【急】配缓冲溶液时最基本的问题！！！ 用除盐水配制缓冲溶液后为什么含有硬度？（是氨水的问题吗？）急...
\u914d\u5236\u7f13\u51b2\u6eb6\u6db2\u65f6\uff0c\u5e94\u9075\u5faa\u54ea\u4e9b\u539f\u52191\u3001\u7f13\u51b2\u6db2\u7684pH\u503c\u4e0e\u8be5\u9178\u7684\u7535\u79bb\u5e73\u8861\u5e38\u6570K\u53ca\u76d0\u548c\u9178\u7684\u6d53\u5ea6\u6709\u5173\u3002\u5f31\u9178\u4e00\u5b9a\uff0c\u4f46\u9178\u548c\u76d0\u7684\u6bd4\u4f8b\u4e0d\u540c\u65f6\uff0c\u53ef\u4ee5\u5f97\u5230\u4e0d\u540c\u7684pH\u503c\u3002\u5f53\u9178\u548c\u76d0\u6d53\u5ea6\u76f8\u7b49\u65f6\uff0c\u6eb6\u6db2\u7684pH\u503c\u4e0ePK\u503c\u76f8\u540c\u3002
2\u3001\u9178\u548c\u76d0\u6d53\u5ea6\u7b49\u6bd4\u4f8b\u4e5f\u589e\u51cf\u65f6\uff0c\u6eb6\u6db2\u7684pH\u503c\u4e0d\u53d8\u3002
3\u3001\u9178\u548c\u76d0\u6d53\u5ea6\u76f8\u7b49\u65f6\uff0c\u7f13\u51b2\u6db2\u7684\u7f13\u51b2\u6548\u7387\u4e3a\u6700\u9ad8\uff0c\u6bd4\u4f8b\u76f8\u5dee\u8d8a\u5927\uff0c\u7f13\u51b2\u6548\u7387\u8d8a\u4f4e\uff0c\u4e00\u822c\u5730\u8bf4\u7f13\u51b2\u6db2\u6709\u6548\u7f13\u51b2\u8303\u56f4\u4e3aPK\u00b11pH\u3002
\u6269\u5c55\u8d44\u6599\uff1a
\u5e38\u7528\u4f5c\u7f13\u51b2\u6eb6\u6db2\u7684\u9178\u7c7b\u7531\u5f31\u9178\u53ca\u5176\u5171\u8f6d\u9178\u76d0\u7ec4\u5408\u6210\u7684\u6eb6\u6db2\u5177\u6709\u7f13\u51b2\u4f5c\u7528\u3002\u5e38\u89c1\u7684\u7f13\u51b2\u4f53\u7cfb\u6709\uff1a
1\u3001\u5f31\u9178\u548c\u5b83\u7684\u76d0\uff08\u5982HAc---NaAc\uff09
2\u3001\u5f31\u78b1\u548c\u5b83\u7684\u76d0\uff08NH₃\u00b7H₂O---NH₄Cl\uff09
3\u3001\u591a\u5143\u5f31\u9178\u7684\u9178\u5f0f\u76d0\u53ca\u5176\u5bf9\u5e94\u7684\u6b21\u7ea7\u76d0\uff08\u5982NaH₂PO₄---Na₂HPO₄\uff09\u7684\u6c34\u6eb6\u6db2\u7ec4\u6210\u3002
\u800c\u751f\u5316\u5b9e\u9a8c\u5ba4\u5e38\u7528\u7684\u7f13\u51b2\u7cfb\u4e3b\u8981\u6709\u78f7\u9178\u3001\u67e0\u6aac\u9178\u3001\u78b3\u9178\u3001\u918b\u9178\u3001\u5df4\u6bd4\u59a5\u9178\u3001Tris\uff08\u4e09\u7f9f\u7532\u57fa\u6c28\u57fa\u7532\u70f7\uff09\u7b49\u7cfb\u7edf\uff0c\u751f\u5316\u5b9e\u9a8c\u6216\u7814\u7a76\u5de5\u4f5c\u4e2d\u8981\u614e\u91cd\u5730\u9009\u62e9\u7f13\u51b2\u4f53\u7cfb\uff0c\u56e0\u4e3a\u6709\u65f6\u5f71\u54cd\u5b9e\u9a8c\u7ed3\u679c\u7684\u56e0\u7d20\u5e76\u4e0d\u662f\u7f13\u51b2\u6db2\u7684pH\u503c\uff0c\u800c\u662f\u7f13\u51b2\u6db2\u4e2d\u7684\u67d0\u79cd\u79bb\u5b50\u3002\u5982\u787c\u9178\u76d0\u3001\u67e0\u6aac\u9178\u76d0\u3001\u78f7\u9178\u76d0\u548c\u4e09\u7f9f\u7532\u57fa\u7532\u70f7\u7b49\u7f13\u51b2\u5242\u90fd\u53ef\u80fd\u4ea7\u751f\u4e0d\u9700\u8981\u7684\u5316\u5b66\u53cd\u5e94\u3002
\u787c\u9178\u76d0\uff1a\u787c\u9178\u76d0\u4e0e\u8bb8\u591a\u5316\u5408\u7269\u5f62\u6210\u590d\u76d0\u3001\u5982\u8517\u7cd6\u3002
\u67e0\u6aac\u9178\u76d0\uff1a\u67e0\u6aac\u9178\u76d0\u79bb\u5b50\u5bb9\u6613\u4e0e\u9499\u7ed3\u5408\uff0c\u6240\u4ee5\u5b58\u5728\u6709\u9499\u79bb\u5b50\u7684\u60c5\u51b5\u4e0b\u4e0d\u80fd\u4f7f\u7528\u3002
\u78f7\u9178\u76d0\uff1a\u5728\u6709\u4e9b\u5b9e\u9a8c\uff0c\u5b83\u662f\u9176\u7684\u6291\u6b62\u5242\u6216\u751a\u81f3\u662f\u4e00\u4e2a\u4ee3\u8c22\u7269\uff0c\u91cd\u91d1\u5c5e\u6613\u4ee5\u78f7\u9178\u76d0\u7684\u5f62\u5f0f\u4ece\u6eb6\u6db2\u4e2d\u6c89\u6dc0\u51fa\u6765\u3002\u800c\u4e14\u5b83\u5728pH7.5\u4ee5\u4e0a\u65f6\u7f13\u51b2\u80fd\u529b\u5f88\u5c0f\u3002
\u53c2\u8003\u8d44\u6599\u6765\u6e90\uff1a\u767e\u5ea6\u767e\u79d1\u2014\u2014\u7f13\u51b2\u6eb6\u6db2
\u5408\u683c\u7684\u9664\u76d0\u6c34\u662f\u4e0d\u542b\u786c\u5ea6\u7684\uff0c\u81ea\u5df1\u4ed4\u7ec6\u5206\u6790\u4e0b\u4f60\u914d\u5236\u8fc7\u7a0b\uff0c\u548c\u6240\u4f7f\u7528\u7684\u836f\u54c1\u3002
根据公式C1V1=C2V2就可以算出来了，稀释的时候你要明白它们的摩尔质量是相等的1. 5ML的10×PBS+495ML水 调PH=7.4
2.10ML的10×PBS+990ML水 调PH=7.4
3. PBST中的T一般指的是Tween,至少做ELISA用的是指Tween-20
Triton(破膜剂),我裂解细胞一般用1%的TritonX-100
那样的话
5毫升的10倍的PBS+490毫升的蒸馏水+5毫升的Triton X-100=500ml，0.1MPBST
你得明白 这个浓度是按什么算的 PBS是按磷酸根来算的
用容量瓶啊
绛旓細1. 瑕佽绠缂撳啿婧舵恫锛屾偍鍙互搴旂敤C1V1=C2V2鐨勫叕寮忥紝鍏朵腑C1鍜孷1鏄垵濮嬫憾娑茬殑娴撳害鍜屼綋绉紝鑰孋2鍜孷2鏄渶缁堟憾娑茬殑娴撳害鍜屼綋绉2. 鍦ㄧ█閲婅繃绋嬩腑锛岄噸瑕佺殑鏄璁よ瘑鍒版憾璐ㄧ殑鎽╁皵璐ㄩ噺淇濇寔涓嶅彉锛岃繖鎰忓懗鐫婧惰川鐨勬婚噺鍦ㄧ█閲婂墠鍚庢槸鐩稿悓鐨勩
绛旓細鏍规嵁鍏紡C1V1=C2V2灏卞彲浠ョ畻鍑烘潵浜嗭紝绋閲鐨勬椂鍊浣犺鏄庣櫧瀹冧滑鐨勬懇灏旇川閲忔槸鐩哥瓑鐨
绛旓細鏈鍩烘湰鐨勬槸涓嶈兘涓庢墍鍙嶅簲寰楄瘯鍓傚彂鐢熷寲瀛﹀弽搴銆傚喅瀹氱紦鍐叉恫pH鍊肩殑鍥犵礌 璁剧紦鍐茬郴缁熺殑寮遍吀鐨勭數绂诲父鏁颁负K锛堝钩琛″父鏁帮級锛屽钩琛℃椂寮遍吀鐨勬祿搴︿负[閰竇锛屽急閰哥洂鐨勬祿搴︿负[鐩怾锛屽垯鐢卞急閰哥殑鐢电骞宠 寮忓彲寰椾笅寮忥細[H+] = Ka {[寮遍吀]/[鍏辫江纰盷} pH = pKa + log {[鍏辫江纰盷/[寮遍吀]} 杩欏氨鏄疕enderson-Hasselbac...
绛旓細鍦ㄩ厤鍒跺拰浣跨敤缂撳啿婧舵恫鏃惰娉ㄦ剰濡備笅闂濡備笅:閫夌敤鐨勭紦鍐茬墿璐ㄧ殑灏藉彲鑳芥帴杩戠紦鍐叉憾娑叉墍鎸囧畾鐨刾H鍊;缂撳啿瀵圭殑娴撳害涓嶈兘澶皬;鍚﹀垯缂撳啿鑳藉姏灏嗚緝寮;濡傛湁鍙兘,灏藉彲鑳戒娇缂撳啿瀵归吀(鎴栫⒈)鐨勬祿搴︿笌鐩愮殑娴撳害鐩哥瓑鎴栨帴杩;缂撳啿婧舵恫鍙兘鎶靛尽灏戦噺寮洪吀銆佸己纰辩殑浣滅敤,鍏剁紦鍐茶寖鍥翠竴鑸负pK卤1銆傚鍔(鐜)鐨勫己閰(鎴栧己纰)鐨勬祿搴︿笉...
绛旓細瀵逛簬娴撴皑姘达紝鍏舵祿搴︿负$n h^4cl/L$,杩欐剰鍛崇潃姣忓崌婧舵恫涓惈鏈$n \times 10^{-4}mol$鐨勬祿姘ㄦ按銆傚洜姝わ紝濡傛灉鎴戜滑瑕佸埗澶$1L$($1000mL$)鐨缂撳啿婧舵恫锛屾垜浠渶瑕$\frac{n}{10} \times 1000mL = 100n mL$鐨勬祿姘ㄦ按銆傛墍浠ワ紝閰嶅埗$PH=9$鐨勭紦鍐叉憾娑$1$鍗囷紝闇瑕佹祿搴﹀潎涓$1mol$鐨勬皑姘$1000mL$鍜...
绛旓細渚嬪H3PO4缂撳啿婧舵恫涓紝澶ч噺瀛樺湪鐨勫叡杞吀纰卞鏄疕2PO4鍜孒PO4锛屽叾涓璈3PO4鍜孭O4鍚噺鍙拷鐣ヤ笉璁°傛湁pH锛漰Ka-H2po4鐨勬祿搴﹀拰HPO4鐨勬祿搴︾殑璐熷鏁帮紝鍚岀悊锛屽緱绠楀嚭鎵鏈夐夐」鐨勭紦鍐茶寖鍥达紝鐒跺悗涓庨鎰忓姣斿嵆鍙傜瓟妗堥渶瑕佺敤绉戝璁＄畻鍣ㄥ緱鍑恒傛垜杩欓噷灏变笉绠椾簡銆
绛旓細1銆缂撳啿娑茬殑pH鍊间笌璇ラ吀鐨勭數绂诲钩琛″父鏁癒a鍙婄洂鍜岄吀鐨勬祿搴︽湁鍏炽傚急閰哥殑pKa鍊艰 瀹氾紝浣嗛吀鍜岀洂鐨勬瘮渚嬩笉鍚屾椂锛屽氨浼氬緱鍒颁笉鍚岀殑pH鍊笺傞吀鍜岀洂娴撳害鐩哥瓑鏃讹紝婧舵恫鐨pH鍊间笌PKa鍊肩浉鍚屻2銆侀吀鍜岀洂娴撳害绛夋瘮渚嬪鍑忔椂锛屾憾娑茬殑pH鍊间笉鍙樸3銆侀吀鍜岀洂娴撳害鐩哥瓑鏃讹紝缂撳啿娑茬殑缂撳啿鏁堢巼涓烘渶楂橈紝姣斾緥鐩稿樊瓒婂ぇ锛岀紦鍐叉晥鐜囪秺浣...
绛旓細灞炰簬鍩虹棰樸傛牴鎹缂撳啿婧舵恫pH锛屽簲鐢╬H璁＄畻鍏紡锛岃绠楀叡杞吀纰卞鐨勬祿搴︽瘮 pH=pKa-lg([HAc]/[NaAc])5=4.76-lg([HAc]/[NaAc])[HAc]/[NaAc]=10^-0.24 [NaAc]=[Hac]/(10^-0.24)=0.35mol/L m(NaAc.3H2O)=0.35*1*136.08=47.63g ...
绛旓細(1)鎸缂撳啿娑PH璁＄畻鏈绠寮忥紝[H+]=[NH4+]*ka/[NH3路H2O]=0.009152*5.75*10^-10/0.015522=3.39*10^-10mol/L锛孭H鍊间负9.47锛屾鏃禣H-娴撳害涓2.95*10^-5mol/L锛岃孨H4Cl鐨勬祿搴︿负0.078mol/L锛岃繙澶т簬姘㈡哀鏍瑰拰姘㈢瀛愭祿搴︼紝鍥犳閫傜敤鏈绠寮忋(2)鍔犲叆寮虹⒈0.00475mol锛屼笌NH4Cl鍙嶅簲锛孨H4+...
绛旓細涔熷氨鏄1锛1鐨勬椂鍊PKa=PH銆傚綋鍔犲叆涓瀹氶吀鏃跺鏁拌绠楃粨鏋滃彉鍖栦笉澶э紝PH鍙樺寲涓嶅ぇ銆傚洜姝ら夌敤PKa涓嶱H鐩歌繎鐨勯吀纰卞锛岀紦鍐茶兘鍔涘己銆2 杩欎釜璨屼技鏈夌偣鍋忕悊璁虹殑鍛抽亾浜嗐傘傘備功涓婃槸鏈夌殑銆傚缓璁幓鐪嬬湅銆傘傘傝繕鏈夊氨鏄吀纰卞鐨勫晢杩囧ぇ鏃讹紝鍏紡灏变笉鏄繖涓簡銆傚洜涓洪偅涓椂鍊欏氨涓嶅彨缂撳啿婧舵恫浜嗐傚叕寮忓氨鎹簡銆
