组织植物的培养技术（只要给我培养液的配制以及克隆植物的方法） 培养植物时，容器底部是培养基，其中含有植物生长所需的养分，有...
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一种植物无土栽培液体培养培养植物的方法，一般而言，调整培养基中阴离子态氮源与阳离子态氮源的比例为2－7∶1，优选4－5∶1，可使大多数植物在培养过程中培养液的pH值的保持在5－7左右。另一方面，在培养的过程中，如果培养液的pH值向碱性偏离时，可适当增加阳离子态氮的比例；如果情况相反的话，应适当增加阴离子态氮的比例。通过该方法的培养基的营养配方，能使培养基很好地模拟土壤溶液中对pH高缓冲性的特点，促进植物的生长发育，确保无土栽培产业的低成本和高产出以及农业生产的可持续发展。克隆”是英文 clone 的译音，《新英汉词典》翻译为“复制、无性系”。简单地说，植物克隆也是植物的无性繁殖方法（植物克隆技术）。植物克隆之所以能够实现，是因为植物的细胞具有全能性，植物的器官具有再生机能。植物体的每一个活细胞都包含植物生长发育所必需的全部基因，都具有再生成一个完全的有机体所需的遗传信息。同样，植物的某一部分，一个器官或部分器官，在脱离母体之后，在一定的条件下，可以通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。这个过程就是植物克隆的过程。
国内外植物克隆的方法有试管组培和非试管微组织快繁两种。
试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在试管等器皿中进行培养的方法。试管组培的培养基有固体和液体两种，所有培养过程必需在无菌的条件下进行，并且与控温、人工光照等措施密切结合。因此，试管组培设施、设备投资大，人员的专业素质要求高。 （注：试管克隆不宜推广给一般单位和个人，室内外 30万投资能搞出来就不错，试管里（或其它容器）成苗只是第一步，甚至一些农业院校的组培室里满是苗，而外面驯化出来的寥寥无几。以低投入的假象进行宣传，推广普及试管克隆实属坑人！）
非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙质培养基上进行培养的方法。由于非试管快繁所取组织相对较大，培养基又采用沙质无机物，故不容易被微生物感染，操作环节少，操作要求低，设施投资千余元就可以上马自动化管理，普通农民可以学会，值得普遍推广应用。（如果一个植物平均 10 天长 1 张叶片，则 12 个月可以繁殖到 17 万倍以上）
附件 ：植物细胞的遗传性和植物组织的再生机能
植物细胞的遗传性
无性繁殖之所以能成功，是因为植物每个活细胞都包含生产发育所必需的全部基因，这就是植物细胞在遗传性中表现出的全能性。即是说：高等植物的细胞分裂，都能保留它们遗传上的任何一个潜在能力，使具有复杂机构的植物离体部分，经过细胞重复分裂繁殖而产生同于母本的各部分组织和器官。这为植物扦插繁殖提供了强有力的证明。全光雾插育苗技术在我国得到迅速发展，就是利用这个理论，将植物的嫩枝插穗在无菌和有助于生根的物质、光照、温度、水分、空气等条件下培养成与母体遗传信息完全相同的植株。
植物器官的再生机能
植物体的某一部分受伤被切除而植物整体的协调受到破坏时，能够表现出一种弥补损伤和恢复协调的机能，这种机能为植物的补充反应，即植物的再生作用。植物的嫩枝扦插育苗，就是利用植物器官的再生性能，从亲本上切取的枝条制成插穗，并及时进行扦插，插穗在适宜生根条件下，通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。
克隆”是英文 clone 的译音，《新英汉词典》翻译为“复制、无性系”。简单地说，植物克隆也是植物的无性繁殖方法（植物克隆技术）。
植物克隆之所以能够实现，是因为植物的细胞具有全能性，植物的器官具有再生机能。植物体的每一个活细胞都包含植物生长发育所必需的全部基因，都具有再生成一个完全的有机体所需的遗传信息。同样，植物的某一部分，一个器官或部分器官，在脱离母体之后，在一定的条件下，可以通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。这个过程就是植物克隆的过程。
国内外植物克隆的方法有试管组培和非试管微组织快繁两种。
试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在试管等器皿中进行培养的方法。试管组培的培养基有固体和液体两种，所有培养过程必需在无菌的条件下进行，并且与控温、人工光照等措施密切结合。因此，试管组培设施、设备投资大，人员的专业素质要求高。 （注：试管克隆不宜推广给一般单位和个人，室内外 30万投资能搞出来就不错，试管里（或其它容器）成苗只是第一步，甚至一些农业院校的组培室里满是苗，而外面驯化出来的寥寥无几。以低投入的假象进行宣传，推广普及试管克隆实属坑人！）
非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙质培养基上进行培养的方法。由于非试管快繁所取组织相对较大，培养基又采用沙质无机物，故不容易被微生物感染，操作环节少，操作要求低，设施投资千余元就可以上马自动化管理，普通农民可以学会，值得普遍推广应用。（如果一个植物平均 10 天长 1 张叶片，则 12 个月可以繁殖到 17 万倍以上）
附件 ：植物细胞的遗传性和植物组织的再生机能
植物细胞的遗传性
无性繁殖之所以能成功，是因为植物每个活细胞都包含生产发育所必需的全部基因，这就是植物细胞在遗传性中表现出的全能性。即是说：高等植物的细胞分裂，都能保留它们遗传上的任何一个潜在能力，使具有复杂机构的植物离体部分，经过细胞重复分裂繁殖而产生同于母本的各部分组织和器官。这为植物扦插繁殖提供了强有力的证明。全光雾插育苗技术在我国得到迅速发展，就是利用这个理论，将植物的嫩枝插穗在无菌和有助于生根的物质、光照、温度、水分、空气等条件下培养成与母体遗传信息完全相同的植株。
植物器官的再生机能
植物体的某一部分受伤被切除而植物整体的协调受到破坏时，能够表现出一种弥补损伤和恢复协调的机能，这种机能为植物的补充反应，即植物的再生作用。植物的嫩枝扦插育苗，就是利用植物器官的再生性能，从亲本上切取的枝条制成插穗，并及时进行扦插，插穗在适宜生根条件下，通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。
克隆”是英文 clone 的译音，《新英汉词典》翻译为“复制、无性系”。简单地说，植物克隆也是植物的无性繁殖方法（植物克隆技术）。
植物克隆之所以能够实现，是因为植物的细胞具有全能性，植物的器官具有再生机能。植物体的每一个活细胞都包含植物生长发育所必需的全部基因，都具有再生成一个完全的有机体所需的遗传信息。同样，植物的某一部分，一个器官或部分器官，在脱离母体之后，在一定的条件下，可以通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。这个过程就是植物克隆的过程。
国内外植物克隆的方法有试管组培和非试管微组织快繁两种。
试管组织培养是将外植体（即离体组织、器官或细胞）放置在试管等器皿中进行培养的方法。试管组培的培养基有固体和液体两种，所有培养过程必需在无菌的条件下进行，并且与控温、人工光照等措施密切结合。因此，试管组培设施、设备投资大，人员的专业素质要求高。 （注：试管克隆不宜推广给一般单位和个人，室内外 30万投资能搞出来就不错，试管里（或其它容器）成苗只是第一步，甚至一些农业院校的组培室里满是苗，而外面驯化出来的寥寥无几。以低投入的假象进行宣传，推广普及试管克隆实属坑人！）
非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙质培养基上进行培养的方法。由于非试管快繁所取组织相对较大，培养基又采用沙质无机物，故不容易被微生物感染，操作环节少，操作要求低，设施投资千余元就可以上马自动化管理，普通农民可以学会，值得普遍推广应用。（如果一个植物平均 10 天长 1 张叶片，则 12 个月可以繁殖到 17 万倍以上）
附件 ：植物细胞的遗传性和植物组织的再生机能
植物细胞的遗传性
无性繁殖之所以能成功，是因为植物每个活细胞都包含生产发育所必需的全部基因，这就是植物细胞在遗传性中表现出的全能性。即是说：高等植物的细胞分裂，都能保留它们遗传上的任何一个潜在能力，使具有复杂机构的植物离体部分，经过细胞重复分裂繁殖而产生同于母本的各部分组织和器官。这为植物扦插繁殖提供了强有力的证明。全光雾插育苗技术在我国得到迅速发展，就是利用这个理论，将植物的嫩枝插穗在无菌和有助于生根的物质、光照、温度、水分、空气等条件下培养成与母体遗传信息完全相同的植株。
植物器官的再生机能
植物体的某一部分受伤被切除而植物整体的协调受到破坏时，能够表现出一种弥补损伤和恢复协调的机能，这种机能为植物的补充反应，即植物的再生作用。植物的嫩枝扦插育苗，就是利用植物器官的再生性能，从亲本上切取的枝条制成插穗，并及时进行扦插，插穗在适宜生根条件下，通过自身生理结构的调整，再次形成完整的植物个体。
简单的组培方法（实验课用来养胡萝卜的，还不错） 培养液： 配液注意事项—— 配制培养基最方便的方法是预先配制不同组分的培养基母液，贮藏在冰箱，待配制培养基时取出，按比例稀释。 配制母液时为了减少工作量可以把几种药品配在同一母液中，但是应该注意各种化合物的组合以及加入的前后顺序，应该把钙离子、锰离子、钡离子和硫酸根和磷酸根例子错开，以免发生沉淀。 把每种试剂单独溶解后再加入后一种化合物。混合已溶解的各种矿质盐时还应该注意加样顺序。 铁盐单独配制，其配法为5.57g 的硫酸亚铁（Fe SO4.7H2O）和7.45g乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）溶于1 L水中，用时每配1 L培养基，取该溶液5ml。 IAA 、IBA、NAA等可用少量的乙醇溶解，然后在加水定容。2,4-D可用1 N的Na OH 溶解然后再定容； KT和6-BA应先定容于少量的1 mol/L 的HCl中，再加水定容。玉米素应该溶于95% 的乙醇中再定容。 pH值对培养基的凝固情况和植物材料的生长有很大的影响，因此，等培养基配好后，应该立即调整培养基的pH ,最好用酸度计，既快又准。培养基配好后应该立即分装，体积一般为容器的 1/4 或者1/3为好。 器材和药品—— 高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、酸度测定仪、光照培养箱,搪瓷杯、搪瓷盘、100 ml三角烧瓶（12个/组）、250 ml三角瓶（2个/组）、试剂瓶、解剖刀柄与刀片、单面刀片、剪刀、长镊子、培养皿、移液管、漏斗、量筒、烧杯（50、100、500、1000 m1），酒精灯、火柴、玻璃棒、吸耳球、封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、滤纸、pH试纸（5.4-7.0）、标签纸、称量纸、药勺等。 次氯酸钠消毒液, 75%的酒精 ,0.2％的升汞溶液. 1 N 盐酸,1 N NaOH,0.8%的琼脂,3%的蔗糖. 0.1 mg/ml的2,4-D溶液：取25 mg的 2,4-D，加入少量95%的酒精和1 N的NaOH溶解，再加蒸馏水定容至250 ml。 0.1 mg/ml 的6-BA溶液：取25 mg的6-BA，用少量1 N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250 ml。 表.1 MS培养基储备液的配制（是图像的,已经传上去了，给你个连接,如果打不开，请联系我，我发给你哈
） 实验步骤 培养基的配制 1．母液配制： 按照表 1分别配制，并在4 ℃冰箱中保存。 2. 植物激素配制：称取10 mg NAA,加入少量酒精，并加水定容50 ml (浓度为0.2 mg/ml), 用同样的方法配制2，4-D母液。 称取 50 mg 6-BA, 加少量的1 mol/L HCl，使其充分溶解，然后加水至50 ml (浓度为1 mg/ml) 。 3．MS基本培养基的配制：分别吸取MS贮备液30.0 ml（大量元素）、3.0 ml微量元素、 3.0 ml铁盐、 3.0 ml有机, 加入1 L的搪瓷缸中，然后称取蔗糖18.0g, 加入琼脂4.8g，加蒸馏水约500 ml，在电炉上加热，煮沸，融化琼脂，然后加蒸馏水至570ml。 4. 不同激素浓度(0.5 mg/L, 1 mg/L, 2 mg/L)培养基的配制：取200ml烧杯3个，分别吸取所需要的2,4-D溶液1.0，2.0, 4.0ml)，然后加入MS基本培养190ml，搅拌均匀后，用1 M的NaOH调节pH至5.8。 加蒸馏水定容至200ml。 5. 将配制好的培养基分装于24个50ml三角瓶中，盖上封口膜，并用牛皮纸包扎。 培养基灭菌 1. 打开灭菌锅盖，向锅内加水。 2.加水后，将待灭菌的物品放入锅内，不要放的太多，以免影响灭菌效果。物品不要近靠锅壁，以免冷凝水顺壁流入物品中。 3. 加盖旋紧螺旋。 4.打开放汽阀，加热，自开始产生蒸汽后5分钟，再关紧放汽阀，此时锅内的冷空气已由排气孔排尽，让温度随蒸汽压力的增高而上升。 5. 待压力逐渐上升到所需压力时（一般为15磅/时， 1.034×10 5Pa）, 灭菌20分钟。 6． 灭菌后，待压力降至0时，开盖，取出灭菌物品。（在压力未完全下降前，切勿打开锅盖）。 胡萝卜组织培养 1. 取两个50ml的小烧杯,分别倒入25ml的70%的酒精和0.2%的升汞。 2. 取胡萝卜贮藏根，洗净，然后将胡萝卜根于70％酒精中浸泡数秒钟。 3. 浸于0.2％氯化汞（升汞）液中消毒灭菌10 min后,再用无菌水冲洗3—4次。 4. 将灭菌材料放在灭菌的滤纸上,吸干水分。 5. 用解剖刀将胡萝卜切去表皮和中柱，取皮层，切成0.5cm见方的小块，接种于MS附加 2.0mg/L 2，4-D 培养基内,于 25℃，黑暗或漫射光下培养,14—21 天后继代一次。 水稻成熟胚组织培养 1. 取成熟种子，用 70％乙醇浸l min，转至l.5％次氯酸钠溶液（ 含有0.01%吐温20）浸泡l.5~2 h后，用无菌水冲洗4～5次，置无菌滤纸上吸干多余水分。 2. 将成熟胚置于含 2 mg／L 2，4－D的 MS固体培养基上，27 ℃暗培养诱导愈伤组织 10天后（成熟胚）继代一次。 注意事项： 1.配制培养基时，一定要注意调节pH。 2.外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成。 结果 外植体经过20天的培养后，长出淡黄色的愈伤组织。
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