探针引物
答:1. 基因探针是一段带有检测标记、与目的基因互补的核酸序列,可以是DNA或RNA。2. 基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,从而在基因组中识别目的基因。3. 作为探针的核酸序列至少需要满足两个条件:一是为单链,二是带有可检测的标记。4. 基因探针可以包含整个基因或其一部分,也可以是DNA...
答:引物设计和探针设计(即荧光探针)有3点不同,相关介绍具体如下:一、两者的用途不同:1、引物设计的用途:用于PCR扩增技术。2、探针设计的用途:用于标记待定的核苷酸片断,用与特异性地、定量地检测核酸的量。二、两者的实质不同:1、引物设计的实质:一小段单链DNA或RNA,在核酸合成反应时,作为每...
答:引物,又名引子。是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,之所以需要引物是因为在DNA合成中DNA聚合酶仅仅可以把新的核苷酸加到已有的DNA链上。
答:重组DNA技术的探索对于长靶点,重组DNA技术则发挥关键作用,通过克隆技术将大片段DNA插入载体,如质粒或噬菌体,确保探针与大目标的完美匹配。这种方法在特定条件下,如需要高分辨率检测时尤为实用(图3)。效率与精度的平衡引物和探针的长度与性能息息相关。理想情况下,15-20个核苷酸的寡核苷酸能在保持高效...
答:1. ORFlab基因引物探针的二聚体效应设计时,通常要求控制引物自身的二聚体(自身或配对)形成△G值大于-4.5kc/mol。然而,ORFlab基因引物的3'端△G值过高,可能导致错配位点形成不稳定双链,影响PCR反应。3'端△G值过高,如ORFlab上游引物的-13.4kc/mol,极可能形成稳定的二聚体,显著降低PCR效率...
答:可以。符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的。
答:用的就是探针。只要是符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,探针和引物是两个完全不同的概念,他们都是DNA或者RNA,只是用的方法不一样。说的简单些:引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的 第二个问题:微卫星引物是微卫星两端的侧翼序列,是用来扩增微卫星片段的。
答:总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-timePCR的扩增片段是50bp-150bp。当找不到150bp的保守片段时,必须确保探针的片段是保守的。 在设计探针和引物时,要同时考虑在两条链上设计引物与探针。但要注意的是,在哪条链上设计探针时,就应靠近在...
答:1、首先将引物探针放入密封的容器中,以防止污染和损坏。2、其次将引物探针放入冰箱中,以防止温度变化对其影响。3、最后将引物探针放入干燥的环境中即可完成收纳。
答:如果你做的事荧光定量PCR,其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的,只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西,探针法还需要taqman探针,这个探针的设计是比较有讲究的,并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计,一般使用相关软件进行。
网友评论:
鬱岩19511596762:
PCR中的引物和探针是一个东西吗? -
60834阎阮
: prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
鬱岩19511596762:
PCR中的引物和探针是一个东西吗?不是的话有什么区别,具体一点. -
60834阎阮
:[答案] prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
鬱岩19511596762:
RT - PCR 的 探针 和 引物 是什么 它们的作用是什么啊?? -
60834阎阮
: 引物是用来扩增片段用的,而探针,探针上面有荧光基团,完整时检测不到荧光,与两引物之间的目的基因结合,PCR扩增过程中,探针被切断,可以检测到荧光.扩增...
鬱岩19511596762:
关于引物、探针和微卫星片段的区别及在实验中的应用 -
60834阎阮
: 第一个问题:引物是用来扩增DNA序列的,因为DNA的合成必须3-OH,也就是说核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸,引物就是用来提供3-OH的.探针是根据碱基互补的原理,用来与特定的DNA片段做杂交的,以此对特定的DNA片段进行检测,如Southern杂交,用的就是探针.只要是符合要求的DNA片段都可以用来做探针和引物,探针和引物是两个完全不同的概念,他们都是DNA或者RNA,只是用的方法不一样.说的简单些:引物是用来扩增DNA序列,探针用来与特定的DNA片段做分子杂交的 第二个问题:微卫星引物是微卫星两端的侧翼序列,是用来扩增微卫星片段的.
鬱岩19511596762:
FRET引物是什么 -
60834阎阮
:[答案] Taqman探针法的出现是定量PCR技术的重要里程碑,之后在此基础上发展出了杂交探针法,以及荧光引物法,是对探针法的不断改进和简化.如果希望全面掌握定量PCR技术的研究人员就不能错过这些定量检测技术. 要提到荧光探针或者荧光引物,...
鬱岩19511596762:
怎么设计引物 -
60834阎阮
: PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,PCR引物通常是一对,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷...
鬱岩19511596762:
我定了一批taqman探针的引物,但是后来决定用sybr做,这两种实验方法的引物可以一样吗? -
60834阎阮
:[答案] 可以一样,但是sybr的引物要求更严格些.因为taqman的探针可以消除很多非特异信号.
鬱岩19511596762:
一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 -
60834阎阮
: 一个qpcr反应中是不是只需要一个探针引物就可以了 一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2*的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以.由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于...
鬱岩19511596762:
基因探针是 单链DNA吗 -
60834阎阮
: 不一定. 基因探针(probe)就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA.1.探针的来源 DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因...
鬱岩19511596762:
PCR试剂盒中的引物和探针有毒或者有害么 -
60834阎阮
: 原则上应该是无害的