微生物涂抹法 微生物涂抹怎么做
\u5fae\u751f\u7269\u5e73\u677f\u6d82\u5e03\u6ce8\u610f\u4e8b\u9879\u5fae\u751f\u7269\u5e73\u677f\u6d82\u5e03\u6ce8\u610f\u4e8b\u9879\uff1a
1\u3001\u6837\u54c1\u8981\u51c6\u786e\u79f0\u53d6\u5f85\u6d4b\u6837\u54c1l0g\uff0c\u653e\u5165\u88c5\u670990ml\u65e0\u83cc\u6c34\u5e76\u653e\u6709\u5c0f\u73bb\u7483\u73e0\u7684250ml\u4e09\u89d2\u74f6\u4e2d\uff0c\u7528\u624b\u6216\u7f6e\u6447\u5e8a\u4e0a\u632f\u836120min\uff0c\u4f7f\u5fae\u751f\u7269\u7ec6\u80de\u5206\u6563\uff0c\u9759\u7f6e20-30s\uff0c\u5373\u621010-1\u7a00\u91ca\u6db2\u3002
2\u3001\u7528\u7a00\u91ca\u5e73\u677f\u8ba1\u6570\u65f6\uff0c\u5f85\u6d4b\u83cc\u7a00\u91ca\u5ea6\u7684\u9009\u62e9\u5e94\u6839\u636e\u6837\u54c1\u786e\u5b9a\u3002\u6837\u54c1\u4e2d\u6240\u542b\u5f85\u6d4b\u83cc\u7684\u6570\u91cf\u591a\u65f6\uff0c\u7a00\u91ca\u5ea6\u5e94\u9ad8\uff0c\u53cd\u4e4b\u5219\u4f4e\u3002
3\u3001\u6d82\u62b9\u5e73\u677f\u8ba1\u6570\u6cd5\u4e0e\u6df7\u5408\u6cd5\u57fa\u672c\u76f8\u540c\uff0c\u6240\u4e0d\u540c\u7684\u662f\u5148\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u7194\u5316\u540e\u8d81\u70ed\u5012\u5165\u65e0\u83cc\u5e73\u677f\u4e2d\uff0c\u5f85\u51dd\u56fa\u540e\u7f16\u53f7\uff0c\u7136\u540e\u7528\u65e0\u83cc\u5438\u7ba1\u5438\u53d60.1ml\u83cc\u6db2\u5bf9\u53f7\u63a5\u79cd\u5728\u4e0d\u540c\u7a00\u91ca\u5ea6\u7f16\u53f7\u7684\u743c\u8102\u5e73\u677f\u4e0a\u3002
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用棉签涂抹待测物表面，后面的试验方法一样。
5 操作步骤
5.1 样品的稀释
5.1.1 固体和半固体样品： 称取 25 g 样品至盛有 225 mL 灭菌蒸馏水的锥形瓶中， 充分振摇， 即为 1:10
稀释液。或放入盛有 225 mL 无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击式均质器拍打 2min，制成 1:10 的样品匀
液。
5.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取 25 mL 样品至盛有 225 mL 无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适
当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成 1:10 的样品匀液。
5.1.3 取1 mL 1:10稀释液注入含有9 mL无菌水的试管中, 另换一支1 mL无菌吸管反复吹吸,此液为
1:100 稀释液。
5.1.4 按 5.1.3 操作程序，制备 10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用 1次 1 mL 无菌吸管。
5.1.5 根据对样品污染状况的估计，选择 2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），
在进行 10 倍递增稀释的同时， 每个稀释度分别吸取 1 mL 样品匀液于 2 个无菌平皿内。 同时分别取 1 mL
样品稀释液加入 2 个无菌平皿作空白对照。
5.1.6 及时将 15 mL～20 mL 冷却至 46 ℃的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于
46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
5.2 培养
待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养 5d，观察并记录。
5.3 菌落计数
肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（colony
forming units，CFU）表示。
选取菌落数在 10 CFU～150 CFU的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆
盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。
6 结果与报告
6.1 计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。
6.1.2 若所有平板上菌落数均大于 150 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多
不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
6.1.3 若所有平板上菌落数均小于 10 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
6.1.4 若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于 1 乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于 1
计数。
6.2 报告
6.2.1 菌落数在 100 以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。
6.2.2 菌落数大于或等于 100 时，前 3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前 2 位数字，后面用
0 代替位数来表示结果；也可用 10 的指数形式来表示，此时也按“四舍五入”原则修约，采用两位有效
数字。
6.2.3 称重取样以 CFU/g 为单位报告，体积取样以 CFU/mL 为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或
酵母数。
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