培养基的培养基的配制 培养基的配制
\u914d\u5236\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u6b65\u9aa4\uff1f1\u3001\u914d\u5236\u6eb6\u6db2
\u5411\u5bb9\u5668\u5185\u52a0\u5165\u6240\u9700\u6c34\u91cf\u7684\u4e00\u90e8\u5206\uff0c\u6309\u7167\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u914d\u65b9\uff0c\u79f0\u53d6\u5404\u79cd\u539f\u6599\uff0c\u4f9d\u6b21\u52a0\u5165\u4f7f\u5176\u6eb6\u89e3\uff0c\u6700\u540e\u8865\u8db3\u6240\u9700\u6c34\u5206\u3002\u5bf9\u86cb\u767d\u80e8\u3001\u8089\u818f\u7b49\u7269\u8d28\uff0c\u9700\u52a0\u70ed\u6eb6\u89e3\uff0c\u52a0\u70ed\u8fc7\u7a0b\u6240\u84b8\u53d1\u7684\u6c34\u5206\uff0c\u5e94\u5728\u5168\u90e8\u539f\u6599\u6eb6\u89e3\u540e\u52a0\u6c34\u8865\u8db3\u3002
\u914d\u5236\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u5148\u5c06\u4e0a\u8ff0\u5df2\u914d\u597d\u7684\u6db2\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u716e\u6cb8\uff0c\u518d\u5c06\u79f0\u597d\u7684\u743c\u8102\u52a0\u5165\uff0c\u7ee7\u7eed\u52a0\u70ed\u81f3\u5b8c\u5168\u878d\u5316\u3002\u5e76\u4e0d\u65ad\u6405\u62cc\uff0c\u4ee5\u514d\u743c\u8102\u7cca\u5e95\u70e7\u7126\u3002
2\u3001\u8c03\u8282pH\u503c
\u7528pH\u8bd5\u7eb8\uff08\u6216pH\u7535\u4f4d\u8ba1\u3001\u6c22\u79bb\u5b50\u6d53\u5ea6\u6bd4\u8272\u8ba1\uff09\u6d4b\u8bd5\u57f9\u517b\u57fa\u7684pH\u503c\uff0c\u5982\u4e0d\u7b26\u5408\u9700\u8981\uff0c\u53ef\u752810%HCl\u621610%NaOH\u8fdb\u884c\u8c03\u8282\uff0c\u76f4\u5230\u8c03\u8282\u5230\u914d\u65b9\u8981\u6c42\u7684pH\u503c\u4e3a\u6b62\u3002
3\u3001\u8fc7\u6ee4
\u7528\u6ee4\u7eb8\u3001\u7eb1\u5e03\u6216\u68c9\u82b1\u8d81\u70ed\u5c06\u5df2\u914d\u597d\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u8fc7\u6ee4\u3002\u7528\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u6700\u597d\u6298\u53e0\u6210\u516d\u5c42\uff0c\u7528\u6ee4\u7eb8\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u53ef\u5c06\u6ee4\u7eb8\u6298\u53e0\u6210\u74e6\u68f1\u5f62\uff0c\u94fa\u5728\u6f0f\u6597\u4e0a\u8fc7\u6ee4\u3002
4\u3001\u5206\u88c5
\u5df2\u8fc7\u6ee4\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u5e94\u8fdb\u884c\u5206\u88c5\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u4e2d\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u6216\u6db2\u4f53\u3001\u534a\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u5219\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u9525\u5f62\u74f6\u5185\u3002
\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u4e00\u624b\u634f\u677e\u5f39\u7c27\u5939\uff0c\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u6d41\u51fa\uff0c\u53e6\u4e00\u53ea\u624b\u63e1\u4f4f\u51e0\u652f\u8bd5\u7ba1\u6216\u9525\u5f62\u74f6\uff0c\u4f9d\u6b21\u63a5\u53d6\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u6ce8\u610f\u4e0d\u8981\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u7c98\u9644\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\uff0c\u4ee5\u514d\u6d78\u6e7f\u68c9\u585e\u5f15\u8d77\u6742\u83cc\u6c61\u67d3\u3002
\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u91cf\uff0c\u89c6\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u7684\u5927\u5c0f\u53ca\u9700\u8981\u800c\u5b9a\u3002\u4e00\u822c\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u6bcf\u53ea15\u00d7150\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\uff0c\u7ea6\u88c53\uff5e4\u6beb\u5347\uff081/4\uff5e1/3\u8bd5\u7ba1\u9ad8\u5ea6\uff09\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u6df1\u5c42\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u6bcf\u53ea20\u00d7220\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\u7ea6\u88c512\uff5e15\u6beb\u5347\u3002\u6bcf\u53ea\u9525\u5f62\u74f6\u88c5\u5165\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u4e00\u822c\u4ee5\u5176\u5bb9\u79ef\u7684\u4e00\u534a\u4e3a\u5b9c\u3002
5\u3001\u52a0\u68c9\u585e
\u5206\u88c5\u5b8c\u6bd5\u540e\uff0c\u9700\u8981\u7528\u68c9\u585e\u5835\u4f4f\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u3002\u5835\u68c9\u585e\u7684\u4e3b\u8981\u76ee\u7684\u662f\u8fc7\u6ee4\u7a7a\u6c14\uff0c\u907f\u514d\u6c61\u67d3\u3002\u68c9\u585e\u5e94\u91c7\u7528\u666e\u901a\u65b0\u9c9c\u3001\u5e72\u71e5\u7684\u68c9\u82b1\u5236\u4f5c\uff0c\u4e0d\u8981\u7528\u8131\u8102\u68c9\uff0c\u4ee5\u514d\u56e0\u8131\u8102\u68c9\u5438\u6c34\u4f7f\u68c9\u585e\u65e0\u6cd5\u4f7f\u7528\u3002
\u5236\u4f5c\u68c9\u585e\u65f6\uff0c\u8981\u6839\u636e\u68c9\u585e\u5927\u5c0f\u5c06\u68c9\u82b1\u94fa\u5c55\u6210\u9002\u5f53\u539a\u5ea6\uff0c\u63ea\u53d6\u624b\u638c\u5fc3\u5927\u5c0f\u4e00\u5757\uff0c\u94fa\u5728\u5de6\u624b\u62c7\u6307\u4e0e\u98df\u6307\u5708\u6210\u7684\u5706\u5b54\u4e2d\uff0c\u7528\u53f3\u624b\u98df\u6307\u63d2\u5165\u68c9\u82b1\u4e2d\u90e8\uff0c\u540c\u65f6\u5de6\u624b\u98df\u6307\u4e0e\u59c6\u6307\u7a0d\u7a0d\u7d27\u63e1\uff0c\u5c31\u4f1a\u5f62\u62101\u4e2a\u957f\u68d2\u5f62\u7684\u68c9\u585e\u3002
\u68c9\u585e\u4f5c\u6210\u540e\uff0c\u5e94\u8fc5\u901f\u585e\u5165\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u4e2d\uff0c\u68c9\u585e\u5e94\u7d27\u8d34\u5185\u58c1\u4e0d\u7559\u7f1d\u9699\uff0c\u4ee5\u9632\u7a7a\u6c14\u4e2d\u5fae\u751f\u7269\u6cbf\u76b1\u6298\u4fb5\u5165\u3002\u68c9\u585e\u4e0d\u8981\u8fc7\u7d27\u8fc7\u677e\uff0c\u585e\u597d\u540e\uff0c\u4ee5\u624b\u63d0\u68c9\u585e\u3001\u7ba1\u3001\u74f6\u4e0d\u4e0b\u843d\u4e3a\u5408\u9002\u3002\u68c9\u585e\u76842/3\u5e94\u5728\u7ba1\u5185\u6216\u74f6\u5185\uff0c\u4e0a\u7aef\u9732\u51fa\u5c11\u8bb8\u68c9\u82b1\u4fbf\u4e8e\u62d4\u53d6\u3002\u585e\u597d\u68c9\u585e\u7684\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u5e94\u76d6\u4e0a\u539a\u7eb8\u7528\u7ef3\u6346\u672d\uff0c\u51c6\u5907\u706d\u83cc\u3002
6\u3001\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa
\u57f9\u517b\u57fa\u706d\u83cc\u540e\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u8d81\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u51dd\u56fa\u65f6\u8fdb\u884c\u3002
(1)\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\u653e1\u652f\u957f0.5\uff5e1\u7c73\u5de6\u53f3\u7684\u6728\u6761\uff0c\u539a\u5ea6\u4e3a1\u5398\u7c73\u5de6\u53f3\u3002\u5c06\u8bd5\u7ba1\u5934\u90e8\u6795\u5728\u6728\u6761\u4e0a\uff0c\u4f7f\u7ba1\u5185\u57f9\u517b\u57fa\u81ea\u7136\u503e\u659c\uff0c\u51dd\u56fa\u540e\u5373\u6210\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002
(2)\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5c06\u521a\u521a\u706d\u8fc7\u83cc\u7684\u76db\u6709\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u9525\u5f62\u74f6\u548c\u57f9\u517b\u76bf\u653e\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\uff0c\u70b9\u71c3\u9152\u7cbe\u706f\uff0c\u53f3\u624b\u6258\u8d77\u9525\u5f62\u74f6\u74f6\u5e95\uff0c\u5de6\u624b\u62d4\u4e0b\u68c9\u585e\uff0c\u5c06\u74f6\u53e3\u5728\u9152\u7cbe\u706f\u4e0a\u7a0d\u52a0\u707c\u70e7\uff0c\u5de6\u624b\u6253\u5f00\u57f9\u517b\u76bf\u76d6\uff0c\u53f3\u624b\u8fc5\u901f\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5012\u5165\u57f9\u517b\u76bf\u4e2d\uff0c\u6bcf\u76bf\u7ea6\u5012\u516510\u6beb\u5347\uff0c\u4ee5\u94fa\u6ee1\u76bf\u5e95\u4e3a\u5ea6\u3002
\u94fa\u653e\u57f9\u517b\u57fa\u540e\u653e\u7f6e15\u5206\u949f\u5de6\u53f3\uff0c\u5f85\u57f9\u517b\u57fa\u51dd\u56fa\u540e\uff0c\u518d5\u4e2a\u57f9\u517b\u76bf\u4e00\u53e0\uff0c\u5012\u7f6e\u8fc7\u6765\uff0c\u5e73\u653e\u5728\u6052\u6e29\u7bb1\u91cc\uff0c24\u5c0f\u65f6\u540e\u68c0\u67e5\uff0c\u5982\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u957f\u6742\u83cc\uff0c\u5373\u53ef\u7528\u6765\u57f9\u517b\u5fae\u751f\u7269\u3002
\u53c2\u8003\u8d44\u6599\u6765\u6e90\uff1a\u767e\u5ea6\u767e\u79d1\u2014\u57f9\u517b\u57fa
\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u914d\u5236\uff1a
1\u3001\u79f0\u91cf\u548c\u71ac\u716e
\u6309\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u9010\u4e00\u79f0\u53d6\u53bb\u76ae\u571f\u8c46\u3002\u571f\u8c46\u5207\u6210\u5c0f\u5757\u653e\u5165\u9505\u4e2d\uff0c\u52a0\u6c341000ml\uff0c\u5728\u52a0\u70ed\u5668\u4e0a\u52a0\u70ed\u81f3\u6cb8\u817e\uff0c\u7ef4\u630120-30min\uff0c\u7528\u53ef\u75282\u5c42\u7eb1\u5e03\u8d81\u70ed\u5728\u91cf\u676f\u4e0a\u8fc7\u6ee4\uff0c\u6ee4\u6e23\u5f03\u53d6\u3002
2\u3001\u52a0\u70ed\u6eb6\u89e3
\u628a\u6ee4\u6db2\u653e\u5165\u9505\u4e2d\uff0c\u52a0\u5165\u8461\u8404\u7cd620g\uff0c\u743c\u810215\uff5e20g(\u63d0\u524d\u641e\u788e)\uff0c\u7136\u540e\u653e\u5728\u77f3\u68c9\u7f51\u4e0a\uff0c\u5c0f\u706b\u52a0\u70ed\uff0c\u5e76\u7528\u73bb\u68d2\u4e0d\u65ad\u6405\u62cc\uff0c\u4ee5\u9632\u743c\u8102\u7cca\u5e95\u6216\u6ea2\u51fa\uff0c\u5f85\u743c\u8102\u5b8c\u5168\u6eb6\u89e3\u540e\uff0c\u518d\u8865\u5145\u6c34\u5206\u81f3\u6240\u9700\u91cf\u3002
3\u3001\u5206\u88c5
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4\u3001\u52a0\u68c9\u585e
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1.配料
配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。
2.溶解
淀粉溶解：少量冷水调成糊状
加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH
用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。（有时可以省去）
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml培养基/250ml的
三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度；
固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。
6.包扎
分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养
基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面
灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。
9.贮存
培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用
1.牛肉膏琼脂培养基
牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂 1.5g，水 100ml
在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。
2.牛心培养基
取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在培养基烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
3.根瘤菌培养基
葡萄糖10g 磷酸氢二钾0.5g 碳酸钙3g 硫酸镁0.2g 酵母粉0.4g 琼脂20g 水1000ml 1%结晶紫溶液1ml
先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。
4.淀粉硝酸盐培养基（高氏一号培养基）
可溶性淀粉 2.0g 硝酸钾0.1g 磷酸氢二钾0.05g 氯化钠0.05g 硫酸镁0.05g 硫酸亚铁0.001g 琼脂2g 水100ml
先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。
5.面粉琼脂培养基
面粉60g 琼脂20g 水1000ml
把面粉用水调成糊状，加水到500ml，放在文火上煮30分钟。另取500ml水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。
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