做代谢组学检测的血液样本怎么采集与前处理 找CRO做代谢组学检测需要注意哪些关键点？
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1.采集时间：
最好在相同的时间点（如早晨空腹）采集血液样本，以减少生物节律的影响。
2.采集方法：
通常采用静脉抽血，使用无菌采血管，可以选择含有或不含有抗凝剂的管子，视后续处理和分析需求而定。
3.样本量：
通常需要1-2 mL血液。
二、血液样本处理：
1.离心：
将血液样本在4°C下进行离心（例如，3000 g，10分钟），以分离血浆或血清。
血浆：抽血后，立即在4°C下离心（例如，3000 g，10分钟）以分离血浆。血浆位于管子顶部，应小心转移以避免扰动红细胞。
血清：抽血后，让血液在室温下自然凝固（约30分钟），然后同样在4°C下离心（例如，3000 g，10分钟）。血清位于管子顶部，需小心分离。
2.样本分装：
将分离的血清或血浆转移到新的无菌管中，并标记。
分离出的血浆或血清应在低温下保存，通常在-80°C的条件下以防止代谢物降解。如果样本需要送往其他地方进行分析，应在冷链条件下运输。
整体。既包含CRO公司品牌、商誉、组织人才、实施案例、客户口碑、公司大小，还包含技术细节、设备实力、人才能力、数据处理能力、服务效率、服务人员是否经验丰富、数据库量和质，此外，还有自己的资金支持、重视程度、目标层次不同等自身需求原因。
全过程。代谢组学又包含样本前处理、数据获取、峰检测、峰对齐、差异特征筛选、化合物鉴定、二级谱验证、定量检测等流程，其中除了实验标准，质量把控要严格外，一直被大家疏忽的还有数据处理部分，如果检测信号不准确，批次效应无法对齐，不同方法得到的实验结果完全是不一样的。下面实验时我用相同数据，采用不同软件得到的PLSDA结果图，可以看到左边图完全分不开，右侧图能够清晰分开，可以看出不同峰检测算法对于信号的检测对比差异非常明显。所以，我们需要把控实验前处理质量和方法的同时，还需要考察CRO公司的数据处理能力。
核心。有无自建的谱图数据库和高精度的智能峰检测算法，对于提高化合物覆盖度、鉴定率、准确性至关重要，不同数据处理方法的结果是天差地别的。
采集：
由于生物样本通常采用组内平行样本，不可避免的会由于时间、环境等因素产生“个体差异”，所以在采集动物血液时需要使用麻醉剂以减少采血过程中动物的疼痛感、不适感、创伤性，以减小应激反应造成的代谢物的变化、尽量缩短采集时间、保持一致的采集部位等细节问题；另外也考虑到样本采集或制备的原则和易实现性，操作应具有简便性和可重现性。
从生物体内采集出的血液首先会收集到专用容器，如动物实验使用注射器取血后可以直接存储在EP管内或采血管中，但若是从医院检验科采集的血液会首先存储在专用的真空采血管内，管内分别含有不同种类的抗凝剂、促凝剂等成分，适用于不同检测项目，例如血清和血浆的生化试验、免疫试验、凝血试验、红细胞沉降率试验、血常规检测、血糖检测等。常用的抗凝剂有EDTA、柠檬酸钠、肝素钠、肝素锂，这些成分在与血液混合时不可避免地会产生基质效应，如促进或抑制血液中的细胞代谢、酶代谢，造成血液中小分子的种类和含量变化。有学者在血液与抗凝剂/促凝剂的相互作用方面进行了研究，认为肝素钠相比于其他抗凝剂，与血液混合后引起的基质效应较弱，产生的杂质较少，并且也满足重现性要求，在代谢组学研究中若使用气质联用或高分辨的液质联用作为主要分析技术，建议选择含有肝素钠作为抗凝剂的采血管储存离体血液。
前处理：
血液中含有血细胞，在采血后血细胞仍有短时间的存活，所以在采集血液样本后需要尽快分离血细胞，例如高速离心可以将微小杂质及血细胞沉淀，减少离体血细胞的代谢造成的影响。若不需要第一时间进行分析，则应该尽快分装，并储存在-80℃生物低温冰箱中。从微观角度来说，借鉴化学反应速率常数随温度变化关系公式（阿伦尼乌斯公式），生物样本的代谢活动与样本所处温度成正相关，在-80℃或液氮（-196℃）这种极低温度下，血液中的酶或其他活性物质的活动才会减弱或停止，同时样本中的水以晶体形式存在，减小了流动性，分子的传输性极大减弱，避免样本变质或分解代谢，可保存数月数年。
血液样本的前处理相比于尿液等其他类型的体液样本，过程更多也更细致一些。原因是血液中含有的成分十分复杂，不同种类的化合物极性千差万别，且存在种类较多、丰度较高的蛋白质成分，通常采用一定比例的有机溶剂进行涡旋震荡萃取（有机溶剂沉淀法），使极性和非极性小分子物质充分溶解在溶剂中，经高速离心后得到的上清液和下相为小分子萃取液，沉淀物质为蛋白及杂质成分。广泛使用的溶剂包括甲醇、水、乙腈，其他如丙酮、异丙醇等等低极性和高极性的溶剂需要根据具体实验需求而单独定制设计。
总体而言，血液样本的采集与前处理看似简单，但过程中包含大量细节考虑与操作，应尽可能标准化，但一种方法不可能适用于所有实验，需要围绕实验目的进行充分的个性化实验设计，样本的采集和前处理遵循易实现性、易重现性、多组分保留等原则，在生物样本的来源、采集、前处理等源头把关，保障实验最终数据与结果的可靠性，经得起验证。
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