食用菌母种制作视频

  母种是从子实体中提纯,复壮获得母种,人工栽培蘑菇成功的关键是菌种,只有优良的菌种才能达到优质高产。下面我给大家分享了食用菌母种制作视频及制作技术,一起来了解一下吧!

  食用菌母种制作视频

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  常见食用菌品种母种制作技术

  一、常见母种培养基有以下几种:

  1.PDA培养基:马铃薯200g、琼脂1820g、葡萄糖20克g,水1000ml,pH自然。此培养基广泛适用于各种菇类,但不适合草菇、猴头菇菌丝的生长。

  2.马铃薯综合培养基:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g,磷酸二氢钾1.5g,硫酸镁1.5 g,维生素B15~10g,水1000ml,pH自然。此配方适合鸡腿菇、平菇、双孢蘑菇、金针菇、草菇等菇类菌丝生长。如在配方中加入蛋白胨20g,猴头菇菌丝生长会更加旺盛、粗壮。

  二、母种培养基的制作方法如下:

  1.浸煮容器

  一般选用玻璃容器、不锈钢锅或铝锅、搪瓷锅等,生产中不能用铁锅、铜锅,以免铁锈、铜锈混进培养基。

  2.配制方法

  先按照培养基配方准确称量培养基的各种成分,再进行配制。以配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基为例,介绍其培养基配制方法如下。

  选整齐且没有芽变(芽变绿)的马铃薯,洗净去皮并挖掉芽眼,切成薄片,称取200g放入容器内,加入1 000ml水,加热煮开15~30分钟,至酥而不烂的程度,用四层纱布过滤(见图1所示),取其滤液,加开水补足1 000ml。然后在煮汁中加入称量好的琼脂,用小火加热,并不断用玻璃棒搅拌,至琼脂全部融化,再用纱布过滤一次,倒入量杯,用开水补足1 000ml。再加入葡萄糖(或蔗糖),用小火再煮几分钟并用玻璃棒不断搅拌,待葡萄糖(或蔗糖)全部融化,停火倒入量杯并用开水补足1 000ml。在配制过程中,先加入主要元素,再加入微量元素,最后加入维生素或生长素等。如需让培养基清亮透明,可用纱布将煮好的培养基趁热过滤一次,倒入容器,待用。

  3.分装

  培养基配好后,应趁热将其分装到试管内,以免琼脂冷凝。分装时应避免培养基粘附在试管口,若琼脂粘住棉塞,既影响接种又容易滋生杂菌。分装时可用漏斗分装,装入试管中的量,最好不要超过试管长度的1/5,如图2所示。

  4.塞棉塞

  培养基分入试管后,应立即塞好棉塞。应用普通棉花(不能用脱脂棉,因其易吸水变潮,滋生杂菌)做棉塞。棉塞塞入试管的长度应为棉塞长度的2/3,松紧度适中,既能保持通气又能防止杂菌污染,即用手握住棉塞,试管不能掉下,稍微用力才能把棉塞拔下为好,见图3。

  塞好棉塞后,每5支或7支包扎一捆,棉塞部分用牛皮纸或旧报纸用绳捆好。包纸的作用是防止灭菌时冷凝水淋湿棉塞,并防止接种前培养基水分散失或受杂菌污染。

  5.灭菌及摆斜面

  试管包扎好后,放入手提式高压锅的消毒桶内,盖盖灭菌。待压力升至0.05兆帕时,打开排气阀,放净锅内冷空气,再加压至0.15~0.17兆帕,维持30分钟,停止加热。待锅内压力下降为0后,先将锅盖打开一小缝,使热气溢出,停3~5分钟后,再打开锅盖。利用锅内的余热将棉塞烘干,防止棉塞受潮。待温度降至60℃左右,再摆成斜面,以防止冷凝水在试管内积聚过多。

  摆放斜面时,试管塞棉塞的一头下面垫厚1厘米的木板或钢板等,斜面长度不要超过试管长度的1/2,待冷却后即成斜面培养基,如图4、图5所示。

  6.无菌培养

  灭菌后的培养基,应随机抽取几支放在25℃左右的恒温箱内培养2~3天,若无杂菌生长,便可做菌种使用。

  三、母种的转管与培养

  母种的转管培养即将一支长满菌丝的试管在无菌操作下,分别转接到多只试管中培养。一般每支母种可扩接30~50支,生产上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。一般每支又可扩接成20~25支子代母种。母种的转管与培养需注意两个关键问题,一是转管接种箱要严格消毒,二是转管次数不宜过多,因转管代数过多易使菌种生活力降低,转管次数在4次以内为宜。

  1.接种箱消毒

  首先用金星消毒液或其他消毒药品,把接种箱内擦拭干净,然后放入分离所得的母种和试管培养基、接种工具、酒精灯、火柴及盛放高锰酸钾与福尔马林反应的碗(按福尔马林10ml/m3+高锰酸钾5g放入所盛碗内),立即封闭接种箱,让其发生反应,密闭熏蒸30分钟。也可用烟雾消毒盒5~6g/m3,密闭熏蒸30分钟。

  2.转管

  操作者在转管前,应穿好工作服,剪好指甲,洗净手。将手通过袖筒伸入接种箱内,再用酒精棉球把手及裸露的手腕擦拭一遍。点燃酒精灯,左手持1支分离母种试管和1支斜面培养基,右手拿接种钩(见图6-a),首先将接种钩在酒精灯外焰上灼烧灭菌,接着用右手小指和无名指把斜面母种上的棉塞在火焰上拔掉(见图6-b、图6-c),将接种钩伸进斜面菌种试管,稍冷却后,将母种斜面上的老菌块及干燥部分挖掉,弃之不用,然后取一小块麦粒大小(1cm×0.3cm)的菌种块(一定要带培养基)移接到斜面培养基的中央,抽出接种针,灼烧试管口,迅速将棉塞通过火焰烤一下塞上(见图6-d、图6-e、图6-f)。在试管上贴上标签。以此类推。直至把接种箱内斜面培养基接完为止,一般由一个人独立完成。此操作中既要注意试管口和接种钩始终不要离开火焰无菌区,还要注意避免火焰烧死菌种。

  3.培养

  菌种接好后,直接转入培养箱或培菌室内培养,温度调节在24~28℃,并注意培养室内的通风换气,遮掩窗户,避免光线过强,经常检查,及时拣出杂菌污染的试管,确保菌种纯度。菌种菌丝长满试管后,或及时使用,或放置在4℃以下的冰箱内低温保藏。

  值得注意的是:母种培养基制作过程中,严格按照无菌操作规程进行。选好培养基配方,按其比例严格称量原料,不可多也不可少,否则菌丝生长会受到严重影响。制作好的母种培养基,可用于母种的分离培养、提纯复壮及转管、保藏等。

  四、纯种分离

  生产上常用组织分离法进行母种菌种的分离。组织分离法是从种菇上切去一小块组织移接于试管斜面培养基,经培养获得菌种的方法。该方法具有操作简单,有利于保持原来品系的遗传特性,成功率高等特点。

  1.种菇选择 选种菇时,应到生长旺盛、无严重病虫害的丰产区,采取菇朵圆整、菇体洁白、菌盖肥厚且紧密硬实、菇柄短且粗壮,具有原品种优良性状、6~7成熟的第二茬单生菇作为种菇。

  2.种菇消毒 种菇选好后,去除表面杂质及菌柄,用75%的酒精棉球擦试种菇表面,然后把斜面试管随同接种工具(如接种刀、接种铲、接种钩、镊子等)一同放入接种箱内,用气雾消毒剂5g/m3点燃密闭熏蒸30分钟。

  3.分离 用消毒过的接种刀,把种菇纵剖为二,在菇盖与菇柄连接处的部位,切取绿豆粒大小(约0.2cm×0.2cm)的菌肉,移接到斜面培养基的中央。然后把接好的试管放入恒温25℃的无菌环境中培养,2~3天后,组织块就能长出白色菌丝,经检查、优选,选出菌丝生长旺盛且无杂菌的试管,作为母种,用于生产或保藏。



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