举例说明一种培养基的配方和制作过程 配制培养基的步骤?

\u4e00\u7ea7\u79cd\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u6709\u51e0\u79cd\uff1f\u5982\u4f55\u5236\u4f5c\uff1f

\u94f6\u8033\u4e00\u7ea7\u79cd\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u4e3a\u743c\u8102\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u6728\u5c51\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u6728\u5c51\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u548c\u5236\u4f5c\u65b9\u6cd5\u4e0e\u539f\u79cd\u3001\u683d\u57f9\u79cd\u76f8\u540c\uff0c\u4e0b\u9762\u4ecb\u7ecd\u9002\u4e8e\u94f6\u8033\u4e00\u7ea7\u79cd\u768410\u79cd\u743c\u8102\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u3002
\uff081\uff09PDA\u57f9\u517b\u57fa
\u9a6c\u94c3\u85af250\u514b\uff0c\u8461\u8404\u7cd625\u514b\uff0c\u786b\u9178\u95410.5\u514b\uff0c\u7ef4\u751f\u7d20B110\u6beb\u514b\uff0c\u743c\u810220\u514b\uff0c\u6c341000\u6beb\u5347\u3002
\u5c06\u9a6c\u94c3\u85af\u6d17\u51c0\u53bb\u76ae\uff08\u5df2\u53d1\u82bd\u7684\u8981\u6316\u6389\u82bd\u773c\uff09\uff0c\u79f0\u53d6250\u514b\u5207\u6210\u8584\u7247\uff0c\u7f6e\u4e8e\u94dd\u9505\u4e2d\u52a0\u6c34\u716e\u6cb830\u5206\u949f\uff0c\u75284\u5c42\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u53d6\u6c41\uff0c\u7528\u6c34\u8865\u8db31000\u6beb\u5347\uff1b\u518d\u79f0\u53d6\u743c\u810220\u514b\uff0c\u7528\u526a\u5200\u526a\u788e\u540e\u52a0\u5165\u9a6c\u94c3\u85af\u6c41\u6db2\u5185\uff0c\u7ee7\u7eed\u52a0\u70ed\uff0c\u5e76\u6405\u62cc\uff0c\u4f7f\u743c\u8102\u5168\u90e8\u6eb6\u5316\uff1b\u52a0\u5165\u8461\u8404\u7cd6\uff0c\u7a0d\u716e\u51e0\u5206\u949f\u540e\uff0c\u75282\u5c42\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\uff0c\u8c03\u8282\u9178\u78b1\u5ea6\u4e3apH5.6\uff1b\u8d81\u70ed\u5206\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u5185\uff0c\u88c5\u91cf\u4e3a\u8bd5\u7ba1\u957f\u5ea6\u76842/5\uff0c\u7ba1\u53e3\u585e\u4e0a\u68c9\u585e\uff0c\u7acb\u653e\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u7b3c\u4e0a\u3002\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u5e94\u6ce8\u610f\u4e0d\u8981\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u7c98\u5728\u8bd5\u7ba1\u53e3\u548c\u7ba1\u58c1\u4e0a\uff0c\u4ee5\u514d\u53d1\u751f\u6742\u83cc\u611f\u67d3\u3002
\uff082\uff09PSA\u57f9\u517b\u57fa
\u9a6c\u94c3\u85af200\u514b\uff0c\u8517\u7cd620\u514b\uff0c\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94be3\u514b\uff0c\u743c\u810220\u514b\uff0c\u6c341000\u6beb\u5347\u3002
\u5236\u4f5c\u65b9\u6cd5\u4e0e\u57f9\u517b\u57fa\u914d\u65b9\u4e4b\u4e00\u76f8\u4f3c\uff0c\u53ea\u662f\u5728\u52a0\u5165\u8461\u8404\u7cd6\u66f4\u6362\u4e3a\u8517\u7cd6\uff0c\u540c\u65f6\u52a0\u5165\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94be\uff0c\u716e\u6cb8\u878d\u5316\u540e\u8fc7\u6ee4\u53d6\u6c41\uff0c\u8d81\u70ed\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u4e2d\uff0c\u585e\u597d\u68c9\u585e\uff0c\u76f4\u7acb\u653e\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u7b3c\u4e0a\u3002
\uff083\uff09CMA\u57f9\u517b\u57fa
\u7c73\u7c8960\u514b\uff0c\u8461\u8404\u7cd610\u514b\uff0c\u743c\u810220\u514b\uff0c\u6c341000\u6beb\u5347\u3002
\u914d\u5236\u65f6\u5148\u628a\u7389\u7c73\u7c89\u8c03\u6210\u7cca\u72b6\uff0c\u518d\u52a0\u51651000\u6beb\u5347\u6c34\uff0c\u6405\u62cc\u5747\u5300\u540e\uff0c\u6587\u706b\u716e\u6cb820\u5206\u949f\uff0c\u7528\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u53d6\u6c41\u3002\u518d\u52a0\u5165\u743c\u8102\u3001\u8461\u8404\u7cd6\u7b49\uff0c\u5168\u90e8\u6eb6\u5316\u540e\uff0c\u8c03\u8282pH\u4e3a5.6\uff0c\u7136\u540e\u5206\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u5185\uff0c\u585e\u597d\u68c9\u585e\u3002
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\uff084\uff09\u94f6\u8033\u6728\u5c51\u83cc\u79cd2\u74f6\uff08750\u6beb\u5347\uff09\uff0c\u8fc7\u78f7\u9178\u94991\u514b\u6216\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94be3\u514b\uff0c\u743c\u810225\u514b\uff0c\u6c341000\u6beb\u5347\u3002
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\u914d\u5236\u65f6\uff0c\u7389\u7c73\u7c89\u52a0\u6c34250\u6beb\u5347\u716e\u6cb820\u5206\u949f\uff0c\u75286\u5c42\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u53bb\u6e23\uff0c\u53d6\u5176\u6ee4\u6c41\uff1b\u8865\u8db3\u6e05\u6c341000\u6beb\u5347\uff0c\u5176\u4ed6\u64cd\u4f5c\u540c\u4e0a\u3002
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\u914d\u5236\u65f6\uff0c\u5c06\u9ec4\u8c46\u7c89\u8c03\u6210\u7cca\u72b6\uff0c\u518d\u52a0\u51651000\u6beb\u5347\u6c34\uff0c\u6405\u81f3\u743c\u8102\u5168\u90e8\u6eb6\u5316\uff1b\u518d\u52a0\u5165\u8461\u8404\u7cd6\u548c\u78f7\u9178\u4e8c\u6c27\u94be\uff0c\u5145\u5206\u6405\u62cc\u5747\u5300\uff1b\u8d81\u70ed\u5206\u88c5\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u4e2d\uff0c\u585e\u597d\u68c9\u585e\uff0c\u7acb\u653e\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u7b3c\u4e2d\u3002
\uff088\uff09\u3001\uff089\uff09\u4e24\u79cd\u914d\u65b9\u9002\u5408\u57f9\u517b\u7fbd\u6bdb\u72b6\u8033\u53cb\u83cc\u4e1d\u751f\u957f\u53d1\u80b2\u3002
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\u914d\u5236\u65f6\uff0c\u5c06\u914d\u65b9\u4e2d\u5316\u5b66\u836f\u54c1\u7f6e\u4e8e\u70e7\u676f\u4e2d\uff0c\u7528\u5c11\u91cf\u6c34\u6eb6\u5316\uff1b\u91cf\u53d61000\u6beb\u5347\u84b8\u998f\u6c34\uff0c\u5c06\u743c\u8102\u788e\u7247\u716e\u6eb6\uff1b\u518d\u5c06\u6eb6\u5316\u7684\u5316\u5b66\u836f\u54c1\u5012\u5165\u743c\u8102\u6db2\u4e2d\u6405\u5300\uff1b\u8865\u8db3\u6c34\u81f31000\u6beb\u5347\uff0c\u5176\u4ed6\u64cd\u4f5c\u6309\u5e38\u89c4\u3002
\u672c\u914d\u65b9\u9002\u4e8e\u94f6\u8033\u82bd\u5b62\u4e0e\u8033\u53cb\u83cc\u4e1d\u4ea4\u5408\u3002

1\u3001\u914d\u5236\u6eb6\u6db2
\u5411\u5bb9\u5668\u5185\u52a0\u5165\u6240\u9700\u6c34\u91cf\u7684\u4e00\u90e8\u5206\uff0c\u6309\u7167\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u914d\u65b9\uff0c\u79f0\u53d6\u5404\u79cd\u539f\u6599\uff0c\u4f9d\u6b21\u52a0\u5165\u4f7f\u5176\u6eb6\u89e3\uff0c\u6700\u540e\u8865\u8db3\u6240\u9700\u6c34\u5206\u3002\u5bf9\u86cb\u767d\u80e8\u3001\u8089\u818f\u7b49\u7269\u8d28\uff0c\u9700\u52a0\u70ed\u6eb6\u89e3\uff0c\u52a0\u70ed\u8fc7\u7a0b\u6240\u84b8\u53d1\u7684\u6c34\u5206\uff0c\u5e94\u5728\u5168\u90e8\u539f\u6599\u6eb6\u89e3\u540e\u52a0\u6c34\u8865\u8db3\u3002
\u914d\u5236\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u5148\u5c06\u4e0a\u8ff0\u5df2\u914d\u597d\u7684\u6db2\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u716e\u6cb8\uff0c\u518d\u5c06\u79f0\u597d\u7684\u743c\u8102\u52a0\u5165\uff0c\u7ee7\u7eed\u52a0\u70ed\u81f3\u5b8c\u5168\u878d\u5316\u3002\u5e76\u4e0d\u65ad\u6405\u62cc\uff0c\u4ee5\u514d\u743c\u8102\u7cca\u5e95\u70e7\u7126\u3002
2\u3001\u8c03\u8282pH\u503c 
\u7528pH\u8bd5\u7eb8\uff08\u6216pH\u7535\u4f4d\u8ba1\u3001\u6c22\u79bb\u5b50\u6d53\u5ea6\u6bd4\u8272\u8ba1\uff09\u6d4b\u8bd5\u57f9\u517b\u57fa\u7684pH\u503c\uff0c\u5982\u4e0d\u7b26\u5408\u9700\u8981\uff0c\u53ef\u752810%HCl\u621610%NaOH\u8fdb\u884c\u8c03\u8282\uff0c\u76f4\u5230\u8c03\u8282\u5230\u914d\u65b9\u8981\u6c42\u7684pH\u503c\u4e3a\u6b62\u3002
3\u3001\u8fc7\u6ee4
\u7528\u6ee4\u7eb8\u3001\u7eb1\u5e03\u6216\u68c9\u82b1\u8d81\u70ed\u5c06\u5df2\u914d\u597d\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u8fc7\u6ee4\u3002\u7528\u7eb1\u5e03\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u6700\u597d\u6298\u53e0\u6210\u516d\u5c42\uff0c\u7528\u6ee4\u7eb8\u8fc7\u6ee4\u65f6\uff0c\u53ef\u5c06\u6ee4\u7eb8\u6298\u53e0\u6210\u74e6\u68f1\u5f62\uff0c\u94fa\u5728\u6f0f\u6597\u4e0a\u8fc7\u6ee4\u3002
4\u3001\u5206\u88c5
\u5df2\u8fc7\u6ee4\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u5e94\u8fdb\u884c\u5206\u88c5\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u8bd5\u7ba1\u4e2d\u3002\u5982\u679c\u8981\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u6216\u6db2\u4f53\u3001\u534a\u56fa\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u5219\u987b\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5206\u88c5\u4e8e\u9525\u5f62\u74f6\u5185\u3002
\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u4e00\u624b\u634f\u677e\u5f39\u7c27\u5939\uff0c\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u6d41\u51fa\uff0c\u53e6\u4e00\u53ea\u624b\u63e1\u4f4f\u51e0\u652f\u8bd5\u7ba1\u6216\u9525\u5f62\u74f6\uff0c\u4f9d\u6b21\u63a5\u53d6\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5206\u88c5\u65f6\uff0c\u6ce8\u610f\u4e0d\u8981\u4f7f\u57f9\u517b\u57fa\u7c98\u9644\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\uff0c\u4ee5\u514d\u6d78\u6e7f\u68c9\u585e\u5f15\u8d77\u6742\u83cc\u6c61\u67d3\u3002
\u88c5\u5165\u8bd5\u7ba1\u7684\u57f9\u517b\u57fa\u91cf\uff0c\u89c6\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u7684\u5927\u5c0f\u53ca\u9700\u8981\u800c\u5b9a\u3002\u4e00\u822c\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u65f6\uff0c\u6bcf\u53ea15\u00d7150\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\uff0c\u7ea6\u88c53\uff5e4\u6beb\u5347\uff081/4\uff5e1/3\u8bd5\u7ba1\u9ad8\u5ea6\uff09\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u6df1\u5c42\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u6bcf\u53ea20\u00d7220\u6beb\u7c73\u7684\u8bd5\u7ba1\u7ea6\u88c512\uff5e15\u6beb\u5347\u3002\u6bcf\u53ea\u9525\u5f62\u74f6\u88c5\u5165\u7684\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u4e00\u822c\u4ee5\u5176\u5bb9\u79ef\u7684\u4e00\u534a\u4e3a\u5b9c\u3002
5\u3001\u52a0\u68c9\u585e 
\u5206\u88c5\u5b8c\u6bd5\u540e\uff0c\u9700\u8981\u7528\u68c9\u585e\u5835\u4f4f\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u3002\u5835\u68c9\u585e\u7684\u4e3b\u8981\u76ee\u7684\u662f\u8fc7\u6ee4\u7a7a\u6c14\uff0c\u907f\u514d\u6c61\u67d3\u3002\u68c9\u585e\u5e94\u91c7\u7528\u666e\u901a\u65b0\u9c9c\u3001\u5e72\u71e5\u7684\u68c9\u82b1\u5236\u4f5c\uff0c\u4e0d\u8981\u7528\u8131\u8102\u68c9\uff0c\u4ee5\u514d\u56e0\u8131\u8102\u68c9\u5438\u6c34\u4f7f\u68c9\u585e\u65e0\u6cd5\u4f7f\u7528\u3002
\u5236\u4f5c\u68c9\u585e\u65f6\uff0c\u8981\u6839\u636e\u68c9\u585e\u5927\u5c0f\u5c06\u68c9\u82b1\u94fa\u5c55\u6210\u9002\u5f53\u539a\u5ea6\uff0c\u63ea\u53d6\u624b\u638c\u5fc3\u5927\u5c0f\u4e00\u5757\uff0c\u94fa\u5728\u5de6\u624b\u62c7\u6307\u4e0e\u98df\u6307\u5708\u6210\u7684\u5706\u5b54\u4e2d\uff0c\u7528\u53f3\u624b\u98df\u6307\u63d2\u5165\u68c9\u82b1\u4e2d\u90e8\uff0c\u540c\u65f6\u5de6\u624b\u98df\u6307\u4e0e\u59c6\u6307\u7a0d\u7a0d\u7d27\u63e1\uff0c\u5c31\u4f1a\u5f62\u62101\u4e2a\u957f\u68d2\u5f62\u7684\u68c9\u585e\u3002
\u68c9\u585e\u4f5c\u6210\u540e\uff0c\u5e94\u8fc5\u901f\u585e\u5165\u7ba1\u53e3\u6216\u74f6\u53e3\u4e2d\uff0c\u68c9\u585e\u5e94\u7d27\u8d34\u5185\u58c1\u4e0d\u7559\u7f1d\u9699\uff0c\u4ee5\u9632\u7a7a\u6c14\u4e2d\u5fae\u751f\u7269\u6cbf\u76b1\u6298\u4fb5\u5165\u3002\u68c9\u585e\u4e0d\u8981\u8fc7\u7d27\u8fc7\u677e\uff0c\u585e\u597d\u540e\uff0c\u4ee5\u624b\u63d0\u68c9\u585e\u3001\u7ba1\u3001\u74f6\u4e0d\u4e0b\u843d\u4e3a\u5408\u9002\u3002\u68c9\u585e\u76842/3\u5e94\u5728\u7ba1\u5185\u6216\u74f6\u5185\uff0c\u4e0a\u7aef\u9732\u51fa\u5c11\u8bb8\u68c9\u82b1\u4fbf\u4e8e\u62d4\u53d6\u3002\u585e\u597d\u68c9\u585e\u7684\u8bd5\u7ba1\u548c\u9525\u5f62\u74f6\u5e94\u76d6\u4e0a\u539a\u7eb8\u7528\u7ef3\u6346\u672d\uff0c\u51c6\u5907\u706d\u83cc\u3002
6\u3001\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa
\u57f9\u517b\u57fa\u706d\u83cc\u540e\uff0c\u5982\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u548c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\uff0c\u987b\u8d81\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u51dd\u56fa\u65f6\u8fdb\u884c\u3002

(1)\u5236\u4f5c\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\u653e1\u652f\u957f0.5\uff5e1\u7c73\u5de6\u53f3\u7684\u6728\u6761\uff0c\u539a\u5ea6\u4e3a1\u5398\u7c73\u5de6\u53f3\u3002\u5c06\u8bd5\u7ba1\u5934\u90e8\u6795\u5728\u6728\u6761\u4e0a\uff0c\u4f7f\u7ba1\u5185\u57f9\u517b\u57fa\u81ea\u7136\u503e\u659c\uff0c\u51dd\u56fa\u540e\u5373\u6210\u659c\u9762\u57f9\u517b\u57fa\u3002
(2)\u5236\u4f5c\u5e73\u677f\u57f9\u517b\u57fa\u3002\u5c06\u521a\u521a\u706d\u8fc7\u83cc\u7684\u76db\u6709\u57f9\u517b\u57fa\u7684\u9525\u5f62\u74f6\u548c\u57f9\u517b\u76bf\u653e\u5728\u5b9e\u9a8c\u53f0\u4e0a\uff0c\u70b9\u71c3\u9152\u7cbe\u706f\uff0c\u53f3\u624b\u6258\u8d77\u9525\u5f62\u74f6\u74f6\u5e95\uff0c\u5de6\u624b\u62d4\u4e0b\u68c9\u585e\uff0c\u5c06\u74f6\u53e3\u5728\u9152\u7cbe\u706f\u4e0a\u7a0d\u52a0\u707c\u70e7\uff0c\u5de6\u624b\u6253\u5f00\u57f9\u517b\u76bf\u76d6\uff0c\u53f3\u624b\u8fc5\u901f\u5c06\u57f9\u517b\u57fa\u5012\u5165\u57f9\u517b\u76bf\u4e2d\uff0c\u6bcf\u76bf\u7ea6\u5012\u516510\u6beb\u5347\uff0c\u4ee5\u94fa\u6ee1\u76bf\u5e95\u4e3a\u5ea6\u3002
\u94fa\u653e\u57f9\u517b\u57fa\u540e\u653e\u7f6e15\u5206\u949f\u5de6\u53f3\uff0c\u5f85\u57f9\u517b\u57fa\u51dd\u56fa\u540e\uff0c\u518d5\u4e2a\u57f9\u517b\u76bf\u4e00\u53e0\uff0c\u5012\u7f6e\u8fc7\u6765\uff0c\u5e73\u653e\u5728\u6052\u6e29\u7bb1\u91cc\uff0c24\u5c0f\u65f6\u540e\u68c0\u67e5\uff0c\u5982\u57f9\u517b\u57fa\u672a\u957f\u6742\u83cc\uff0c\u5373\u53ef\u7528\u6765\u57f9\u517b\u5fae\u751f\u7269\u3002
\u53c2\u8003\u8d44\u6599\u6765\u6e90\uff1a\u767e\u5ea6\u767e\u79d1\u2014\u57f9\u517b\u57fa

植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。

大量元素(母液Ⅰ) mg/L

NH4NO3 33 000

KNO3 38 000

CaCl2·2H2O 8 800

MgSO4·7H2O 7 400

KH2PO4 3 400

微量元素(母液Ⅱ)

KI 166

H3BO3 1 240

MnSO4·4H2O 4 460

ZnSO4·7H2O 1 720

Na2MoO4·2H2O 50

CuSO4·5H2O 5

CoCl2·6H2O 5

铁盐(母液Ⅲ)

FeSO4·7H2O 5 560

Na2-EDTA·2H2O 7 460

有机成分(母液Ⅳ)

ⅣA

肌醇 20 000

ⅣB

烟酸 100

盐酸吡哆醇(维生素B6) 100

盐酸硫胺素(维生素B1) 100

甘氨酸 400

以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5�5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。

MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6�苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0�1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0�1 mg/mL的母液。

配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4�D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中。

配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。

溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蒸糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。

需要注意的是,在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。

调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5�4~7�0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5�8为止(培养基的pH必须严格控制在5�8)。

培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培养基,可分装25~30瓶。

培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。

高压灭菌 培养基的高压灭菌包括以下几个步骤。

第一,码放锥形瓶。将装有培养基的锥形瓶直立于金属小筐中,再放入高压蒸气灭菌锅内。如果没有金属小筐,可以在两层锥形瓶之间放一块玻璃板隔开。

第二,放置其他需要灭菌的物品。将其他需要灭菌的物品也放入高压蒸气灭菌锅内,如装有蒸馏水的锥形瓶、带螺口盖的玻璃瓶、烧杯、广口瓶(以上物品都要用牛皮纸封口),用牛皮纸包裹的培养皿、剪刀、解剖刀、镊子、滤纸、铅笔等。

第三,灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕,盖上锅盖。在98 kPa、121.3 ℃下,灭菌20 min。

灭菌后取出锥形瓶,让其中的培养基自然冷却凝固。最好放置1 d后再使用。

从知道复来的,我可肯定资料正确,因为以前做过.

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