求助，我想问下做蛋白与核算交联实验，想问下紫外交联仪能量设置为多少的合适？求大神帮忙解答，谢谢了。 化学和生物哪个难？
\u5316\u5b66\u751f\u7269\u5b66\u600e\u4e48\u6837\uff1f\uff1f\u5316\u5b66\u751f\u7269\u5b66\uff1a\u7814\u7a76\u751f\u547d\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u5316\u5b66\u57fa\u7840\u7684\u79d1\u5b66
\u4e00\u822c\u6765\u8bf4\u5316\u5b66\u7a0d\u5fae\u96be\u70b9\u513f\uff0c\u4f46\u4e5f\u56e0\u4eba\u800c\u5f02\uff0c\u5316\u5b66\u6bd4\u751f\u7269\u66f4\u52a0\u5177\u6709\u7406\u79d1\u7684\u6027\u8d28\uff0c\u751f\u7269\u6709\u70b9\u513f\u50cf\u6587\u79d1\uff0c\u8bb0\u5fc6\u6027\u7684\u5185\u5bb9\u5f88\u591a\uff0c\u4f46\u662f\u5316\u5b66\u548c\u751f\u7269\u7684\u5b66\u4e60\u601d\u7ef4\u6709\u4e00\u4e9b\u5171\u540c\u7279\u70b9\uff0c\u90a3\u5c31\u662f\u57fa\u672c\u4e0a\u90fd\u662f\u4ee5\u5f52\u7eb3\u548c\u603b\u7ed3\u7684\u5f62\u5f0f\u5b66\u4e60\uff0c\u4f8b\u5982\uff1a\u9178\u8fd9\u4e00\u8282\uff0c\u5b66\u7a00\u76d0\u9178\u548c\u7a00\u786b\u9178\u4f5c\u4e3a\u9178\u7684\u4ee3\u8868\uff0c\u63a8\u800c\u5e7f\u4e4b\uff0c\u6240\u6709\u975e\u6c27\u5316\u6027\u7a00\u9178\u90fd\u5177\u6709\u8fd9\u4e24\u79cd\u9178\u7684\u5316\u5b66\u6027\u8d28\uff0c\u4e5f\u5c31\u662f\u9178\u7684\u901a\u6027\uff1b\u518d\u5165\uff1a\u54fa\u4e73\u52a8\u7269\u4e2d\u7684\u732b\u79d1\u52a8\u7269\uff0c\u4ee5\u5bb6\u732b\u4e3a\u4ee3\u8868\uff0c\u8be6\u7ec6\u5730\u4ecb\u7ecd\u4e86\u5bb6\u732b\u7684\u89e3\u5256\u3001\u751f\u7406\u7ed3\u6784\u548c\u751f\u6d3b\u4e60\u60ef\uff0c\u518d\u9010\u6b65\u63a8\u800c\u5e7f\u4e4b\u53bb\u4e86\u89e3\u732b\u79d1\u52a8\u7269\u7684\u751f\u6d3b\u4e60\u6027\u548c\u89e3\u5256\u3001\u751f\u7406\u5b66\u7279\u70b9\u3002\u603b\u4e4b\u8fd9\u4e24\u4e2a\u79d1\u76ee\u4e0d\u50cf\u7269\u7406\u548c\u6570\u5b66\u5c5e\u4e8e\u63a8\u7406\u548c\u6f14\u7ece\u7684\u601d\u7ef4\u6a21\u5f0f\u3002
首先看你使用的是什么规格的交联仪，我们实验室用的是赛智的5x8w的交联仪，建议交联条件为50-60J，10min；如果是5x10w的，就适当降低交联能量。但具体实验还是要根据蛋白的特性来设定的，建议你做下摸索实验。祝你实验顺利！绛旓細棣栧厛鐪嬩綘浣跨敤鐨勬槸浠涔堣鏍肩殑浜よ仈浠紝鎴戜滑瀹為獙瀹ょ敤鐨勬槸璧涙櫤鐨5x8w鐨勪氦鑱斾华锛屽缓璁氦鑱旀潯浠朵负50-60J锛10min锛涘鏋滄槸5x10w鐨勶紝灏遍傚綋闄嶄綆浜よ仈鑳介噺銆備絾鍏蜂綋瀹為獙杩樻槸瑕佹牴鎹泲鐧界殑鐗规ф潵璁惧畾鐨勶紝寤鸿浣犲仛涓嬫懜绱㈠疄楠屻傜浣犲疄楠岄『鍒╋紒
绛旓細閫氳繃鍖栧浜よ仈鍙敼鍠勮仛鍚堢墿鐨勬ц兘銆傚鑱氫箼鐑殑鍖栧浜よ仈鍙彁楂樺叾寮哄害鍜岃愮儹鎬э紝鍙堝鐨潻鐨勯灒鍒惰繃绋嬫槸鍒╃敤鍏惰泲鐧借川鍒嗗瓙涓庣敳閱涗綔鐢紝鐢熸垚浜よ仈妗ワ紝浠ヨ嚦澶卞幓婧惰В鎬с
绛旓細铔嬬櫧璐鍦ㄩ鍝佸姞宸ュ拰璐棌杩囩▼涓彂鐢熺殑鐗╃悊銆佸寲瀛﹀拰钀ュ吇鍙樺寲锛 锛1锛夊湪鍔犵儹鏉′欢涓嬬殑鍙樺寲锛 鏈夊埄鐨勬柟闈細1锛夎泲鐧借川鍙樻э紝鑲介摼鏉炬暎锛屽鏄撳彈鍒版秷鍖栫殑浣滅敤锛屾彁楂樹簡娑堝寲鐜 鍜屾皑鍩洪吀鐨勭敓鐗╂湁鏁堟э紱2锛夐挐鍖栬泲鐧介叾銆侀叝閰躲佸閰氭哀鍖栭叾绛夛紝闃叉椋熷搧鍦ㄤ繚钘忔湡闂翠笉鍙戠敓鑹叉辰鍜岄鍛冲彉鍖栵紱 3锛夋姂鍒跺婧愬嚌闆嗙礌鍜屾秷闄よ泲鐧介叾鎶...
绛旓細鎴婁簩閱涘拰铔嬬櫧璐ㄤ氦鑱鐨勫師鐞嗕竴鑸槸鍦40搴﹀乏鍙筹紝浜よ仈浣犺娉ㄦ剰浣犵殑娌规按绗旓紝杩樻湁浣犵殑鍚愭俯鐨勩傛俯搴︺傝繕鏈変竴瀹氳娉ㄦ剰涓涓嬶紝浣犻噰鍙栫殑鏄补鍖呮按杩樻槸姘村寘娌圭殑褰㈠紡锛岃繖鏄潪甯搁噸瑕佺殑锛屽湪鎿嶄綔鐨勮繃绋嬩腑锛屼竴瀹氳鎸夌収姝ラ杩涜鎿嶄綔锛屾敞鎰忓畨鍏ㄥ摝銆
绛旓細铔嬬櫧璐ㄧ殑浜よ仈浣滅敤 锛氬湪涓瀹氭潯浠朵笅锛岃泲鐧借川鍒嗗瓙闂彲浠ラ氳繃鍏朵晶閾句笂鐨勭壒瀹氬熀鍥㈣仈缁撳湪涓璧峰舰鎴愭洿澶х殑鍒嗗瓙浠庤屼娇铔嬬櫧璐ㄥ彉鎬э紝鍗冲垎瀛愪氦鑱斻傚湪姘у寲鍓(濡傜┖姘斾腑鐨勬哀)瀛樺湪鐨勬潯浠朵笅锛岃泲鐧借川鍒嗗瓙鍙彂鐢熺～姘㈠熀涓庣～姘㈠熀鐨勬哀鍖栧瀷浜よ仈浠庤岀敓鎴愪簩纭敭銆傝泲鐧借川涓殑鍗婅儽姘ㄩ吀鏄撲簬鍙戠敓杩欑浜岀～閿瀷浜よ仈锛浣块鐗╃殑鏈烘寮哄害...
绛旓細TGase閫氳繃鍏剁嫭鐗圭殑鍌寲浣滅敤锛屽埄鐢ㄨ偨閾句腑璋锋皑閰拌兒娈嬪熀涓婄殑鐢查叞鑳哄熀浣滀负涔欓叞鍩轰緵浣擄紝鍙互涓铔嬬櫧璐鎴栨父绂绘皑鍩洪吀涓婄殑鑳哄熀銆佷集鑳哄熀鎴栨按杩涜鍙嶅簲銆傚畠鍏锋湁鍙屽悜鍌寲鑳藉姏锛屾棦鑳戒績杩涜泲鐧藉垎瀛愰棿鐨浜よ仈锛堣泲鐧借川Gln娈嬪熀鍜孡ys娈嬪熀涔嬮棿鐨勪氦鑱斿弽搴旓級锛屼篃鑳藉偓鍖栧垎瀛愬唴鐨勪氦鑱斻傚叿浣撴潵璇达紝TGase鍙互杩涜濡備笅鍙嶅簲锛氬畠淇冧娇璋锋皑...
绛旓細姘ㄥ熀鍜岀敳閱涚缉鍚堥摼缁堟
绛旓細chip瀹為獙鍘熺悊鍦ㄦ椿缁嗚優鐘舵佷笅鍥哄畾铔嬬櫧璐-DNA澶嶅悎鐗╋紝骞跺皢鍏堕殢鏈哄垏鏂负涓瀹氶暱搴﹁寖鍥村唴鐨勬煋鑹茶川灏忕墖娈碉紝鐒跺悗閫氳繃鍏嶇柅瀛︽柟娉曟矇娣姝ゅ鍚堜綋锛岀壒寮傛у湴瀵岄泦鐩殑铔嬬櫧缁撳悎鐨凞NA鐗囨锛岄氳繃瀵圭洰鐨勭墖娈电殑绾寲涓庢娴嬶紝浠庤岃幏寰铔嬬櫧璐ㄤ笌DNA鐩镐簰浣滅敤鐨勪俊鎭俢hip瀹為獙姝ラ鍏蜂綋濡備笅锛氱涓澶╋細(涓)銆佺粏鑳炵殑鐢查啗浜よ仈涓庤秴澹扮牬纰庛...
绛旓細1銆佹贩鍚堥吀閰愭柟娉曪紱2銆丆DI鏂规硶锛3銆丯HS閰柟娉曘傛贩鍚堥吀閰愭柟娉曢氬父鏃㈢畝鍗曡屽張鐩存帴锛屽皬鍒嗗瓙鐨勭晶鍩鸿浆鍙樻垚鍙笌铔嬬櫧姘ㄥ熀鍙嶅簲鐨勯吀閰愩傚弽搴旀椂锛屼竴鑸瘡鎽╁皵铔嬬櫧涓姞鍏10锝20mol灏忓垎瀛愩傝繖绉嶆柟娉曞凡琚敤浜庨泴浜岄唶鈥擧RP锛屽彲鐨勬澗鈥攂鈥斿崐涔崇硸鑻烽叾绛夐叾缁撳悎鐗╃殑鍒跺锛屼骇鐜囩害涓25锛呫備笅闈妇涓渚嬪瓙璇存槑娣峰悎閰搁厫鏂规硶鏄浣曡繘琛...
绛旓細杩欎袱涓瘯鍓傛湰璐ㄦ槸涓鏍风殑锛屽彧涓嶈繃绗竴涓父鐢ㄤ綔鐢熺墿绱犳爣璁拌瘯鍓傦紝绗簩涓彲浣滀负鍚屽弻鍔熻兘浜よ仈鍓
