微生物实验原理是什么?
微生物分离接种和培养的实验原理如下:
①微生物分离的实验原理：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程。
②微生物接种的实验原理： 所谓接种，就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。
③微生物培养的实验原理：使用培养基，根据微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制。
（一）接种的操作
1.斜面接种（接金黄葡萄球菌）
①操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
②将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。
③先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。
④左手拿接种环（如握钢笔一样），以火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
⑤用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出，然后让试管口缓缓过火灭菌（切勿烧过烫）。
⑥将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。
⑦迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。。
⑧接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。
⑨将接种环烧红灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。
2.液体接种
①由斜面培养基接入液体培养基，此法用于观察细菌的生长特性和生化反应的测定，操作方法与前相同，但使试管口向上斜，以免培养液流出接入菌体后，使接种环和管内壁磨擦几下以利洗下环上菌体。接种后塞好棉塞将试管在手掌中轻轻敲打，使菌体充分分散。
②由液体培养基接种液体培养基，菌种是液体时，接处除用接种环外尚用无菌吸管或滴管。接种时只需在火焰旁拔出棉塞,将管口通过火焰,用无菌吸管吸取菌液注入培养液内,摇匀即可。
3.平板接种
将菌在平板上划线和涂布。
①划线接种
②涂布接种：用无菌吸管吸取菌液注入平板后，用灭菌的玻棒在平板表面作均匀涂布。
4、穿刺接种
把菌种接种到固体深层培养基中，此法用于嫌气性细菌接种或为鉴定细菌时观察生理性能用。
①操作方法与上述相同，但所用的接种针应挺直。
②将接种针自培养基中心刺入，直刺到接近管底，但勿穿透，然后尚原穿刺途径慢慢拔出。
（二）分离的操作方法
1、稀释分离法
通过不断稀释使被分离的样品分散到最低限度，然后吸取一定量注入平板与温度适合溶化了的琼脂培养基混合，这样分散的细菌被固定在原处而形成单菌落。
①将大肠杆菌或酵母菌用无菌水制作菌悬液。
②取若干支无菌试管，每支内盛9ml无菌水。
③吸取1ml制备好的菌悬液，置于第一支含有9ml无菌水的试管内，这样就稀释了10倍，也就是10-2。
④从第一支试管内（10-2）吸取1ml注入第二支含有无菌水的试管内，这样就稀释了100倍，也就是10-2。
⑤用同样方法操作，直至稀释至10-5-10-6。
⑥分别精确吸取10-5-10-6各稀释度菌液0.2ml加入编好号的空无菌平皿中，同一稀释度重复做三个平皿。
⑦将已溶化并冷却至45℃的琼脂培养基倒入上述各平皿内，轻轻旋转使培养基与菌悬液充分混匀，凝固后倒置于37℃或38℃度恒温箱中培养24-48小时，观察平板上菌落生长和分布情况。
2、平板划线分离法
平板划线分离法是接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到分离微生物的一种方法。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的。
①倒平板 溶化牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板，水平静置待凝。
②在酒精灯光焰上灼烧接种环，待冷，取一接种环金黄葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。
③左手握琼脂平板稍抬起皿盖，同时靠近火焰周围，右手持接种环伸入皿内，在平板上一个区域作之形回划线，划线时例接种环与平板表面成30-40°角度轻轻接触，以腕力在表面作轻快的滑动，勿使平板表面划破或嵌进增基内。
④灼烧接种杯，以杀灭接种环上尚残余的菌液，待冷却后，再将接种环伸入皿内，在第一区域划过线的地方稍接触一下后，转动90°，在第二区域继续划线。
⑤划毕后再灼烧接种杯，冷却后用同样方法在其他区域划线。
⑥全部划线完毕后，在平皿底用特种蜡笔注明菌种、日期、组别、姓名。将整个培养皿倒置放入恒温箱培养。
⑦37℃经过24-48小时培养后取出观察。注意菌落的开关、大小、颜色、边缘、表面结构、透明度等性状。
无菌操作环节：
①接种室应保持清洁，用煤粉酚皂液擦洗台面及墙壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均应用紫外灯灭菌。定期对接种室作无菌程度的检查。
②进入接种室前，应先做好个人卫生工作，在缓冲间内要更换工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只准在接种室内使用。不准穿到其它地方去，并要定期更换、消毒。
③接种的试管、三角并瓶等应做好标记，注明培养基、菌种的名称、日期。移入接种室内的所有物品，均须在缓冲室用70%酒精擦试干净。
④接种前，双手用70%酒精或新洁尔消毒，操作过程不离开酒精灯火焰；棉塞不乱放；接种工具使用前后均需火焰灭菌。
⑤培养箱应经常清洁消毒。
绛旓細鈶犲井鐢熺墿鍒嗙鐨勫疄楠屽師鐞嗭細浠庢贩鏉傜殑寰敓鐗╃兢浣撲腑鑾峰緱鍙惈鏈夋煇涓绉嶆垨鏌愪竴鏍井鐢熺墿鐨勮繃绋銆傗憽寰敓鐗╂帴绉嶇殑瀹為獙鍘熺悊锛 鎵璋撴帴绉嶏紝灏辨槸灏嗕竴瀹氶噺鐨勭函绉嶅井鐢熺墿鍦ㄦ棤鑿屾搷浣滄潯浠朵笅杞Щ鍒板彟涓宸茬伃鑿岋紝骞堕傚疁浜庤鑿岀敓闀跨箒娈栨墍闇鐨勫煿鍏诲熀涓婄殑杩囩▼銆傗憿寰敓鐗╁煿鍏荤殑瀹為獙鍘熺悊锛氫娇鐢ㄥ煿鍏诲熀锛屾牴鎹井鐢熺墿鐢熼暱绻佹畺鎵闇瑕佺殑鍚...
绛旓細纭畾寰敓鐗╃殑鑰愮儹鎬銆傛牴鎹珮涓夌綉鏄剧ず锛寰敓鐗╃儹鍔涜嚧姝绘椂闂寸殑娴嬪畾瀹為獙鍘熺悊鏄細鍦ㄤ竴瀹氭俯搴︿笅锛屽姞鐑鐞嗗井鐢熺墿鏍峰搧涓瀹氭椂闂达紝瑙傚療寰敓鐗╁瓨娲荤殑鎯呭喌锛屼粠鑰岀‘瀹氬井鐢熺墿鐨勮愮儹鎬с
绛旓細璇ュ師鐞嗕富瑕佸熀浜庡井鐢熺墿鐨勮愮儹鎬у拰鐑姏鑷存娓╁害銆1銆佺儹鍔涜嚧姝绘俯搴︽槸瀵圭壒瀹氬井鐢熺墿鏉鑿岋紝寰敓鐗╁叏閮ㄦ浜℃椂杈惧埌鐨勬俯搴︺傚湪杩欎釜娓╁害涓嬶紝鏌愪竴绉嶇壒瀹氱殑寰敓鐗╃殑90%鐨勫師鏈夋畫瀛樻椿鑿岃鏉姝汇2銆丗鍊兼槸鎸囧湪鎭掑畾娓╁害涓嬬殑鏉鑿屾椂闂达紝涔熷氨鏄鏄湪鐬棿鍗囨俯锛岀灛闂撮檷娓╁喎鍗寸殑鐞嗘兂鏉′欢涓嬬殑F鍊硷紝鍗曚綅min锛孎鍊煎弽搴旂粏鑿岃愮儹鎬с
绛旓細寰敓鐗╁澶у垎瀛愮墿璐ㄦ按瑙ｅ疄楠岀殑鍘熺悊鏄井鐢熺墿瀵瑰ぇ鍒嗗瓙鐗╄川濡傛穩绮夈佽泲鐧借川鍜岃剛鑲笉鑳界洿鎺ュ埄鐢锛屽繀椤讳緷闈犱骇鐢熺殑鑳炲閰跺皢澶у垎瀛愮墿璐ㄥ垎瑙ｏ紝鎵嶈兘琚井鐢熺墿鍚告敹鍒╃敤銆傚疄楠屽師鐞嗙粏鑿屽澶у垎瀛愮殑娣绮夈佽泲鐧借川鍜岃剛鑲笉鑳界洿鎺ュ埄鐢紝蹇呴』闈犱骇鐢熺殑鑳炲閰讹紝濡傛穩绮夐叾銆佽泲鐧介叾鍜岃剛鑲叾灏嗗ぇ鍒嗗瓙鐗╄川鍒嗚В銆
绛旓細瀹為獙鍘熺悊锛氬湡澹ゆ槸寰敓鐗╃敓娲荤殑澶ф湰钀ワ紝鏄鎵惧拰鍙戠幇鏈夐噸瑕佸簲鐢ㄦ綔鍔涚殑寰敓鐗╃殑涓昏鑿屾簮銆備笉鍚屽湡鏍蜂腑鍚勭被寰敓鐗╂暟閲忎笉鍚岋紝涓鑸湡澹や腑缁嗚弻鏁伴噺鏈澶氾紝鍏舵涓烘斁绾胯弻鍜岄湁鑿屻備竴鑸湪杈冨共鐕ワ紝鍋忕⒈鎬с佹湁鏈鸿川涓板瘜鐨勫湡澹や腑鏀剧嚎鑻楁暟閲忚緝澶氾紝閰垫瘝鑿屽湪涓鑸湡澹や腑鐨勬暟閲忚緝灏戯紝鑰屽湪姘存灉琛ㄧ毊銆佽憽钀勫洯銆佹灉鍥湡涓暟閲忓浜...
绛旓細鍏瀹為獙鍘熺悊涓昏鍖呮嫭浠ヤ笅鍑犱釜鏂归潰锛1銆侀噰闆嗘牱鏈細瀵瑰尰闄㈠唴瀛樺湪鐥呭師鑿屾薄鏌撶殑鐗╁搧琛ㄩ潰銆佺┖姘斻佹按绛夌幆澧冭繘琛岄噰鏍枫傚父鐢ㄧ殑閲囨牱鏂规硶鍖呮嫭鍗敓绾卞竷鎿︽嫮娉曘佸钩鏉垮煿鍏绘硶鍜岀┖姘旈噰鏍峰櫒绛夈2銆佸煿鍏诲垎绂伙細灏嗛噰闆嗙殑鏍锋湰鍦ㄩ傚疁鐨勫瘜钀ュ吇鍩瑰吇鍩轰笂鍩瑰吇锛屼娇鍏朵腑鐨寰敓鐗寰椾互绻佹畺鐢熼暱锛屽苟鍒嗙鍑哄悇绉嶄笉鍚岀被鍨嬬殑缁嗚弻銆佺湡鑿岀瓑寰敓鐗...
绛旓細寰敓鐗渚靛叆璇曢獙娉曪紝鍙堢О寰敓鐗╂寫鎴樻硶锛屾槸涓绉嶈緝涓哄父瑙佺殑瀵嗗皝瀹屾暣鎬ф祴璇曟柟娉曪紝閫氬父涓庢ā鎷熺亴瑁呭悓鏃惰繘琛屻傞氳繃鎸夌収妯℃嫙鐏岃楠岃瘉鏂规杩涜鍩瑰吇鍩烘ā鎷熺亴瑁咃紝鐒跺悗杩涜鍘嬪杞х洊鍚庯紝鐩鍚堟牸锛岀粡宸查獙璇佺殑鐏弻鏌滅伃鑿屽悗锛屽皢瀹瑰櫒瀵嗗皝闈㈡蹈鍏ュ埌楂樻祿搴︾殑鑿屾恫涓紝浣挎牱鍝佸鍣ㄥ唴鐨勫煿鍏诲熀鍏呭垎鎺ヨЕ灏佸彛鍐呰〃闈紝鏍峰搧鐨勯閮ㄥ強灏佸彛...
绛旓細浜屻瀹為獙鍘熺悊 娴嬪畾寰敓鐗缁嗚優鏁伴噺鐨勬柟娉曞緢澶氾紝閫氬父閲囩敤鐨勬湁鏄惧井鐩存帴璁℃暟娉曞拰骞虫澘璁℃暟娉曘傛樉寰鏁版硶閫傜敤浜庡悇绉嶅惈鍗曠粏鑳炶弻浣撶殑绾煿鍏绘偓娴恫锛屽鏈夋潅鑿屾垨鏉傝川锛屽父涓嶆槗鍒嗚鲸銆傝弻浣撹緝澶х殑閰垫瘝鑿屾垨闇夎弻瀛㈠瓙鍙噰鐢ㄨ鐞冭鏁版澘锛屼竴鑸粏鑿屽垯閲囩敤褰煎緱缃楀か路 闇嶆辰锛圥etrof Hausser锛夌粏鑿岃鏁版澘銆備袱绉嶈鏁版澘鐨勫師鐞嗗拰閮ㄤ欢...
绛旓細浜屻瀹為獙鍘熺悊 娴嬪畾寰敓鐗缁嗚優鏁伴噺鐨勬柟娉曞緢澶氾紝閫氬父閲囩敤鐨勬湁鏄惧井鐩存帴璁℃暟娉曞拰骞虫澘璁℃暟娉曘傛樉寰鏁版硶閫傜敤浜庡悇绉嶅惈鍗曠粏鑳炶弻浣撶殑绾煿鍏绘偓娴恫锛屽鏈夋潅鑿屾垨鏉傝川锛屽父涓嶆槗鍒嗚鲸銆傝弻浣撹緝澶х殑閰垫瘝鑿屾垨闇夎弻瀛㈠瓙鍙噰鐢ㄨ鐞冭鏁版澘锛屼竴鑸粏鑿屽垯閲囩敤褰煎緱缃楀か路 闇嶆辰锛圥etrof Hausser锛夌粏鑿岃鏁版澘銆備袱绉嶈鏁版澘鐨勫師鐞嗗拰閮ㄤ欢...
绛旓細鍘熺悊锛氬埄鐢ㄩ搧涓濅笂纭噧鐑ф椂鐏劙寰堟贰锛岀櫧澶╁湪杩滃鐪嬩笉鍑烘潵锛屽ソ璞＄湡鐨勬槸閽笣鎶婅湣鐑涚偣鐫鐨勩傛搷浣滐細浜嬪厛鎶婅嚜琛岃溅閽笣涓绔敜鎵佹垚鍑规Ы锛屽湪妲介噷鏀句竴浜涚～绮夛紝鍔犵儹鐔斿寲鐫鐏紝澶囩敤銆傚皢涓鏀湣鐑涚偣鐕冨悗鏀惧湪妗屼笂銆傝繖鏃剁敤鐡剁洊灏嗙儧鐒扮洊鐏紝鍐嶇敤閽笣鎺ヨЕ鐑涜姱涓婂崌鐨勭櫧鐑燂紝鐑涚伀渚垮鐕冦傚彲鍐嶇洊鐏紝鍐嶇偣鐕冦傝繖鏍蜂竴浜竴鐏紝...
