sod测定详细步骤
答:先测邻苯三酚自氧化速率k0 在测加入sod酶后的邻苯三酚自氧化速率k1 单位体积活力=(k0-k1)/k0/50%×9×邻苯三酚样品稀释倍数/加入样品液的体积
答:2 英文参考 Superoxide di *** utase 3 概述 超氧化物歧化化物歧化酶(SOD)是体内重要的自由基超氧自由基O2-的天然清除剂,是免除自由基损伤的主要防御酶。自1969年McCord等发现以来已引起医学界极大关注。随着SOD测定方法的不断改进和完善,其在临床上的应用日趋广泛。大量临床资料证实,...
答:采用NBT法测定SOD酶活性。在黑暗条件下,向小烧杯中分别加入:62.5mmol/l pH7.8磷酸缓冲液4ml、30mmol/ldl-甲硫氨酸0.2ml、3µmol/LEDTA0.1ml、1.125mmol/l NBT0.2ml、60µmol/l核黄素0.2mL,上述提取出的各处理的酶液0.05mL,以不加NBT和酶液但用缓冲液代替的混合液作为校...
答:测定SOD活性的试剂盒,例如OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay (货号:STA-340),利用黄嘌呤(Xanthine)和黄嘌呤氧化酶(XOD)体系来产生超氧阴离子。该试剂盒的原理是,发色基团在被氧化物阴离子还原后,会变为水溶性的黄色甲染料。SOD的活性通过观察这种发色基团还原的抑制程度来计算。...
答:SOD1实验可以通过以下步骤进行:1、组织采集:从动物模型或临床患者中采集肾脏组织样本。2、SOD1活性检测:通过测定肾脏组织中SOD1酶活性来评估抗氧化能力的变化。SOD1酶能够将细胞内超氧阴离子(一种有害的自由基)转化为较为稳定的氧和过氧化氢,从而减轻氧化应激引起的细胞损伤。SOD1活性的下降可能...
答:SOD酶活测定方法 (一)氮蓝四唑法 1.方法提要 在电子供体如甲硫氨酸存在下,核黄素受光激发,与电子供体反应被还原。在氧气中,还原的核黄素与氧化反应产生,将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色的不溶性僭 ,SOD通过催化 歧化反应,生成O 2 与H 2 O 2 ,从而抑制蓝色形成。按抑制蓝色...
答:核黄素(mL) 0.3 0.3 0.3 0.3 ……50mmol/LpH7.8 PBS 0.1 0.1 ……光吸收值(A560) 空白 A0 A1 A2 ……表一 活性测定操作步骤表 (3) 结果 酶活力=ΔA×60/ (0.1×50%×A0×T)酶活力单位为每小时每克鲜重的酶活单位数。ΔA =A0- A1 ...
答:超氧化物歧化酶可以清除产生的超氧阴离子,从而减缓NBT的还原速率。通过测定NBT的消失速率,可以间接测定SOD的活性。2、XOD法(黄嘌呤氧化酶法):这种方法利用黄嘌呤氧化酶将黄嘌呤转化为尿酸的反应,过程中产生的超氧阴离子会被SOD清除。测定尿酸的生成速率可以用来测定SOD的活性。3、氰化铁法:这种方法...
答:POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为7.8)。②提取...
答:这里测定的是邻苯三酚自氧化过程中的初始阶段,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长出有强烈光吸收。当有SOD存在时,由于它能催化O2 -与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过计算即可求出SOD的酶活性。另外 酶...
网友评论:
邹怕15812623130:
sod酶活性测定方法 -
15417皮玛
: 1、测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法.其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力. 2、在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧...
邹怕15812623130:
大蒜中SOD活性的测定 -
15417皮玛
: 这样应该可以了吧 一、实验目的:(1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤.(2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数.(3)掌握离心机的使用.二、实验原理: 邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带...
邹怕15812623130:
超氧化物歧化酶的测定 -
15417皮玛
: 超氧化物歧化酶(SOD)的催化底物是O2 ,一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位.由于O2 自身很不稳定,且不易制备,测定SOD的方法除少数采用直接法外,一般多为间接法.1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的...
邹怕15812623130:
氮蓝四唑NBT法测超氧化物歧化酶的具体步骤 -
15417皮玛
: 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶(SOD)活力 一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶.本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确...
邹怕15812623130:
求助土壤蛋白酶、酸性磷酸酶、SOD酶活测定方法,最好是能有详细过程,谢!
15417皮玛
: SOD酶活测定方法 (一)氮蓝四唑法 1. 方法提要 在电子供体如甲硫氨酸存在下,核黄素受光激发,与电子供体反应被还原.在氧气中,还原的核黄素与氧化反应产生, 将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色的不溶性僭 ,SOD通过催化 歧化反应,生成O2与H2O2,从而抑制蓝色形成.按抑制蓝色特形成的50%为一酶活单位.酶活力越高,抑制50%蓝色形成所需酶量越少. 2. 仪器 荧光灯管. 离心机. 分光光度计. pH计. …… 参考网址on http://www.bio1000.com/news/cp/292689.html
邹怕15812623130:
急求!!!实验设计:从大蒜中提取sod,如何测定sod的活性? -
15417皮玛
: 不知是不是大蒜中提取的有何影响. 在一般情况下,SOD酶活性测定只能应用间接活性测定法.多采用【邻苯三酚自氧化方法】. 邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2 -(氧的离子型态),生成带色的中间产物,反应开始后反应...
邹怕15812623130:
大蒜中SOD活性的测定
15417皮玛
: 首先用有机溶剂如四氯化碳或者二硫化碳将待测物萃取出来,然后量取一定体积,用标准的(事先配置好)强氧化剂溶液如酸性高锰酸钾溶液,或者标准过氧化氢溶液滴定,(最好用过氧化氢,高锰酸钾紫色很难判断滴定终点)根据反应比计算就可以!
邹怕15812623130:
谁给一下测抗氧化酶活性的具体方法? -
15417皮玛
: 探讨汽车尾气对小鼠血液中的SOD、CAT、GSH-Px活性的影响.方法 64只小鼠分成相等的4大组,1大组作为对照组不通汽车尾气,2大组通1h汽车尾气,3大组通1.5h,4大组通2h.SOD活性和GSH-Px活性测定按试剂盒说明进行,用KMnO 4 滴定...
邹怕15812623130:
动物SOD酶活性测定方法 -
15417皮玛
: NBT光还原法,邻苯三t酚自氧化0法测定SOD酶活性2011-10-28 15:11:56
邹怕15812623130:
sod计算方法 -
15417皮玛
: SOD活性的测定方法 [ 2005-10-31 12:51:00 | By: abingxu ] 0 推荐pH7.8最适,岩绝蔽按邵从本等(1993)方法. 1.试剂: 反应液:含13*10-3M 甲硫氨酸(MW=149.21292),75*10-6MNBT(MW=817.7),2*10-6M核黄素(MW=376.36),100*10-...