荧光原位杂交(FISH)的基本原理是什么？
在20世纪80年代末期，荧光原位杂交(FISH)技术崭露头角，它是基于早期放射性原位杂交技术的非放射性分子细胞遗传学创新。FISH通过荧光标记技术，取代了传统的同位素标记，形成了一种新型的原位杂交方法[1, 2]。探针的工作原理是与一种媒介分子（reporter molecule）结合，接着通过免疫细胞化学步骤，将荧光染料精确地连接到DNA（或RNA）探针上。其基本操作是将标记过的DNA探针直接与染色体或DNA切片进行杂交，通过与荧光素分子配对的单克隆抗体，对DNA序列在染色体或切片上的定位、定性分析以及相对定量研究提供精确的依据。
FISH技术的优势明显，包括安全性高、速度快、灵敏度出众，探针可以长期保存，并且能够同时呈现多种颜色。它不仅适用于中期细胞分裂的观察，也能在间期核中显示信息。在此基础上，荧光原位杂交技术进一步发展，诞生了多彩色荧光原位杂交和染色质纤维荧光原位杂交技术，这些新技术极大地丰富了基因定位和表达的研究手段。
扩展资料
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交。
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