什么是RNA原位杂交？
原位杂交，即in situ hybridization，是一种生物学技术，它通过将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行结合，来确定特定基因或RNA在特定位置的表达情况。这项技术的关键是利用DNA或RNA探针，它们能够与细胞内的互补链进行碱基配对，形成可见的杂交体。
其中，RNA原位核酸杂交，或称RNA原位杂交组织化学，是专门用于检测细胞和组织中RNA表达的技术。它使用cRNA或寡核苷酸探针，这些探针能识别并结合细胞内的特定mRNA、rRNA或tRNA。通过显色反应，杂交体在显微镜下清晰可见，使得定性、定位和定量的基因分析成为可能。它在基因分析和诊断中的应用已经超越了DNA原位杂交，特别是在低丰度和罕见mRNA表达的研究中，成为分子病理学领域的核心技术。
而FISH（Fluorescence In Situ Hybridization）是原位杂交技术的一个分支，探针被荧光标记，使其在80年代末期得以发展，并逐渐应用于临床诊断。FISH的基本原理是荧光标记的探针与靶核酸在特定温度下结合，然后通过荧光显微镜观察，无需破坏样品的原始位置，就能进行靶核酸的分析。DNA荧光标记探针是FISH中最常用的，它们能够用于染色体和基因水平的详细分析，具有无污染、高灵敏度和多色观察的优点，能够同时使用多个探针，显著提高了工作效率。
扩展资料
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交。
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