基因结合,PCR扩增过程中,探针被切断,可以检测到荧光。扩增得到的目的基因越多,那么探针被切断的也越多,检测到的荧光也越多,所以常用来做定量PCR。
答:第一个问题:引物是用来扩增DNA序列的,因为DNA的合成必须3-OH,也就是说核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸,引物就是用来提供3-OH的。探针是根据碱基互补的原理,用来与特定的DNA片段做杂交的,以此对特定的DNA片段进行检测,如Southern杂交,用的就是探针。只要是符合要求的DNA片段都可以用来做...
答:引物是用来扩增DNA序列的,因为核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸,引物就是用来提供3-OH的。只要是符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的
答:一、两者的用途不同:1、引物设计的用途:用于PCR扩增技术。2、探针设计的用途:用于标记待定的核苷酸片断,用与特异性地、定量地检测核酸的量。二、两者的实质不同:1、引物设计的实质:一小段单链DNA或RNA,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。2、探针设计的...
答:引物和探针本质都是寡聚核苷酸也就是Oligo,无非就是使用的目的不同。不知道靶序列,当然就不能得到对应的特异性探针,除非你根据同源序列设计可能的探针。
答:一是为单链,二是带有可检测的标记。4. 基因探针可以包含整个基因或其一部分,也可以是DNA或RNA的形式。5. 引物是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应中起到延伸的作用。6. 引物的存在是因为DNA聚合酶只能在已有DNA链上添加新的核苷酸,因此需要引物作为复制的起点。
答:磷-32通常被加入到DNA的核苷酸中的磷酸基团中,而荧光染料和酶则通过共价键与核酸序列连接。探针与引物的区别主要在于它们的用途和化学本质。引物用于PCR(聚合酶链反应)扩增技术,它们是一段DNA或RNA,作为多核苷酸链延伸的起始点。而探针则用于检测特定的核酸序列,它们通过荧光特性或酶活性来标记目标序列...
答:不能。绝大多数常用的PCR探针并不适合RPA反应。特别是用到了聚合酶5’-3’核酸酶活性的探针系统,这样的酶活性与RPA根本不兼容。 怎样才算是好引物?我应该怎样设计RPA***引物? RPA引物还没有一个严格的设计标准,所以需要进行筛选。(引物设计具体参见: PCR替代技术,RPA全攻略之引物设计 ) RPA***引物需要多长?
答:pcr荧光探针法是是SYBRGreen掺入到双链DNA中的量。SYBRGreen掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。荧光pcr检测 PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该...
网友评论:
龚震13028384329:
RT - PCR 的 探针 和 引物 是什么 它们的作用是什么啊?? -
56205滕哲
: 引物是用来扩增片段用的,而探针,探针上面有荧光基团,完整时检测不到荧光,与两引物之间的目的基因结合,PCR扩增过程中,探针被切断,可以检测到荧光.扩增...
龚震13028384329:
PCR中的引物和探针是一个东西吗? -
56205滕哲
: prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
龚震13028384329:
上游引物和下游引物为什么分别加 -
56205滕哲
: 引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列.在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸...
龚震13028384329:
Real - time PCR为什么不用吸光度法检测 -
56205滕哲
: Real-Time PCR结果不齐,建议使用多种方法多次尝试.一般出现不齐是因为加样量不一致,相差少许是由于实验误差. Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个...
龚震13028384329:
关于引物、探针和微卫星片段的区别及在实验中的应用 -
56205滕哲
: 第一个问题:引物是用来扩增DNA序列的,因为DNA的合成必须3-OH,也就是说核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸,引物就是用来提供3-OH的.探针是根据碱基互补的原理,用来与特定的DNA片段做杂交的,以此对特定的DNA片段进行检测,如Southern杂交,用的就是探针.只要是符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,探针和引物是两个完全不同的概念,他们都是DNA或者RNA,只是用的方法不一样.说的简单些:引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的 第二个问题:微卫星引物是微卫星两端的侧翼序列,是用来扩增微卫星片段的.
龚震13028384329:
一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 -
56205滕哲
: 一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2*的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以.由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于...
龚震13028384329:
PCR时为什么要加一对引物,只加一对中的一条会有什么问题 -
56205滕哲
:[答案] 因为PCR第一步要95°加热使DNA变性得到两条单链作为PCR扩展的模板,模板序列不同,所以PCR时要加一对引物.只加一对中的一条扩展速度只有一半.
龚震13028384329:
PCR的原理是什么 -
56205滕哲
:[答案] 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率... 进入第二周期后,引物除与原始模板结合外,还要同新合成的链(即“长产物片段”)结合.引物在与新链结合 时,由于新链...
龚震13028384329:
请问PCR扩增中加入引物有什么用? -
56205滕哲
: 1,这是由DNA聚合酶决定的.DNA聚合酶只能在具有前端片段的情况之下,才能够顺着这个片段合成下去.所以一定要有引物作为DNA聚合酶的引导片断. 2.引物结合在DNA的什么位置决定了要扩增的部分.因此引物根据双链互补的原则设计出来,从而确定DNA扩增的区域.
龚震13028384329:
PCR扩增DNA的操作里 为什么要用引物? -
56205滕哲
: 因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物(PCR中是DNA,而生物体内是RNA)来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.