nbt测sod测定详细步骤

  • ...请教SOD同工酶电泳后如何染色,染色液的具体配方。(用的NBT)_百度知...
    答:0.245mmol/lNBT浸泡20min,含0.028mol/lTEMED、28umol/l核黄素,0.036mol/lpH7.8的磷酸缓冲液中浸泡20min,最后放入含0.1mmol/lEDTA,0.05mol/lpH7.8的磷酸钠缓冲液光照20-30min.
  • sod测定方法有哪些
    答:2.一般化学法这些方法的共同特点是要有一个O2的产生体系和一个被O2还原或氧化的可检测体系。在SOD存在下,一部分O2被SOD歧化,因而O2还原或氧化检测体系的反应受到抑制。根据反应受抑制程度,测定SOD的活性。一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、...
  • 用NBT法测定SOD含量时ACK值大概是多少?
    答:正常的应该是0.3-0.8这个范围
  • 如何用邻苯三酚法测定超氧化物岐化酶的活性?
    答:[原理]SOD的活力测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧化酶法,邻苯三酚法,化学发光法,肾上腺素法,NBT-还原法,光...
  • 在什么情况下才测抗氧化酶活力
    答:l PBS(不加酶液)照光 后测定作为最大光还原管,另 1 支只加缓冲液置于暗中测定时用于调零。 (4)以不照光的对照管(只有缓冲液并置于暗处)调零后,避光测 OD560(出现颜色即 可测定)。(5)酶活性计算:SOD 活性单位以抑制 NBT 光化还原 50%所需酶量(测的样品值要 在最大管的一半左右才合适,否则要调整酶...
  • 在sod测定中为什么设照光和暗中两个对照管?
    答:测定SOD的活性是基于其对氮蓝四唑(NBT)还原作用的抑制。在有光的条件下,核黄素会被还原并产生O₂,进一步还原NBT形成蓝色甲腙。然而,SOD的存在会清除O₂,减少甲腙的形成。因此,对照管的光还原反应程度越高,说明SOD活性越低;反之,SOD活性越高,对照管的反应液颜色越浅。实际上,...
  • SOD POD活性的测定方法
    答:⑤200umol/l核黄素溶液:遮光保存,随用随配。参照王晶英等[82]的NBT还原法测定。取芽(剥除鳞片)0.25 g于预冷的研钵中,加2 mL预冷的提取介质。在冰浴下研磨成匀浆,加入提取介质冲洗研钵,并使终体积为5 mL,4℃下1000rpm离心15 min,上清液即为SOD粗提液。离心后取上清50 μL,加入1....
  • 在sod测定中为什么设照光和暗中两个对照管?
    答:在SOD测定中,设置照光和暗中对照管是为了准确评估样品中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。SOD具有专一性,能够抑制超氧阴离子自由基的形成,从而减少亚硝酸盐的生成。当样品中含有SOD时,与对照管相比,测定管的吸光度值会降低,因为SOD阻断了氮蓝四唑(NBT)在光下被还原的过程,从而减少了蓝色甲腙的...
  • SOD试剂盒基本原理
    答:它与超氧阴离子反应生成的染料易于检测,且反应程度仅为cytochrome C的70%,这使得它的灵敏度极高。通过稀释样品并优化背景吸光度,WST-1能有效测定SOD的抑制效应,且不会干扰黄嘌呤氧化酶的还原型测定。WST-1的还原率与SOD的活性呈线性关系,SOD的抑制浓度(IC50)可通过比色法精确测定。具体来说,...
  • SOD试剂盒的基本原理
    答:为了测定SOD的活性,研究人员尝试了许多间接的或者直接的方法,其中,NBT的间接法最为常用,因为它很方便。但是,NBT法有几个缺点,例如生成的染料水溶性差,而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测,但它和超氧化物反应过于剧烈,不能测定低水平的SOD。SOD Assay ...

  • 网友评论:

    祖郎18031587306: 氮蓝四唑NBT法测超氧化物歧化酶的具体步骤 -
    57257父凌 : 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力 一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶.本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确...

    祖郎18031587306: sod酶活性测定方法 -
    57257父凌 : 1、测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法.其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力. 2、在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧...

    祖郎18031587306: 四阶段法的基本原理和步骤(在线等) -
    57257父凌 : 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶.本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确...

    祖郎18031587306: 采用什么方法可以定量测定酶活性 -
    57257父凌 : 酶活性测定的原理: 超氧物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD) 活性的测定 SOD采用氮蓝四唑(nitro-blue tetrazolium,NBT)法(Beauchamp和Fridovich,1971).反应步骤为:取200μl粗提液,加入3.7 ml NBT反应液50mmol/LpH7.8的磷酸缓...

    祖郎18031587306: 超氧化物歧化酶的测定 -
    57257父凌 : 超氧化物歧化酶(SOD)的催化底物是O2 ,一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位.由于O2 自身很不稳定,且不易制备,测定SOD的方法除少数采用直接法外,一般多为间接法.1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的...

    祖郎18031587306: 关于光泽精化学发光法 -
    57257父凌 : 常用的几种SOD检测方法: 1. 分光光度法 分光光度法是最为典型的检测SOD的方法,这种方法使用了细胞色素 C(cytochrome C)或者氮蓝四唑(NBT)(图1).用cytochrome C的还原法来检测O2-是因为还原后的cytochrome C会生成紫色的染料(...

    祖郎18031587306: 大蒜中SOD活性的测定 -
    57257父凌 : 这样应该可以了吧 一、实验目的:(1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤.(2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数.(3)掌握离心机的使用.二、实验原理: 邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带...

    祖郎18031587306: 如何测定鸡蛋中超氧化物歧化酶的水平 -
    57257父凌 : 1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的歧化量,从而确定SOD的活性.经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法.由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用.2.一般化学法 这些方法的共同特点是要有一个O2 的产生体系和一个被O2 还原或氧化的可检测体系.在SOD存在下,一部分O2 被SOD歧化,因而O2 还原或氧化检测体系的反应受到抑制.根据反应受抑制程度,测定SOD的活性.一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、没食子酸法、6-羟多巴胺法、亚硝酸盐形成法和碱性二甲亚砜法.

    祖郎18031587306: 在NBT还原法测量SOD活性实验中MET起什么作用? -
    57257父凌 :[答案] 从该方法原理上可解释这个问题: 该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小.在氧气中,还原的核黄素与氧反应产生O2-,O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色,SOD通过催化O2-歧化反应,生成O2与...

    祖郎18031587306: 大蒜中SOD活性的测定
    57257父凌 : 首先用有机溶剂如四氯化碳或者二硫化碳将待测物萃取出来,然后量取一定体积,用标准的(事先配置好)强氧化剂溶液如酸性高锰酸钾溶液,或者标准过氧化氢溶液滴定,(最好用过氧化氢,高锰酸钾紫色很难判断滴定终点)根据反应比计算就可以!

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