YEP培养基是什么？ 农杆菌在MS培养基上能不能生长？
\u519c\u6746\u83cc\u7684\u57f9\u517b\u4e2d\u7528LB\u57f9\u517b\u57fa\u597d\u8fd8\u662fYEP\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u5b83\u4eec\u6709\u4ec0\u4e48\u533a\u522b\u5927\u80a0\u6746\u83cc\u5e38\u7528LB\u57f9\u517b\u57fa,
\u914d\u65b9\u5982\u4e0b\uff1a5g/L Yeast extract (\u9175\u6bcd\u818f)
10g/L Tryptone \uff08\u80f0\u86cb\u767d\u80e8\uff09
10g/L Sodium Chloride \uff08NaCl\uff09
pH 7.4
\u519c\u6746\u83cc\u5e38\u7528YEB\u57f9\u517b\u57fa,
\u914d\u65b9\u5982\u4e0b\uff1a
Beef extract (\u725b\u8089\u6d78\u818f) 5g/L Yeast extract (\u9175\u6bcd\u818f) 1g/L
Peptone (\u86cb\u767d\u80e8) 5g/L Sucrose (\u8517\u7cd6) 5g/L
MgSO4.7H2O 0.4g/100ml
Agar (\u743c\u8102) 1.5g/100ml \u3010\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u52a0\u743c\u8102\u3011
pH 7.4
\u770b\u5230\u533a\u522b\u4e86\u5427?\u4e0d\u540c\u83cc\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u662f\u5fae\u751f\u7269\u5b66\u5bb6\u7cbe\u5fc3\u7b5b\u9009\u51fa\u6765\u7684,\u6700\u6709\u5229\u4e8e\u8be5\u7ec6\u83cc\u751f\u957f\u7684\u57f9\u517b\u57fa.
\u53ef\u4ee5\u8bf4,\u4e0a\u8ff0\u4e24\u79cd\u57f9\u517b\u57fa\u90fd\u80fd\u57f9\u517b\u519c\u6746\u83cc,\u4f46\u662fyeb\u66f4\u9002\u5408,\u6240\u4ee5\u66f4\u597d.
\u6700\u597d\u662f\u7528YEP\uff0cYEP\u8ddfLB\u4e0d\u540c\u53ea\u5728\u4e8e\u628aLB\u4e2d\u7684\u80f0\u86cb\u767d\u80e8\u6362\u6210\u86cb\u767d\u80e8\u5373\u53ef\u3002 1)\u4ee5\u80da\u4e3a\u5916\u690d\u4f53\u8bf1\u5bfc\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\uff1b\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u8bf1\u5bfc\u57f9\u517b\u57fa\u662f\u5728MS\u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\u6dfb\u52a0\u4e862\uff0c4-\u4e8c\u6c2f\u82ef\u6c27\u57fa\u4e59\u9178\uff1b 2)\u5f53\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u751f\u957f20-30\u5929\u65f6\uff0c\u5c06\u5176\u7f6e\u4e8e\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u72b6\u6001\u8c03\u6574\u57f9\u517b\u57fa\u4e0a\uff0c\u4f7f\u5176\u5411\u80da\u6027\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u53d1\u5c55\uff1b\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u72b6\u6001\u8c03\u6574\u57f9\u517b\u57fa\u662f\u5728MS\u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\u6dfb\u52a0\u4e862\uff0c4- \u4e8c\u6c2f\u82ef\u6c27\u57fa\u4e59\u9178\u548c6-\u82c4\u6c28\u57fa\u560c\u5464\uff1b 3)\u5c06\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u6d78\u6ce1\u4e8e\u5e26\u6709\u690d\u7269\u8868\u8fbe\u8f7d\u4f53\u7684\u6839\u519c\u6746\u83cc\u83cc\u6db2\u4e2d\uff1b 4)\u5c06\u83cc\u6db2\u6d78\u6ce1\u8fc7\u7684\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u7f6e\u4e8e\u5171\u57f9\u517b\u57f9\u517b\u57fa\u4e0a\u5171\u57f9\u517b\uff1b\u5171\u57f9\u517b\u57f9\u517b\u57fa\u662f\u5728MS \u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\u6dfb\u52a0\u4e862\uff0c4-\u4e8c\u6c2f\u82ef\u6c27\u57fa\u4e59\u9178\uff1b 5)\u5c06\u53d7\u4f53\u7ec4\u7ec7\u7f6e\u4e8e\u8bf1\u5bfc\u7b5b\u9009\u57f9\u517b\u57fa\u4e0a\u8fdb\u884c\u6297\u6027\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u7684\u8bf1\u5bfc\uff1b\u6297\u6027\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u8bf1\u5bfc\u7b5b\u9009\u57f9\u517b\u57fa\u662f\u5728MS\u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\u6dfb\u52a0\u4e862\uff0c4-\u4e8c\u6c2f\u82ef\u6c27\u57fa\u4e59\u9178\u548c\u9009\u62e9\u6027\u6297\u751f\u7d20\uff1b 6)\u5c06\u751f\u957f\u7684\u6297\u6027\u6108\u4f24\u7ec4\u7ec7\u7f6e\u4e8e\u5206\u5316\u57f9\u517b\u57fa\u4e0a\u4f7f\u5176\u5206\u5316\u51fa\u518d\u751f\u690d\u682a\uff1b\u5206\u5316\u57f9\u517b\u57fa \u662f\u5728MS\u57fa\u672c\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u57fa\u7840\u4e0a\u6dfb\u52a0\u4e86\u7ec6\u80de6-\u82c4\u6c28\u57fa\u560c\u5464\u548c\u6fc0\u52a8\u7d20\u3002
yeb培养基：每升含有：牛肉浸膏5
g
，酵母浸膏
1
g
,蛋白胨
5
g
，蔗糖
5
g
，mgso4·h2o
0.5
g
，ph
7.0
yep培养基：每升含有：牛肉浸膏
10
g
，酵母提取液
10
g
，nacl
5
g
，ph
7.0
主要区别在于培养基成分不同，从配方可以看出，还有用途不同
yeb培养基用于农杆菌活化后单菌落扩增的培养
yep培养基营养丰富，有利于农杆菌的生长发育。用于农杆菌的分离培养。
1升的制作方法：
液体：
20g bacto-peptone
10g yeast extract
加蒸馏水使总容量达到1升
可以分到100mL的瓶子里
最后消毒（压力蒸汽灭菌）
酵母提取物 10g
蛋白胨 20g
葡萄糖 20g
加水至 1000ml
配平板时，在高压灭菌前加20g琼脂。
摘自分子克隆实验指南。
绛旓細YEB灏变竴绉嶉厤鏂瑰晩锛孻EB鍩瑰吇鍩锛氭瘡鍗囧惈鏈夛細鐗涜倝娴歌啅 5 g 锛岄叺姣嶆蹈鑶 1 g ,铔嬬櫧鑳 5 g 锛岃敆绯 5 g 锛孧gSO4路H2O 0.5 g 锛孭H 7.0 銆傝繖涓嵆鍙傝繕鏈夛紝NAA鍜6-BA鏄縺绱狅紝鍙互鐩存帴鐏弻銆傛姉鐢熺礌鐨勮瘽锛岃鐪嬩綘鐢ㄧ殑鏄粈涔鑿岀銆傛姉鐢熺礌涓鑸杩囨护鐏弻銆傜敤缁嗚弻杩囨护鍣ㄣ
绛旓細LBA4404鏈韩甯︽湁閾鹃湁绱犳姉鎬у拰鍒╃骞虫姉鎬э紝鍩瑰吇娓╁害涓28鈩冿紝鎽囪弻杞熶竴鑸负180~220rpm锛屾槸涓绉嶅急姣掔殑鍐滄潌鑿岋紝鏈濂介厤鍚堣秴鍙屽厓杞戒綋浣跨敤銆傚父鐢YEP鍩瑰吇鍩鏉ュ煿鍏汇
绛旓細鑻ュ厖鍒嗘憾瑙ｄ箣鍚庣伃鑿屽畬浠嶆湁娌夋穩锛屽彲浠ョ户缁娇鐢紝涓嶅奖鍝嶃
绛旓細(2)鏍圭檶鍐滄潌鑿岀殑娲诲寲鍜屽煿鍏汇備粠YEP骞虫澘涓婃寫鍙栧惈鏈夊弻鍏冭浇浣撶殑鏍圭檶鍐滄潌鑿屽崟鍏嬮殕鑿岃惤鎺ョ浜庡惈鏈夊悎閫傛姉鐢熺礌鐨7mL YEP娑蹭綋鍩瑰吇鍩涓,250r/min,28鈩冭繃澶滃煿鍏汇傛鏃,鐢ㄨ瀵煎煿鍏诲熀IM(鍚200渭M涔欓叞涓侀閰)绋閲婂埌OD660涓0.15,鐒跺悗缁х画鍩瑰吇4锝6h鑷砄D660涓0.6锝0.8銆 (3)鍏卞煿鍏诲拰杞寲瀛愮殑绛涢夈侀壌瀹氥傚皢100渭L璇卞娲诲寲鐨...
绛旓細pUC118璐ㄧ矑鐨勫鍏嬮殕浣嶇偣鏁村悎鍦╨acZ鍩哄洜涓,璇ヤ綅鐐瑰鏋滄病鏈夋彃鍏ュ婧愮洰鐨勫熀鍥,lacZ鍩哄洜渚垮彲琛ㄨ揪鍑鍗婁钩绯栬嫹閰,濡傛灉骞虫澘鍩瑰吇鍩涓惈鏈塈PTG鍜孹-gal,X-gal渚夸細琚鍗婁钩绯栬嫹閰舵按瑙ｆ垚鍏拌壊,澶ц偁鏉嗚弻褰㈡垚钃濊壊鍏嬮殕銆 鍦ㄥ鍏嬮殕浣嶇偣鎻掑叆澶栨簮鐩殑鍩哄洜,鐮村潖浜唋acZ鍩哄洜鐨勭粨鏋,澶ц偁鏉嗚弻褰㈡垚鐧借壊鐨勫厠闅哾.鍒╃敤lacZ鍩哄洜鐨勬彃鍏ュけ娲...
绛旓細娌′簨锛屾尯濂斤紝鍙兘鏄竴浜涜佺粏鑳炶嚜婧剁殑浜х墿锛岃繖鏄伩鍏嶄笉浜嗙殑锛屼笉瑕佸お澶氬氨琛屻傚仛杞寲涓瀹氳鎺у埗濂絆D鍊硷紝涓鑸0.5宸﹀彸銆傜浣犳垚鍔燂紒
绛旓細涓銆佸煿鍏诲璞′笉鍚岋細1銆乊EB鍩瑰吇鍩虹敤浜庡啘鏉嗚弻娲诲寲鍚庡崟鑿岃惤鎵╁鐨勫煿鍏汇2銆YEP鍩瑰吇鍩钀ュ吇涓板瘜锛屾湁鍒╀簬鍐滄潌鑿岀殑鐢熼暱鍙戣偛銆傜敤浜庡啘鏉嗚弻鐨勫垎绂诲煿鍏汇備簩銆佹垚鍒嗕笉鍚岋細1銆乊EB鍩瑰吇鍩猴細鐗涜倝娴歌啅銆侀叺姣嶆蹈鑶忋佽泲鐧借儴銆佽敆绯栥2銆乊EP鍩瑰吇鍩猴細鐗涜倝娴歌啅銆侀叺姣嶆彁鍙栨恫銆丯aCl銆傚煿鍏诲熀渚涚粰寰敓鐗┿佹鐗╂垨鍔ㄧ墿锛堟垨缁勭粐锛夌敓闀跨箒娈...
绛旓細YEB鍩瑰吇鍩猴細姣忓崌鍚湁锛氱墰鑲夋蹈鑶 5 g 锛岄叺姣嶆蹈鑶 1 g ,铔嬬櫧鑳 5 g 锛岃敆绯 5 g 锛孧gSO4路H2O 0.5 g 锛孭H 7.0 YEP鍩瑰吇鍩锛氭瘡鍗囧惈鏈夛細鐗涜倝娴歌啅 10 g 锛岄叺姣嶆彁鍙栨恫 10 g 锛孨aCl 5 g 锛孭H 7.0 涓昏鍖哄埆鍦ㄤ簬鍩瑰吇鍩烘垚鍒嗕笉鍚岋紝浠庨厤鏂瑰彲浠ョ湅鍑猴紝杩樻湁鐢ㄩ斾笉鍚 YEB鍩瑰吇鍩虹敤浜庡啘鏉嗚弻娲诲寲鍚庡崟...
绛旓細YEB鍩瑰吇鍩猴細姣忓崌鍚湁锛氱墰鑲夋蹈鑶 5 g 锛岄叺姣嶆蹈鑶 1 g ,铔嬬櫧鑳 5 g 锛岃敆绯 5 g 锛孧gSO4路H2O 0.5 g 锛孭H 7.0 YEP鍩瑰吇鍩锛氭瘡鍗囧惈鏈夛細鐗涜倝娴歌啅 10 g 锛岄叺姣嶆彁鍙栨恫 10 g 锛孨aCl 5 g 锛孭H 7.0 涓昏鍖哄埆鍦ㄤ簬鍩瑰吇鍩烘垚鍒嗕笉鍚岋紝浠庨厤鏂瑰彲浠ョ湅鍑猴紝杩樻湁鐢ㄩ斾笉鍚 YEB鍩瑰吇鍩虹敤浜庡啘鏉嗚弻娲诲寲鍚庡崟...
绛旓細pH 7.4 鍐滄潌鑿屽父鐢╕EB鍩瑰吇鍩,閰嶆柟濡備笅锛欱eef extract (鐗涜倝娴歌啅) 5g/L Yeast extract (閰垫瘝鑶) 1g/L Peptone (铔嬬櫧鑳) 5g/L Sucrose (钄楃硸) 5g/L MgSO4.7H2O 0.4g/100ml Agar (鐞艰剛) 1.5g/100ml 銆愬浐浣撳煿鍏诲熀鍔犵惣鑴傘憄H 7.4 鐪嬪埌鍖哄埆浜嗗惂?涓嶅悓鑿岀殑鍩瑰吇鍩烘槸寰敓鐗╁瀹剁簿蹇冪瓫閫夊嚭鏉...
