酵母双杂四缺显色
答:3天。酵母在四缺培养基成长是非常快的,最晚3天就可以长出来。酵母是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便。
答:、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统...
答:回答:与题目不符,但希望能作为参考 一、实验原理酵母菌的生活史属于双单性类型,它们的单倍体细胞和二倍体细胞一般都能进行无限制的分裂。以单倍体细胞为主的酵母菌称为单倍体酵母,例如粟酒裂殖酵母(Schizosaccharamycespombe)。以二倍体细胞为主的酵母菌称为二倍体酵母,如啤酒酵母(又称面包酵母,...
答:一周。酵母双杂实验通常情况下是需要两周的时间,涂板是需要一周的时间进行发酵的。酵母是一种单细胞真菌,并非系统演化分类的单元。一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种典型的异养兼性厌氧微生物,在有氧和无氧条件下都能够存活,是一种天然发酵...
答:一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化...
答:夏科-莱登结晶为无色透明的菱形结晶。两端尖长,大小不等,折光性强,常在阿米巴痢疾,钩虫病及过敏性肠炎粪便中出现,同时可见到嗜酸性粒细胞。血晶为棕黄色斜方形结晶,见于胃肠道出血后的粪便内,不溶于氢氧化钾溶液,遇硝酸呈蓝色。(四)细菌1.正常菌群与菌群失调粪便中细菌极多,占干重1/3,多属正常菌群。在健康...
答:得到3×106左右的转化子,用硝酸纤维膜将这些转化子复印至X-gal平板上进行显色反应。作为阳性对照,含HAP5基因表达载体pDB20(HAP5)及鱼饵质粒pLGΔ-265 UP1的Δhap5-10酵母菌株经培养6 h后已显蓝色。而含水稻cDNA库的质粒pPC86的Δhap5-10(pLGΔ-265 UP1)酵母菌株2 d后才出现蓝色菌落。此实验重复进行了4...
答:生酵母也叫鲜酵母,酵母是一种单细胞真菌微生物,是一种对人体有益的生物膨松剂。鲜酵母的用量为即发性酵母的2到3倍。鲜酵母是一种没有经过干燥、造粒工艺的酵母。与干酵母相比,鲜酵母具有活细胞多,发酵速度快、发酵风味足、使用成本低等优点。鲜酵母分为高糖型和低糖型两种:(1)低糖型鲜酵母...
答:与题目不符,但希望能作为参考 一、实验原理酵母菌的生活史属于双单性类型,它们的单倍体细胞和二倍体细胞一般都能进行无限制的分裂。以单倍体细胞为主的酵母菌称为单倍体酵母,例如粟酒裂殖酵母(Schizosaccharamycespombe)。以二倍体细胞为主的酵母菌称为二倍体酵母,如啤酒酵母(又称面包酵母,...
答:在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。1.蓝细菌(蓝藻)与酵母菌都具有的结构或成分包括①细胞壁 ②细胞膜 ③核膜 ④核糖体 ⑤线粒体 ...C.变性的胶原蛋白不能与双缩脲试剂发生显色反应D.皮肤细胞衰老时水分含量和胶原蛋白分泌量减少,细胞体积增大5.细胞作为基本的生命系统,各组分之间分工合作...
网友评论:
何胖17792105950:
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
18804越砌
: 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
何胖17792105950:
酵母双杂交中为什么在双缺板上长?酵母双杂交中为什么在双缺板上长,
18804越砌
: 你好,因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.酵母(saccharomyces) 是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便.酵母克隆载体的种类也很多.酵母菌也有质粒存在,这种2μm 长的质粒称为2μm 质粒,约6 300bp.这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外,利用2μm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒.酵母克隆载体都是在这个基础上构建的
何胖17792105950:
用Gal4系统做酵母双杂,显色反应用的X - a - Gal能不能用X - Gal代替? -
18804越砌
: 显色反应只能用的X-a-Gal,不能用X-Gal代替.如果你来不及的话,可以用其它方法判定,在产品说明书上一般都有代替方法.
何胖17792105950:
酵母双杂交的常见问题 -
18804越砌
: 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
何胖17792105950:
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
18804越砌
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
何胖17792105950:
酵母双杂交的特点 -
18804越砌
: 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
何胖17792105950:
酵母双杂交实验有哪些注意事项 -
18804越砌
: 如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办?在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好.首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起.用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应.2.如果诱饵蛋白能直接激活报告基因的表达,该如何处理?该蛋白很可能有转录激活域,是个转录因子.可以通过基因重组切掉转录激活域,然后重新检测其是否自激活,但要注意重组也有可能破坏蛋白之间的互作.
何胖17792105950:
酵母双杂交系统有哪些优缺点 -
18804越砌
: 1、高敏感性.原因:①采用高拷贝和强启动子的表达载体,使融合蛋白过量表达;②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物,之后又与启动子结合,此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定;③通过mRNA使信号放大;④检测的结果是基因表达产物的累积效应,可检测存在于蛋白质间的微弱或暂时的相互作用.2、真实性.检测在活细胞内进行,作用条件与作用力无需模拟,在一定程度上代表细胞内的真实情况.3、简洁性.融合蛋白相互作用后,减少了制备抗体和纯化蛋白质的繁琐步骤. 3、广泛性.采用不同组织器官细胞类型和分化时期的材料构建cDNA文库,能分析不同亚细胞部位和功能的蛋白质,适用于部分细胞质、细胞核及膜结合蛋白.
何胖17792105950:
酵母双杂交的具体过程是什么?(中文) -
18804越砌
: 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...
何胖17792105950:
酵母双杂交错用了pGADT7 - rec2对结果有没有影响 -
18804越砌
: 注意事项 (1)酵母双杂交对照的设定 常规的酵母双杂交操作时一般会设定阳性对照、阴性对照以及显色系统对照三种对照,以MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统为例: 阳性对照:pGADT7-T + pGBKT7-53,其中T蛋白和53蛋白是已经...