分子生物学常用的试剂有哪些 分子生物学实验包括哪些实验呢?试验中常用的试剂盒有哪些?常用...

\u5206\u5b50\u751f\u7269\u5b66\u8bd5\u5242\u6709\u54ea\u4e9b

\u5e38\u7528\u8d2e\u6db2\u4e0e\u6eb6\u6db2
1mol/L\u4e9a\u7cbe\u80fa\uff08Spermidine\uff09: \u6eb6\u89e32.55g\u4e9a\u7cbe\u80fa\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u4f7f\u7ec8\u4f53\u79ef\u4e3a10ml\u3002\u5206\u88c5\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
1mol/L\u7cbe\u80fa\uff08Spermine\uff09\uff1a\u6eb6\u89e33.48g\u7cbe\u80fa\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u4f7f\u7ec8\u4f53\u79ef\u4e3a10ml\u3002\u5206\u88c5\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
10mol/L\u4e59\u9178\u80fa\uff08ammonium acetate\uff09\uff1a\u5c0677.1g\u4e59\u9178\u80fa\u6eb6\u89e3\u4e8e\u6c34\u4e2d\uff0c\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u81f31L\u540e\uff0c\u75280.22um\u5b54\u5f84\u7684\u6ee4\u819c\u8fc7\u6ee4\u9664\u83cc\u3002
10mg/ml\u725b\u8840\u6e05\u86cb\u767d(BSA\uff09\uff1a\u52a0100mg\u7684\u725b\u8840\u6e05\u86cb\u767d\uff08\u7ec4\u5206V\u6216\u5206\u5b50\u751f\u7269\u5b66\u8bd5\u5242\u7ea7\uff0c\u65e0DNA\u9176\uff09\u4e8e9.5ml\u6c34\u4e2d\uff08\u4e3a\u51cf\u5c11\u53d8\u6027\uff0c \u987b\u5c06\u86cb\u767d\u52a0\u5165\u6c34\u4e2d\uff0c\u800c\u4e0d\u662f\u5c06\u6c34\u52a0\u5165\u86cb\u767d\uff09\uff0c\u76d6\u597d\u76d6\u540e\uff0c\u8f7b\u8f7b\u6447\u52a8\uff0c\u76f4\u81f3\u725b\u8840\u6e05\u86cb\u767d\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u4e3a\u6b62\u3002\u4e0d\u8981\u6da1\u65cb\u6df7\u5408\u3002\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u523010ml\uff0c\u7136\u540e\u5206\u88c5\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
1mol/L\u4e8c\u786b\u82cf\u7cd6\u9187\uff08DTT\uff09\uff1a\u5728\u4e8c\u786b\u82cf\u7cd6\u91875g\u7684\u539f\u88c5\u74f6\u4e2d\u52a032.4ml\u6c34\uff0c\u5206\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002\u6216\u8f6c\u79fb100mg\u7684\u4e8c\u786b\u82cf\u7cd6\u9187 \u81f3\u5fae\u91cf\u79bb\u5fc3\u7ba1\uff0c\u52a00.65ml\u7684\u6c34\u914d\u5236\u62101mol/L\u4e8c\u786b\u82cf\u7cd6\u9187\u6eb6\u6db2\u3002
8mol/L\u4e59\u9178\u94be\uff08potassium acetate\uff09\uff1a\u6eb6\u89e378.5g\u4e59\u9178\u94be\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u5230100ml\u3002
1mol/L\u6c2f\u5316\u94be\uff08KCl\uff09\uff1a\u6eb6\u89e37.46g\u6c2f\u5316\u94be\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u5230100ml\u3002
3mol/L\u4e59\u9178\u94a0\uff08sodium acetate\uff09\uff1a\u6eb6\u89e340.8g\u7684\u4e09\u6c34\u4e59\u9178\u94a0\u4e8e\u7ea690ml\u6c34\u4e2d\uff0c\u7528\u51b0\u4e59\u9178\u8c03\u6eb6\u6db2\u7684pH\u81f35.2\uff0c\u518d\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u5230100ml\u3002
0.5mol/L EDTA:\u914d\u5236\u7b49\u6469\u5c14\u7684Na2EDTA\u548cNaOH\u6eb6\u6db2\uff080.5mol/L\uff09\uff0c\u6df7\u5408\u540e\u5f62\u6210EDTA\u7684\u4e09\u94a0\u76d0\u3002\u6216\u79f0\u53d6186.1g\u7684Na2EDTA•2H2O\u548c20g\u7684NaOH\uff0c\u5e76\u6eb6\u4e8e\u6c34\u4e2d\uff0c\u5b9a\u5bb9\u81f31L\u3002
1mol/L HEPES\uff1a\u5c0623.8gHEPES\u6eb6\u4e8e\u7ea690ml\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u7528NaOH\u8c03pH\uff086.8-8.2\uff09\uff0c\u7136\u540e\u7528\u6c34\u5b9a\u5bb9\u81f3100ml\u3002
1mol/L HCl\uff1a\u52a08.6ml\u7684\u6d53\u76d0\u9178\u81f391.4ml\u7684\u6c34\u4e2d\u3002
25mg/ml IPGT\uff1a\u6eb6\u89e3250mg\u7684IPGT\uff08\u5f02\u4e19\u57fa\u786b\u4ee3-\u03b2-D-\u534a\u4e73\u7cd6\u82f7\uff09\u4e8e10ml\u6c34\u4e2d\uff0c\u5206\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
1mol/LMgCl2:\u6eb6\u89e320.3g MgCl2•6H2O\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u5b9a\u5bb9\u5230100ml\u3002
100mmol/L PMSF\uff1a\u6eb6\u89e3174mg\u7684PMSF\uff08\u82ef\u7532\u57fa\u78fa\u9170\u6c1f\uff09\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u5f02\u4e19\u9187\u4e2d\uff0c\u5b9a\u5bb9\u523010ml\u3002\u5206\u6210\u5c0f\u4efd\u5e76\u7528\u94dd\u7b94\u5c06\u88c5\u6db2\u7ba1\u5305\u88f9 \u6216\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
20mg/ml\u86cb\u767d\u9176K\uff08proteinase K\uff09\uff1a\u5c06200mg\u7684\u86cb\u767d\u9176L\u52a0\u5165\u52309.5ml\u6c34\u4e2d\uff0c\u8f7b\u8f7b\u6447\u52a8\uff0c\u76f4\u81f3\u86cb\u767d\u9176K\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u3002\u4e0d\u8981\u6da1\u65cb\u6df7\u5408\u3002\u52a0\u6c34\u5b9a\u5bb9\u523010ml\uff0c\u7136\u540e\u5206\u88c5\u6210\u5c0f\u4efd\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002
10mg/mlRnase\uff08\u65e0DNase\uff09\uff08DNase\uff0dfree RNase\uff09\uff1a\u6eb6\u89e310mg\u7684\u80f0\u86cb\u767dRNA\u9176\u4e8e1ml\u768410mmol/L\u7684\u4e59\u9178\u94a0\u6c34\u6eb6\u6db2\u4e2d\uff08pH 5.0\uff09\u3002\u6eb6\u89e3\u540e\u4e8e\u6c34\u6d74\u4e2d\u716e\u6cb815min\uff0c\u4f7fDNA\u9176\u5931\u6d3b\u3002\u75281mol/L\u7684Tris\uff0dHCl\u8c03pH\u81f37.5\uff0c\u4e8e-20\u2103\u8d2e\u5b58\u3002\uff08\u914d\u5236\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u8981\u6234\u624b\u5957\uff09
5mol/L\u6c2f\u5316\u94a0\uff08NaCl\uff09\uff1a\u6eb6\u89e329.2g\u6c2f\u5316\u94a0\u4e8e\u8db3\u91cf\u7684\u6c34\u4e2d\uff0c\u5b9a\u5bb9\u81f3100ml\u3002
10N\u6c22\u6c27\u5316\u94a0\uff08NaOH\uff09\uff1a\u6eb6\u89e3400g\u6c22\u6c27\u5316\u94a0\u9897\u7c92\u4e8e\u7ea60.9L\u6c34\u7684\u70e7\u676f\u4e2d\uff08\u78c1\u529b\u6405\u62cc\u5668\u6405\u62cc\uff09\uff0c\u6c22\u6c27\u5316\u94a0\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u540e\u7528\u6c34\u5b9a\u5bb9\u81f31L\u3002
10\uff05SDS\uff08\u5341\u4e8c\u70f7\u57fa\u786b\u9178\u94a0\uff09\uff1a\u79f0\u53d6100gSDS\u6162\u6162\u8f6c\u79fb\u5230\u7ea6\u542b0.9L\u7684\u6c34\u7684\u70e7\u676f\u4e2d\uff0c\u7528\u78c1\u529b\u6405\u62cc\u5668\u6405\u62cc\u76f4\u81f3\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u3002\u7528\u6c34\u5b9a\u5bb9\u81f31L\u3002
2mol/L\u5c71\u68a8\uff08\u7cd6\uff09\u9187\uff08Sorbitol\uff09\uff1a\u6eb6\u89e336.4g\u5c71\u68a8\uff08\u7cd6\uff09\u9187\u4e8e\u8db3\u91cf\u6c34\u4e2d\u4f7f\u7ec8\u4f53\u79ef\u4e3a100ml\u3002
100\uff05\u4e09\u6c2f\u4e59\u9178\uff08TCA\uff09:\u5728\u88c5\u6709500gTCA\u7684\u8bd5\u5242\u74f6\u4e2d\u52a0\u5165100ml\u6c34\uff0c\u7528\u78c1\u529b\u6405\u62cc\u5668\u6405\u62cc\u76f4\u81f3\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u3002\uff08\u7a00\u91ca\u6db2\u5e94\u5728\u4e34\u7528\u524d\u914d\u5236\uff09
2.5\uff05 X\uff0dgal\uff085-\u6eb4-4-\u6c2f-3-\u5432\u54da\uff0d\u03b2-\u534a\u4e73\u7cd6\u82f7\uff09\uff1a\u6eb6\u89e325mg\u7684X\uff0dgal\u4e8e1ml\u7684\u4e8c\u7532\u57fa\u7532\u9170\u80fa\uff08DMF\uff09,\u7528\u94dd\u7b94\u5305\u88f9\u88c5\u6db2\u7ba1\uff0c\u8d2e\u5b58\u4e8e-20\u2103\u3002

\u5404\u4e2a\u5b66\u6821\u7528\u7684\u4e66\u4e0d\u4e00\u6837\uff0c\u6211\u4eec\u662f\u8001\u5e08\u81ea\u5df1\u6574\u7406\u7684\uff0c\u6709\u300a\u57fa\u56e0\u7ec4\u63d0\u53d6\u300b\u300aDNA\u7535\u6cf3\u5206\u6790\u300b\u300a\u76ee\u7684\u57fa\u56e0\u7684\u514b\u9686\u300b\u300a\u8d28\u7c92\u7684\u63d0\u53d6\u300b\u300aPCR\u6269\u589e\u548c\u4ea7\u7269\u68c0\u6d4b\u300b

分子生物学实验常用试剂配置

100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)

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