有关标记基因和受体细胞的筛选的问题 质粒中的抗生素合成基因等标记基因通常会用于含有目的基因受体细...

\u9ad8\u4e2d\u751f\u7269\uff0c\u4e3a\u4ec0\u4e48\u901a\u8fc7\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\u53ef\u4ee5\u7b5b\u9009\u6709\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u7684\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de

LZ\u60a8\u597d
\u60a8\u53ef\u4ee5\u8fd9\u4e48\u7406\u89e3\uff1a
\u5982\u679c\u4e00\u4e2a\u7ec6\u80de\u4e0d\u8868\u8fbe\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\uff0c\u90a3\u4e48\u5c31\u8bc1\u660e\u8f7d\u4f53\u6839\u672c\u5c31\u6ca1\u8fdb\u5165\u7ec6\u80de
\u6240\u4ee5\u62e5\u6709\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\u662f\u62e5\u6709\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u7684\u5fc5\u8981\u4e0d\u5145\u5206\u6761\u4ef6

\u6545\u800c\u53ef\u4ee5\u76f4\u63a5\u6dd8\u6c70\u4e00\u6279\u7ec6\u80de

\u542b\u6709\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u7684\u8f7d\u4f53\u8fdb\u5165\u7ec6\u80de\uff0c\u8be5\u7ec6\u80de\u662f\u5426\u8868\u8fbe\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u672c\u8eab\u662f\u6253\u95ee\u53f7\u7684\u3002\u5c31\u7b97\u8868\u8fbe\u4e86\uff0c\u4ea7\u91cf\u591a\u5c11\u4e5f\u662f\u672a\u77e5\u6570\u3002
\u6240\u4ee5\u7531\u6b64\u770b\u6765\uff0c\u672a\u6765\u8fd8\u6709\u4e00\u6b21\u7b5b\u9009\u4f18\u9009\u8fc7\u7a0b\u3002\u56e0\u800c\u7b2c\u4e00\u6b21\u53ea\u9700\u5224\u5b9a\u8f7d\u4f53\u786e\u5b9e\u8fdb\u5165\u7ec6\u80de\u3002

\u9519\u5728\u6297\u751f\u7d20\u5408\u6210\u57fa\u56e0\uff0c\u5e94\u8be5\u6539\u4e3a\u6297\u751f\u7d20\u6297\u6027\u57fa\u56e0\u3002\u4e24\u8005\u76f8\u53cd\u4e86\uff0c\u4e00\u4e2a\u5408\u6210\u6297\u751f\u7d20\uff0c\u4e00\u4e2a\u5bf9 \u6297\u751f\u7d20\u4ea7\u751f\u6297\u6027\u3002
\u63a5\u4e0b\u6765\u7ed9\u4f60\u4ecb\u7ecd\u6297\u751f\u7d20\u6297\u6027\u57fa\u56e0\uff0c\u4f5c\u4e3a\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\u3002
\u4e3e\u4f8b\uff1a\u5927\u80a0\u6746\u83cc\u7684\u67d0\u79cd\u8d28\u7c92\u5177\u6709\u9752\u9709\u7d20\u6297\u6027\u57fa\u56e0\uff08\u8be5\u57fa\u56e0\u53ef\u4ee5\u8ba4\u4e3a\u662f\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\uff09\uff0c\u5f53\u8fd9\u79cd\u8d28\u7c92\u4e0e\u5916\u6e90DNA\u7ec4\u5408\u5728\u4e00\u8d77\u5f62\u6210\u91cd\u7ec4\u8d28\u7c92\uff0c\u5e76\u88ab\u8f6c\u5165\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de\u540e\uff0c\u5c31\u53ef\u4ee5\u6839\u636e\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de\u662f\u5426\u5177\u6709\u9752\u9709\u7d20\u6297\u6027\u6765\u5224\u65ad\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de\u662f\u5426\u83b7\u5f97\u4e86\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u3002\u5f53\u4eba\u4eec\u7528\u9009\u62e9\u57f9\u517b\u57fa\uff08\u6bd4\u5982\u542b\u6709\u9752\u9709\u7d20\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff09\uff0c\u6765\u57f9\u517b\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de\u65f6\uff0c\u80fd\u591f\u5728\u57f9\u517b\u57fa\u4e2d\u5b58\u6d3b\u4e0b\u6765\u7684\u53d7\u4f53\u7ec6\u80de\u5c31\u53ef\u4ee5\u8ba4\u4e3a\u662f\u6210\u529f\u7684\u5bfc\u5165\u4e86\u5916\u6e90DNA\uff0c\u6807\u8bb0\u57fa\u56e0\u5c31\u8d77\u4f5c\u7528\u4e86\u3002

首先,不是任何大肠杆菌都可以作为受体菌的,感受态细胞就是受体细胞需要选择对抗性标记敏感的菌株,就是说如果准备转化入受体菌的重组质粒用四环素做标记,受体菌本身对四环素是敏感的才行,否则就得更换菌株或者更换筛选标记。
其次,标记基因和目的基因(用你举例的四环素)是体外利用基因工程技术重组到一起的,然后转化入对四环素敏感的受体株才可以进行四环素筛选,能存活的就是阳性,不能得就是质粒没转入
当然了,看是否成功制备除了抗性标记的初步筛选还得进一步酶切电泳测序或者目的基因产物测定

起初的宿主大肠杆菌是不带有任何抗性基因的。当需要将某片段外源基因在大厂杆菌内表达,那么需要选择一个合适的表达载体,这个载体上就会含有标记基因,如四环素。然后目的片段装入载体中,转入宿主细胞。由于原先宿主细胞不含有此重组载体,也就是不含标记基因,它会在抗性(如四环素)选择培养基的筛选作用下不生长;而转入了重组质粒的宿主细胞会带有这种标记基因(或者说成抗性基因),在含有抗生素的培养基里仍能成长。

大肠杆菌细胞中是有质粒,当然有抗性基因。我们用的运载体不一定非用大肠杆菌的质粒,可以用噬菌体,动植物病毒,其他细菌的质粒(书上有),不同微生物的质粒上的抗性基因是不同的。在抗生素培养基上检测是否导入目的基因,就注意选择抗生素不与大肠杆菌里的抗性基因冲突就行了。

1. 受体细胞也就是感受态细胞不含质粒,也没有任何抗性;
2. 未转入质粒的受体细胞被四环素抑制,不能生长;
3. 转入抗四环素基因质粒的受体细胞能抗四环素,就生长成菌落。

用于基因操作的大肠杆菌菌株不含有任何抗生素抗性
未转染情况下不存在 amp kan 或ter抗性

  • 鏈夊叧鏍囪鍩哄洜鍜屽彈浣撶粏鑳炵殑绛涢夌殑闂
    绛旓細棣栧厛锛屼笉鏄换浣曞ぇ鑲犳潌鑿岄兘鍙互浣滀负鍙椾綋鑿岀殑锛屾劅鍙楁佺粏鑳炲氨鏄鍙椾綋缁嗚優闇瑕侀夋嫨瀵规姉鎬ф爣璁版晱鎰熺殑鑿屾牚锛屽氨鏄濡傛灉鍑嗗杞寲鍏ュ彈浣撹弻鐨勯噸缁勮川绮掔敤鍥涚幆绱犲仛鏍囪锛屽彈浣撹弻鏈韩瀵瑰洓鐜礌鏄晱鎰熺殑鎵嶈锛屽惁鍒欏氨寰楁洿鎹㈣弻鏍垨鑰呮洿鎹绛涢夋爣璁銆傚叾娆★紝鏍囪鍩哄洜鍜鐩殑鍩哄洜锛堢敤浣犱妇渚嬬殑鍥涚幆绱狅級鏄綋澶栧埄鐢ㄥ熀鍥犲伐绋嬫妧鏈噸缁勫埌涓璧...
  • 濡備綍鎶婂鍏ヤ簡鐩殑鍩哄洜鐨勫彈浣撶粏鑳炵瓫閫鍑烘潵?
    绛旓細瀵煎叆鏃剁敤鐨勮繍杞戒綋涓婂鏋滄湁鎶楁鍩哄洜锛堟爣璁板熀鍥狅級锛屽氨鍙互閫氳繃妫娴嬫姉鎬у熀鍥犵殑琛ㄨ揪鏉ユ娴嬶紝姣斿杩愯浇浣揚BR322 灏卞甫鏈夋姉鍥涚幆绱犲熀鍥犲拰鎶楁皑鍗為潚闇夌礌鍩哄洜 瑕佷箞灏辩瓑鐩殑鍩哄洜鍦鍙椾綋缁嗚優涓〃杈句互鍚庯紝鐒跺悗鏍规嵁鐗瑰畾鐨勬х姸鏉ュ尯鍒
  • 濡備綍鐢鏍囪鍩哄洜绛涢鍚湁鐩殑鍩哄洜鐨勭粏鑳
    绛旓細灏鍙椾綋缁嗚優鍩瑰吇鍦ㄥ煿鍏诲熀涓紝鍚庣敤甯冭鐩栧啀涓婏紝杞诲帇锛屼娇缁嗚優闄勭潃鍦ㄥ竷涓婏紝灏嗗竷鏀惧埌鍚湁鏍囪鍩哄洜鐨勫煿鍏诲熀涓紝濡傛灉涓嶈兘鐢熼暱锛岄偅涔堝畠灏辨槸鍚湁鐩殑鍩哄洜銆傚墠鎻愭槸锛屽惈鏈夌洰鐨勫熀鍥犵殑璐ㄧ矑涓嶅惈鏈夋爣璁板熀鍥
  • 閲嶇粍缁嗚優瀵煎叆鍙椾綋缁嗚優鍚,绛涢鍚湁鍩哄洜琛ㄨ揪杞戒綋鍙椾綋缁嗚優鐨渚濇嵁鏄...
    绛旓細3.閲嶇粍缁嗚優瀵煎叆鍙椾綋缁嗚優鍚,绛涢鍚湁鍩哄洜琛ㄨ揪杞戒綋鍙椾綋缁嗚優鐨勪緷鎹槸鏍囪鍩哄洜鏄惁琛ㄨ揪銆傜鍥涙:鐩殑鍩哄洜鐨勬娴嬪拰琛ㄨ揪
  • 璇烽棶 鏍囧織鍩哄洜涓轰粈涔堣兘绛涢鐩殑鍩哄洜宸叉敞鍏鍙椾綋缁嗚優鐨缁嗚優,杩囩▼鏄庢牱鐨...
    绛旓細鏍囧織鍩哄洜涓鑸槸鏌愮鑽墿鐨勬姉鎬у熀鍥狅紝濡傛姉闈掗湁绱犲熀鍥犵瓑銆绛涢鏃跺悜鍩瑰吇鍩哄唴鍔犲叆璇ユ姉鎬у熀鍥犳姉鐨勭墿璐紝鍒欑洰鐨勫熀鍥犲凡娉ㄥ叆鍙椾綋缁嗚優鐨勭粏鑳炶〃杈捐鎶楁у熀鍥狅紝涓嶄細姝讳骸锛岃屼负娉ㄥ叆鍩哄洜鐨勭粏鑳炲垯鍥犱负鑽墿鑰屾銆
  • ...涓轰粈涔堥氳繃鏍囪鍩哄洜鍙互绛涢鏈夌洰鐨勫熀鍥鐨勫彈浣撶粏鑳
    绛旓細鎮ㄥ彲浠ヨ繖涔堢悊瑙o細濡傛灉涓涓缁嗚優涓嶈〃杈鏍囪鍩哄洜锛岄偅涔堝氨璇佹槑杞戒綋鏍规湰灏辨病杩涘叆缁嗚優 鎵浠ユ嫢鏈夋爣璁板熀鍥犳槸鎷ユ湁鐩殑鍩哄洜鐨勫繀瑕佷笉鍏呭垎鏉′欢 鏁呰屽彲浠ョ洿鎺ユ窐姹颁竴鎵圭粏鑳 鍚湁鐩殑鍩哄洜鐨勮浇浣撹繘鍏ョ粏鑳烇紝璇ョ粏鑳炴槸鍚﹁〃杈剧洰鐨勫熀鍥犳湰韬槸鎵撻棶鍙风殑銆傚氨绠楄〃杈句簡锛屼骇閲忓灏戜篃鏄湭鐭ユ暟銆傛墍浠ョ敱姝ょ湅鏉ワ紝鏈潵杩樻湁涓娆绛涢浼橀夎繃绋嬨傚洜鑰岀...
  • 濡備綍绛涢鍑哄惈鏈夌洰鐨鍩哄洜鐨勫彈浣撶粏鑳,涓
    绛旓細鍒╃敤鍩哄洜琛ㄨ揪杞戒綋涓婄殑鏍囪鍩哄洜绛涢锛氫緥濡傦細鏍囪鍩哄洜鏄洓鐜礌鎶楁у熀鍥狅紝灏辩敤鍚湁鍥涚幆绱犵殑鍩瑰吇鍩哄煿鍏绘椿缁嗚優锛屽鏋滅粏鑳炴椿鐫锛岃瘉鏄庡熀鍥犺〃杈捐浇浣撳凡缁忚繘鍏ャ備笉瀛樻椿锛岃〃鏄庢病鏈夎繘鍏鍙椾綋缁嗚優銆
  • ...绛鏍囪鍩哄洜閫氬父浼氱敤浜庡惈鏈夌洰鐨勫熀鍥鍙椾綋缁嗚優鐨勭瓫閫銆傝繖鍙ヨ瘽涓轰粈涔堥敊...
    绛旓細鎺ヤ笅鏉ョ粰浣犱粙缁嶆姉鐢熺礌鎶楁у熀鍥狅紝浣滀负鏍囪鍩哄洜銆備妇渚嬶細澶ц偁鏉嗚弻鐨勬煇绉嶈川绮掑叿鏈夐潚闇夌礌鎶楁у熀鍥狅紙璇ュ熀鍥犲彲浠ヨ涓烘槸鏍囪鍩哄洜锛夛紝褰撹繖绉嶈川绮掍笌澶栨簮DNA缁勫悎鍦ㄤ竴璧峰舰鎴愰噸缁勮川绮掞紝骞惰杞叆鍙椾綋缁嗚優鍚庯紝灏卞彲浠ユ牴鎹彈浣撶粏鑳炴槸鍚﹀叿鏈夐潚闇夌礌鎶楁ф潵鍒ゆ柇鍙椾綋缁嗚優鏄惁鑾峰緱浜嗙洰鐨勫熀鍥犮傚綋浜轰滑鐢ㄩ夋嫨鍩瑰吇鍩猴紙姣斿鍚湁闈掗湁绱犵殑鍩瑰吇鍩猴級...
  • ...涓嬪垪鍏充簬绛涢夌殑鍙欒堪涓纭殑鏈夊嚑椤( )鈶犻噸缁勮川绮掍笂鐨鏍囪鍩哄洜...
    绛旓細鈶犻噸缁勮川绮掍笂鐨鏍囪鍩哄洜鐨浣滅敤鏄壌鍒鍙椾綋缁嗚優涓槸鍚﹀惈鏈夌洰鐨勫熀鍥狅紝浣嗗惈鏈夋爣璁板熀鍥犵殑缁嗚優鍙兘瀵煎叆浜嗛噸缁勮川绮掞紝涔熷彲鑳藉鍏ヤ簡鏅氳川绮掞紝鏁呪憼閿欒锛涒憽鍗曞厠闅嗘姉浣撳埗澶囩殑杩囩▼涓紝鍦ㄥ畬鎴愮粏鑳炶瀺鍚堝悗锛岀涓娆绛涢鍑虹殑鏄潅浜ょ槫缁嗚優锛屽幓闄ゆ湭铻嶅悎鐨勭粏鑳炲拰鑷韩铻嶅悎鐨勭粏鑳烇紝鏁呪憽姝g‘锛涒憿鍗曞厠闅嗘姉浣撳埗澶囪繃绋嬩腑锛屽湪瀹屾垚缁嗚優...
  • 鏍囪鍩哄洜鐨浣滅敤鏄娴嬬洰鐨勫熀鍥犳槸鍚﹀鍏鍙椾綋缁嗚優杩樻槸渚夸簬閲嶇粍DNA鍒嗗瓙鐨...
    绛旓細褰撻噸缁凞NA鍒嗗瓙鎼哄甫鐩殑鍩哄洜鍜屾爣璁板熀鍥杩涘叆鍙椾綋缁嗚優鍚庯紝鍙湁閭d簺鎴愬姛鎺ョ撼骞舵暣鍚堟柊DNA鐨勭粏鑳烇紝鎵嶈兘婵娲鏍囪鍩哄洜鐨鎶楁ф爣璁帮紝浠庤屽鐗瑰畾鎶楃敓绱犱骇鐢熸姷鎶楀姏銆傚姝や竴鏉ワ紝鎶楃敓绱绛涢灏卞儚涓鍦虹簿鍑嗙殑杩囨护娓告垙锛岀瓫閫夊嚭閭d簺鐪熸鎺ョ撼浜嗙洰鐨勫熀鍥犵殑骞歌繍鍎裤傚煎緱寮鸿皟鐨勬槸锛屾爣璁板熀鍥犵殑鍙岄噸鍔熻兘骞堕潪瀛ょ珛锛屽畠浠彲浠ユ牴鎹疄楠岃璁″拰鐮旂┒...
  • 扩展阅读:十大基因检测公司排名 ... 标记基因鉴定和筛选 ... 标记基因的筛选原理 ... 怎么利用标记基因筛选 ... 如何利用标记基因进行筛选 ... 标记基因的作用高中 ... 基因检测不要随便做 ... 质粒标记基因如何筛选 ... 标记基因如何筛选目的基因 ...

    本站交流只代表网友个人观点,与本站立场无关
    欢迎反馈与建议,请联系电邮
    2024© 车视网