酵母单杂和双杂的异同
答：酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid system）源于对真核生物转录起始调控过程的深入理解。在这个系统中，基因转录的启动需要反式转录激活因子的介入，如酵母转录因子GAL4。GAL4的结构具有模块化特性，由DNA结合域（DNA-BD）和转录激活域（DNA-AD）两个独立的结构域组成，每个域在单独存在时仍具备功能，但...
答：深入解析GAL4系统酵母双杂交的奥秘 在分子生物学研究中，GAL4系统酵母双杂交（Yeast Two-Hybrid, Y2H）是一种强大的工具，用于检测和解析蛋白质之间相互作用。让我们逐一揭示其实验原理和关键步骤。原理揭秘 首先，GAL4系统的核心是真核生物中常见的转录激活因子GAL4，其结构独特，分为DNA结合域（BD, ...
答：酵母双杂交法的原理：典型的真核生物转录因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域： DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游， 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分...
答：酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。原理：酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反...
答：酵母单杂交技术最早是1993年由Li等从酵母双杂交技术发展而来，通过对报告基因的表型检测，分析DNA与蛋白之间的相互作用，以研究真核细胞内的基因表达调控。由于酵母单杂交方法检测特定转录因子与顺式作用元件专一性相互作用的敏感性和可靠性，现已被广泛用于克隆细胞中含量微弱的、用生化手段难以纯化的特定...
答：1、高敏感性。原因：①采用高拷贝和强启动子的表达载体，使融合蛋白过量表达；②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物，之后又与启动子结合，此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定；③通过mRNA使信号放大；④检测的结果是基因表达产物的累积效应，可检测存在于蛋白质间的微弱或暂时的相互...
答：酵母双杂交是一种探究蛋白质相互作用的新方法。它利用酵母细胞内的转录因子结构域和DNA结合域，将两个蛋白质的结构域分别与两个不同的酵母细胞中的转录因子结合，从而使两个蛋白质相互作用，并被检测出来。酵母双杂交的操作步骤 酵母双杂交的操作步骤如下：1.构建酵母双杂交载体 首先需要构建酵母双杂...
答：酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因。酵母双杂交系统检测蛋白之间的相互作用具有以下优点： ⑴ 作用信号是在融合基因表达后， 在细胞内重建转录因子的作用而给出的， 省去了纯化蛋白质的繁琐步骤。⑵ 检测在活细胞内进行， 可...
答：将这种技术微量化、阵列化后则可用于大 规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中，人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介 导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能，丰富了酵母双杂交系统的功能。此外，酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的...
答：酵母双杂交系统 真核生物转录调控因子具有组件式结构 (modular) 特征，这些蛋白往往由两个或两个以上相互独立的结构域， 其中DNA结合结构域( binding domain， BD)和转录激活结构域( activation domain， AD)是转录激活因子发挥功能所必须的。BD能与特定基因启动区结合，但不能激活基因转录，由.不同转录...
网友评论：
笪浅13365181835：
酵母单杂交系统与酵母双杂交系统的异同点? -
13015籍秀
： 酵母双(单)杂交系统:Y2H膜蛋白系统;Grow' ' n' ' Glow GFP酵母单(双)杂交系统;Grow´ n´ Glow ACE1酵母双杂交系统;Y2H膜蛋白系统cDNA文库;酵母载体;酵母菌;酵母转化和质粒提取;β -半乳糖苷酶活性检测试剂盒; 噬菌体展示:pSKAN噬菌体展示系统;Anti-plll (g3p)抗体;抗体;pSKAN8载体;pMAMPF3-PSTI4载体;Lambda PS噬菌体裂解物;Anti-hPSTI 基因文库:Y2H cDNA文库;Lambda PS基因文库;
笪浅13365181835：
酵母单双杂交? -
13015籍秀
： 酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明...
笪浅13365181835：
酵母单杂交的介绍 -
13015籍秀
： 酵母单杂交技术是一种研究蛋白质和特定DNA序列相互作用的技术方法,主要包括四个流程即:一、筛选含有报告基因的酵母单细胞株;二、构建表达文库;三、重组质粒转化至酵母细胞;四、阳性克隆菌株的筛选.
笪浅13365181835：
酵母双杂和酵母单杂中的载体pgadt7的区别 -
13015籍秀
： 可以用,放心吧
笪浅13365181835：
酵母单杂交,双杂交,三杂交都能用来做什么 -
13015籍秀
： 被采纳的答案回答的很好但存在一定误区单杂交确实是研究蛋白质与DNA特定序列相互作用的双杂交也是研究蛋白蛋白相互作用的不过三杂交就比较复杂了三杂交有很多种变形但最基本的是为了研究RNA和蛋白质之间的相互作用的在部分论文中,还出现RNA,cDNA等元件作为连接点,所以不该是研究蛋白质蛋白质相互作用的不过,通过RNA或者DNA和相互连接的两个蛋白质(虽然略扯淡)又何尝不是种相互作用呢所以我在这只是补充一下而已
笪浅13365181835：
酵母单杂交的缺点 -
13015籍秀
： 由于插入的靶元件与酵母内源转录激活因子可能发生相互作用,或插入的靶元件不需要转录激活因子就可以激活报告基因的转录,因此往往产生假阳性结果.如果酵母表达的AD融合蛋白对细胞有毒性,或融合蛋白在宿主细胞内不能稳定地表达,或融合蛋白发生错误折叠,或者不能定位于酵母细胞核内,以及融合的Gal4AD封闭了蛋白质上与DNA相互作用的位点,则都可能干扰AD融合蛋白结合于靶元件的能力,从而产生假阴性结果.
笪浅13365181835：
想知道酵母双杂交到底咋回事啊,看了半天书,晕,也看不明白,希望能用简单明了的通俗话帮我解释一下 -
13015籍秀
： 听过破镜重圆的故事吧.假如甲乙两个人各拿半块镜子,只有当他们两人在一起的时候这个镜子才可以拼成一个整个的.酵母双杂交我没做过,我的理解就是这样的:你看到的BD和AD分别是两个半块的镜子,你想研究的两个蛋白则是甲乙两个拿镜子的人. 如果你的两个蛋白能相互作用,它们手上的镜子就能拼在一起,也就是BD和AD可以结合, 它们结合以后,就形成了一个完整的镜子:呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子,使启动子下游基因LacZ得到转录而报告出来...
笪浅13365181835：
酵母单杂交方法分析转录激活活性的原理和过程 -
13015籍秀
： 0 引言酵母单杂交(yeast one hybrid)技术是体外分析DNA与细胞内蛋白质相互作用的一种方法,通过对酵母细胞内报告基因表达状况的分析,来鉴别DNA结合位点并发现潜在的结合蛋白基因,或对DNA结合位点进行分析. 运用此技术,能筛选...
笪浅13365181835：
酵母单杂交与细菌单杂交 -
13015籍秀
： 细菌杂交比较好.
笪浅13365181835：
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
13015籍秀
：[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
