请告诉我MHA培养基的具体制作步骤(不是配方),万分感谢 配制培养基的步骤?

\u4f60\u597d\uff0c\u6073\u6c42NB\u57f9\u517b\u57fa\u548cCAS\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9~\u8c22\u8c22\u554a\uff01\u5b9e\u9a8c\u6025\u7528\uff01\u4e07\u5206\u611f\u8c22~~~

\u73b0\u5728\u6709\u56fa\u4f53\u7c89\u672b\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u9500\u552e\uff0c\u76f4\u63a5\u8d2d\u4e70\u5c31\u53ef\u4ee5\u4e86\u3002

1\u3001\u914d\u5236\u6eb6\u6db2
\u5411\u5bb9\u5668\u5185\u52a0\u5165\u6240\u9700\u6c34\u91cf\u7684\u4e00\u90e8\u5206\uff0c\u6309\u7167\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u914d\u65b9\uff0c\u79f0\u53d6\u5404\u79cd\u539f\u6599\uff0c\u4f9d\u6b21\u52a0\u5165\u4f7f\u5176\u6eb6\u89e3\uff0c\u6700\u540e\u8865\u8db3\u6240\u9700\u6c34\u5206\u3002\u5bf9\u86cb\u767d\u80e8\u3001\u8089\u818f\u7b49\u7269\u8d28\uff0c\u9700\u52a0\u70ed\u6eb6\u89e3\uff0c\u52a0\u70ed\u8fc7\u7a0b\u6240\u84b8\u53d1\u7684\u6c34\u5206\uff0c\u5e94\u5728\u5168\u90e8\u539f\u6599\u6eb6\u89e3\u540e\u52a0\u6c34\u8865\u8db3\u3002
\u914d\u5236\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u5148\u5c06\u4e0a\u8ff0\u5df2\u914d\u597d\u7684\u6db2\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u716e\u6cb8\uff0c\u518d\u5c06\u79f0\u597d\u7684\u743c\u8102\u52a0\u5165\uff0c\u7ee7\u7eed\u52a0\u70ed\u81f3\u5b8c\u5168\u878d\u5316\u3002\u5e76\u4e0d\u65ad\u6405\u62cc\uff0c\u4ee5\u514d\u743c\u8102\u7cca\u5e95\u70e7\u7126\u3002
2\u3001\u8c03\u8282pH\u503c 
\u7528pH\u8bd5\u7eb8\uff08\u6216pH\u7535\u4f4d\u8ba1\u3001\u6c22\u79bb\u5b50\u6d53\u5ea6\u6bd4\u8272\u8ba1\uff09\u6d4b\u8bd5\u57f9\u517b\u57fa\u7684pH\u503c\uff0c\u5982\u4e0d\u7b26\u5408\u9700\u8981\uff0c\u53ef\u752810%HCl\u621610%NaOH\u8fdb\u884c\u8c03\u8282\uff0c\u76f4\u5230\u8c03\u8282\u5230\u914d\u65b9\u8981\u6c42\u7684pH\u503c\u4e3a\u6b62\u3002
3\u3001\u8fc7\u6ee4
\u7528\u6ee4\u7eb8\u3001\u7eb1\u5e03\u6216\u68c9\u82b1\u8d81\u70ed\u5c06\u5df2\u914d\u597d\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u8fc7\u6ee4\u3002\u7528\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u6700\u597d\u6298\u53e0\u6210\u516d\u5c42\uff0c\u7528\u6ee4\u7eb8\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u53ef\u5c06\u6ee4\u7eb8\u6298\u53e0\u6210\u74e6\u68f1\u5f62\uff0c\u94fa\u5728\u6f0f\u6597\u4e0a\u8fc7\u6ee4\u3002
4\u3001\u5206\u88c5
\u5df2\u8fc7\u6ee4\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u5e94\u8fdb\u884c\u5206\u88c5\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u4e2d\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u6216\u6db2\u4f53\u3001\u534a\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u5219\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u9525\u5f62\u74f6\u5185\u3002
\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u4e00\u624b\u634f\u677e\u5f39\u7c27\u5939\uff0c\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u6d41\u51fa\uff0c\u53e6\u4e00\u53ea\u624b\u63e1\u4f4f\u51e0\u652f\u8bd5\u7ba1\u6216\u9525\u5f62\u74f6\uff0c\u4f9d\u6b21\u63a5\u53d6\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u6ce8\u610f\u4e0d\u8981\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u7c98\u9644\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\uff0c\u4ee5\u514d\u6d78\u6e7f\u68c9\u585e\u5f15\u8d77\u6742\u83cc\u6c61\u67d3\u3002
\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u91cf\uff0c\u89c6\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u7684\u5927\u5c0f\u53ca\u9700\u8981\u800c\u5b9a\u3002\u4e00\u822c\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u6bcf\u53ea15\u00d7150\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\uff0c\u7ea6\u88c53\uff5e4\u6beb\u5347\uff081/4\uff5e1/3\u8bd5\u7ba1\u9ad8\u5ea6\uff09\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u6df1\u5c42\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u6bcf\u53ea20\u00d7220\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\u7ea6\u88c512\uff5e15\u6beb\u5347\u3002\u6bcf\u53ea\u9525\u5f62\u74f6\u88c5\u5165\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u4e00\u822c\u4ee5\u5176\u5bb9\u79ef\u7684\u4e00\u534a\u4e3a\u5b9c\u3002
5\u3001\u52a0\u68c9\u585e 
\u5206\u88c5\u5b8c\u6bd5\u540e\uff0c\u9700\u8981\u7528\u68c9\u585e\u5835\u4f4f\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u3002\u5835\u68c9\u585e\u7684\u4e3b\u8981\u76ee\u7684\u662f\u8fc7\u6ee4\u7a7a\u6c14\uff0c\u907f\u514d\u6c61\u67d3\u3002\u68c9\u585e\u5e94\u91c7\u7528\u666e\u901a\u65b0\u9c9c\u3001\u5e72\u71e5\u7684\u68c9\u82b1\u5236\u4f5c\uff0c\u4e0d\u8981\u7528\u8131\u8102\u68c9\uff0c\u4ee5\u514d\u56e0\u8131\u8102\u68c9\u5438\u6c34\u4f7f\u68c9\u585e\u65e0\u6cd5\u4f7f\u7528\u3002
\u5236\u4f5c\u68c9\u585e\u65f6\uff0c\u8981\u6839\u636e\u68c9\u585e\u5927\u5c0f\u5c06\u68c9\u82b1\u94fa\u5c55\u6210\u9002\u5f53\u539a\u5ea6\uff0c\u63ea\u53d6\u624b\u638c\u5fc3\u5927\u5c0f\u4e00\u5757\uff0c\u94fa\u5728\u5de6\u624b\u62c7\u6307\u4e0e\u98df\u6307\u5708\u6210\u7684\u5706\u5b54\u4e2d\uff0c\u7528\u53f3\u624b\u98df\u6307\u63d2\u5165\u68c9\u82b1\u4e2d\u90e8\uff0c\u540c\u65f6\u5de6\u624b\u98df\u6307\u4e0e\u59c6\u6307\u7a0d\u7a0d\u7d27\u63e1\uff0c\u5c31\u4f1a\u5f62\u62101\u4e2a\u957f\u68d2\u5f62\u7684\u68c9\u585e\u3002
\u68c9\u585e\u4f5c\u6210\u540e\uff0c\u5e94\u8fc5\u901f\u585e\u5165\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u4e2d\uff0c\u68c9\u585e\u5e94\u7d27\u8d34\u5185\u58c1\u4e0d\u7559\u7f1d\u9699\uff0c\u4ee5\u9632\u7a7a\u6c14\u4e2d\u5fae\u751f\u7269\u6cbf\u76b1\u6298\u4fb5\u5165\u3002\u68c9\u585e\u4e0d\u8981\u8fc7\u7d27\u8fc7\u677e\uff0c\u585e\u597d\u540e\uff0c\u4ee5\u624b\u63d0\u68c9\u585e\u3001\u7ba1\u3001\u74f6\u4e0d\u4e0b\u843d\u4e3a\u5408\u9002\u3002\u68c9\u585e\u76842/3\u5e94\u5728\u7ba1\u5185\u6216\u74f6\u5185\uff0c\u4e0a\u7aef\u9732\u51fa\u5c11\u8bb8\u68c9\u82b1\u4fbf\u4e8e\u62d4\u53d6\u3002\u585e\u597d\u68c9\u585e\u7684\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u5e94\u76d6\u4e0a\u539a\u7eb8\u7528\u7ef3\u6346\u672d\uff0c\u51c6\u5907\u706d\u83cc\u3002
6\u3001\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa
\u57f9\u517b\u57fa\u706d\u83cc\u540e\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u8d81\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u51dd\u56fa\u65f6\u8fdb\u884c\u3002

(1)\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\u653e1\u652f\u957f0.5\uff5e1\u7c73\u5de6\u53f3\u7684\u6728\u6761\uff0c\u539a\u5ea6\u4e3a1\u5398\u7c73\u5de6\u53f3\u3002\u5c06\u8bd5\u7ba1\u5934\u90e8\u6795\u5728\u6728\u6761\u4e0a\uff0c\u4f7f\u7ba1\u5185\u57f9\u517b\u57fa\u81ea\u7136\u503e\u659c\uff0c\u51dd\u56fa\u540e\u5373\u6210\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002
(2)\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5c06\u521a\u521a\u706d\u8fc7\u83cc\u7684\u76db\u6709\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u9525\u5f62\u74f6\u548c\u57f9\u517b\u76bf\u653e\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\uff0c\u70b9\u71c3\u9152\u7cbe\u706f\uff0c\u53f3\u624b\u6258\u8d77\u9525\u5f62\u74f6\u74f6\u5e95\uff0c\u5de6\u624b\u62d4\u4e0b\u68c9\u585e\uff0c\u5c06\u74f6\u53e3\u5728\u9152\u7cbe\u706f\u4e0a\u7a0d\u52a0\u707c\u70e7\uff0c\u5de6\u624b\u6253\u5f00\u57f9\u517b\u76bf\u76d6\uff0c\u53f3\u624b\u8fc5\u901f\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5012\u5165\u57f9\u517b\u76bf\u4e2d\uff0c\u6bcf\u76bf\u7ea6\u5012\u516510\u6beb\u5347\uff0c\u4ee5\u94fa\u6ee1\u76bf\u5e95\u4e3a\u5ea6\u3002
\u94fa\u653e\u57f9\u517b\u57fa\u540e\u653e\u7f6e15\u5206\u949f\u5de6\u53f3\uff0c\u5f85\u57f9\u517b\u57fa\u51dd\u56fa\u540e\uff0c\u518d5\u4e2a\u57f9\u517b\u76bf\u4e00\u53e0\uff0c\u5012\u7f6e\u8fc7\u6765\uff0c\u5e73\u653e\u5728\u6052\u6e29\u7bb1\u91cc\uff0c24\u5c0f\u65f6\u540e\u68c0\u67e5\uff0c\u5982\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u957f\u6742\u83cc\uff0c\u5373\u53ef\u7528\u6765\u57f9\u517b\u5fae\u751f\u7269\u3002
\u53c2\u8003\u8d44\u6599\u6765\u6e90\uff1a\u767e\u5ea6\u767e\u79d1\u2014\u57f9\u517b\u57fa

配制具体步骤
1.称量
  按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化
  在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。
3.调pH
  在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。反之,则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
4.过滤
  趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
5.分装
  按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ-1。
  分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
  (1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
  (2)固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
  (3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
6.加塞
  培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能。
7.包扎
  加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8.灭菌
  将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
9.搁置斜面
  将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10.无菌检查
  将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。
简要步骤
  在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌:1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。
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