抗体的制备方法有哪些？ 抗体药物的制备工艺路线有哪些？如何选择使用
\u6297\u4f53\u7684\u5236\u5907\u65b9\u6cd5\u6709\u54ea\u4e9b\u514d\u75ab\u9014\u5f84\u6709\u591a\u79cd\u591a\u6837\uff0c\u5982\u9759\u8109\u5185\u3001\u8179\u8154\u5185\u3001\u808c\u8089\u5185\u3001\u76ae\u5185\u3001\u76ae\u4e0b\u3001\u6dcb\u5df4\u7ed3\u5185\u6ce8\u5c04\u7b49\uff0c\u4e00\u822c\u5e38\u7528\u76ae\u4e0b\u6216\u80cc\u90e8\u591a\u70b9\u76ae\u5185\u6ce8\u5c04\uff0c\u6bcf\u70b9\u6ce8\u5c040.1ml\u5de6\u53f3\u3002\u9014\u5f84\u7684\u9009\u62e9\u51b3\u5b9a\u4e8e\u6297\u539f\u7684\u751f\u7269\u5b66\u7279\u6027\u548c\u7406\u5316\u7279\u6027\uff0c\u5982\u6fc0\u7d20\u3001\u9176\u3001\u6bd2\u7d20\u7b49\u751f\u7269\u5b66\u6d3b\u6027\u6297\u539f\uff0c\u4e00\u822c\u4e0d\u5b9c\u91c7\u7528\u9759\u8109\u6ce8\u5c04\u3002\u5bb6\u5154\u662f\u6700\u5e38\u7528\u4ee5\u4ea7\u751f\u6297\u4f53\u7684\u52a8\u7269\uff0c\u56e0\u6b64\u8fd9\u91cc\u4e3b\u8981\u8ba8\u8bba\u5154\u8840\u7684\u6536\u96c6\u3002\u7f8a\u7b49\u8f83\u5927\u52a8\u7269\u4ee5\u9888\u9759\u8109\u3001\u52a8\u8109\u53d6\u8840\uff0c\u9f20\u7b49\u5c0f\u52a8\u7269\u53d6\u8840\u53ef\u53c2\u9605\u6709\u5173\u8d44\u6599\u3002\u53d6\u5154\u8840\u6709\u4e24\u79cd\u65b9\u6cd5\uff0c\u4e00\u662f\u8033\u7f18\u9759\u8109\u6216\u8033\u52a8\u8109\u653e\u8840\uff0c\u4e00\u662f\u9888\u52a8\u8109\u5165\u8840\uff0c\u4e5f\u53ef\u5fc3\u810f\u91c7\u8840\u3002\u53d6\u52a8\u8109\u6216\u9759\u8109\u653e\u8840\u65f6\uff0c\u5c06\u5154\u653e\u5165\u4e00\u4e2a\u7279\u9020\u7684\u6728\u5323\u6216\u7b3c\u5185\uff0c\u8033\u9732\u4e8e\u7bb1(\u7b3c)\u5916\uff0c\u4e5f\u53ef\u7531\u53e6\u4e00\u4eba\u6349\u4f4f\u5154\u8eab\u3002\u526a\u53bb\u8033\u7f18\u7684\u6bdb\uff0c\u7528\u5c11\u8bb8\u4e8c\u7532\u82ef\u6d82\u62b9\u8033\u5ed3\uff0c30s\u540e\uff0c\u8033\u8840\u7ba1\u6269\u5f20\u3001\u5145\u8840\u3002\u7528\u624b\u8f7b\u62c9\u8033\u5c16\uff0c\u4ee5\u5355\u9762\u5243\u987b\u5200\u6216\u5c16\u7684\u624b\u672f\u5200\u7247\uff0c\u5feb\u901f\u5207\u5f00\u52a8\u8109\u6216\u9759\u8109\uff0c\u8840\u6db2\u5373\u6d41\u51fa\uff0c\u6bcf\u6b21\u53ef\u6536\u96c630~40ml\u3002\u7136\u540e\u7528\u68c9\u7403\u538b\u8feb\u6b62\u8840\uff0c\u51dd\u8840\u540e\u6d17\u53bb\u4e8c\u7532\u82ef\u3002\u4e8c\u661f\u671f\u540e\uff0c\u53ef\u5728\u53e6\u4e00\u8033\u653e\u8840\u3002\u6b64\u6cd5\u53ef\u53cd\u590d\u591a\u6b21\u653e\u8840\u3002\u9888\u52a8\u8109\u653e\u8840\u65f6\uff0c\u5c06\u5154\u4ef0\u5367\uff0c\u56fa\u5b9a\u4e8e\u5154\u53f0\uff0c\u526a\u53bb\u9888\u90e8\u7684\u6bdb\uff0c\u5207\u5f00\u76ae\u80a4\uff0c\u66b4\u9732\u9888\u52a8\u8109\uff0c\u63d2\u7ba1\uff0c\u653e\u8840\u3002\u653e\u8840\u8fc7\u7a0b\u4e2d\u8981\u4e25\u683c\u6309\u65e0\u83cc\u8981\u6c42\u8fdb\u884c\u3002
\u6536\u96c6\u7684\u8840\u6db2\u7f6e\u4e8e\u5ba4\u6e29\u4e0b1h\u5de6\u53f3\uff0c\u51dd\u56fa\u540e\uff0c\u7f6e4\u2103\u4e0b\uff0c\u8fc7\u591c(\u5207\u52ff\u51b0\u51bb)\u6790\u51fa\u8840\u6e05\uff0c\u79bb\u5fc3\uff0c4000rpm\uff0c10min\u3002\u5728\u65e0\u83cc\u6761\u4ef6\uff0c\u5438\u51fa\u8840\u6e05\uff0c\u5206\u88c5(0.05~0.2ml)\uff0c\u8d2e\u4e8e-40\u2103\u4ee5\u4e0b\u51b0\u7bb1\uff0c\u6216\u51bb\u5e72\u540e\u8d2e\u5b58\u4e8e4\u3002C\u51b0\u7bb1\u4fdd\u5b58\u3002
\u5355\u514b\u9686\u6297\u4f53\u662f\u5229\u7528\u4f53\u5916\u57f9\u517b\u6280\u672f\u751f\u4ea7\u7684\u6297\u4f53,\u5b83\u7531\u4e8e\u662f\u7531\u4e00\u4e2a\u7ec6\u80de\u5206\u88c2\u800c\u6765\u7684,\u6240\u6709\u53ea\u542b\u6709\u4e00\u79cd\u6297\u4f53. \u5355\u514b\u9686\u6297\u4f53\u7684\u4f18\u70b9\u662f\uff1a\u7406\u5316\u6027\u72b6\u9ad8\u5ea6\u5747\u4e00\u3001\u751f\u7269\u6d3b\u6027\u5355\u4e00\u3001\u4e0e\u6297\u539f\u7ed3\u5408\u7684\u7279\u5f02\u6027\u5f3a\u3001\u4fbf\u4e8e\u4eba\u4e3a\u5904\u7406\u548c\u8d28\u91cf\u63a7\u5236,\u5e76\u4e14\u6765\u6e90\u5bb9\u6613.\u8fd9\u4e9b\u4f18\u70b9\u4f7f\u5176\u5e7f\u6cdb\u5e94\u7528\u4e8e\u6297\u80bf\u7624\u7b49\u9886\u57df \u7f3a\u70b9\u5c31\u662f\u751f\u6210\u7684\u6297\u4f53\u53ea\u9488\u5bf91\u79cd\u6297\u539f\u51b3\u5b9a\u7c07,\u6bd4\u8f83\u5355\u4e00. \u57fa\u672c\u8fc7\u7a0b\uff1a1.\u6297\u539f\u7684\u5904\u74062.\u5728\u5c0f\u9f20\u4f53\u5185\u690d\u5165\u6297\u539f\uff08\u514d\u75ab\uff093.\u53d6\u514d\u75ab\u9f20\u7684B\u6dcb\u5df4\u7ec6\u80de4.\u4e0e\u9f20\u7684\u9aa8\u9ad3\u7624\u7ec6\u80de\u7528PEG\u7ec6\u80de\u878d\u54085.\u5728\u591a\u5b54\u677f\u4e0a\u7b5b\u9009. \u6742\u4ea4\u7624\u7ec6\u80de\u5c31\u662f\u4e0a\u9762\u768434\u4e24\u6b65
免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。家兔是最常用以产生抗体的动物，因此这里主要讨论兔血的收集。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血，鼠等小动物取血可参阅有关资料。取兔血有两种方法，一是耳缘静脉或耳动脉放血，一是颈动脉入血，也可心脏采血。取动脉或静脉放血时，将兔放入一个特造的木匣或笼内，耳露于箱(笼)外，也可由另一人捉住兔身。剪去耳缘的毛，用少许二甲苯涂抹耳廓，30s后，耳血管扩张、充血。用手轻拉耳尖，以单面剃须刀或尖的手术刀片，快速切开动脉或静脉，血液即流出，每次可收集30~40ml。然后用棉球压迫止血，凝血后洗去二甲苯。二星期后，可在另一耳放血。此法可反复多次放血。颈动脉放血时，将兔仰卧，固定于兔台，剪去颈部的毛，切开皮肤，暴露颈动脉，插管，放血。放血过程中要严格按无菌要求进行。 收集的血液置于室温下1h左右，凝固后，置4℃下，过夜(切勿冰冻)析出血清，离心，4000rpm，10min。在无菌条件，吸出血清，分装(0.05~0.2ml)，贮于-40℃以下冰箱，或冻干后贮存于4。C冰箱保存。直接法
1．检查抗原法 这是最早的方法，用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，敏感性较差。
2．检查抗体法 将抗原标记上荧光素，即为荧光抗原，用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应，而将抗体定位检测出来。
生物帮上面有的，< http://www.bio1000.com/zt/cell/201378.html > 动物细胞培养,植物细胞培养,ES细胞（胚胎干细胞）培养,细胞悬浮培养,贴壁细胞培养。
绛旓細锛1锛夊鍏嬮殕鎶椾綋鐨勫埗澶銆傗憼鍏嶇柅鏂规硶锛氬澶氬厠闅嗘姉浣擄紝鍏嶇柅鏂规硶涓鑸湁鐨笅鎴栬倢鑲夊厤鐤硶銆佺毊鍐呭厤鐤硶銆佹穻宸寸粨鍏嶇柅娉曞拰娣峰悎娉曠瓑銆備竴鑸潵璇达紝鐨笅鎴栬倢鑲夊厤鐤硶浜х敓鐨勬姉浣撴瘮杈冨锛涚毊鍐呭厤鐤硶鎵闇鐨勬姉鍘熼噺灏戯紝鍦ㄦ姉鍘熷疂璐垫椂鐗瑰埆閫傜敤锛屼絾涓庝箣鐩稿鐨勶紝瀹冧骇鐢熺殑鎶椾綋閲忎篃涓嶅銆傛贩鍚堝厤鐤硶鐨勪紭鐐规槸鎶楀師鐢ㄩ噺灏忥紝浜х敓...
绛旓細鎶椾綋鐨勫埗澶囦富瑕佹湁浠ヤ笅鍑犵鏂规硶锛1. 鍏嶇柅鍔ㄧ墿鍒跺鎶椾綋銆傝繖鏄竴绉嶄紶缁熺殑鏂规硶锛岄氳繃娉ㄥ皠鎶楀師鍒板姩鐗╀綋鍐呮潵浜х敓鐗瑰紓鎬ф姉浣撱傝繖绉嶆柟娉曞彲浠ヤ骇鐢熷ぇ閲忕殑鎶椾綋锛屼絾鍒跺杩囩▼澶嶆潅锛屼笖鎶椾綋鐨勮川閲忓拰绾害闇瑕佽繘涓姝ュ鐞嗐2. 浣撳鍩瑰吇鍒跺鎶椾綋銆傝繖绉嶆柟娉曢氳繃缁嗚優宸ョ▼鎶鏈拰鍩哄洜宸ョ▼鎶鏈紝鍦ㄤ綋澶栧煿鍏荤粏鑳炲苟璇卞鍏朵骇鐢熺壒寮傛ф姉浣撱...
绛旓細鎶椾綋鍙互閫氳繃澶氱鏂规硶鍒跺锛鍏朵腑鏈甯歌鐨勫寘鎷鍏嬮殕鎶椾綋鍒跺銆佹潅浜ょ槫鎶鏈埗澶囧崟鍏嬮殕鎶椾綋浠ュ強鍩哄洜宸ョ▼鎶椾綋鎶鏈銆傚鍏嬮殕鎶椾綋鍒跺鏄渶鏃╀娇鐢ㄧ殑鎶椾綋鍒跺鏂规硶銆傚畠鍒╃敤鎶楀師鍒烘縺鏈轰綋锛屼娇鏈轰綋浜х敓鍏嶇柅鍙嶅簲骞剁敓鎴愬绉嶆姉浣撱傝繖绉嶆柟娉曠浉瀵圭畝鍗曪紝鎴愭湰杈冧綆锛屼絾闇瑕佷粠鍏嶇柅鍔ㄧ墿锛堝鍏斻佺緤绛夛級鐨勮娓呬腑鎻愬彇鎶椾綋锛屽洜姝ゆ姉浣撶殑鐗瑰紓...
绛旓細鍙栧厰琛鏈変袱绉嶆柟娉曪紝涓鏄崇紭闈欒剦鎴栬冲姩鑴夋斁琛锛屼竴鏄鍔ㄨ剦鍏ヨ锛屼篃鍙績鑴忛噰琛銆傚彇鍔ㄨ剦鎴栭潤鑴夋斁琛鏃讹紝灏嗗厰鏀惧叆涓涓壒閫犵殑鏈ㄥ專鎴栫鍐咃紝鑰抽湶浜庣(绗)澶栵紝涔熷彲鐢卞彟涓浜烘崏浣忓厰韬傚壀鍘昏崇紭鐨勬瘺锛岀敤灏戣浜岀敳鑻秱鎶硅冲粨锛30s鍚庯紝鑰宠绠℃墿寮犮佸厖琛銆傜敤鎵嬭交鎷夎冲皷锛屼互鍗曢潰鍓冮』鍒鎴栧皷鐨勬墜鏈垁鐗囷紝蹇熷垏寮...
绛旓細鏃╁勾浜哄伐鍒跺鎶椾綋鐨勬柟娉曚富瑕佹槸浠ョ浉搴旀姉鍘熷厤鐤姩鐗╋紝鑾峰緱鎶楄娓銆傜敱浜庢姉鍘熷父甯稿惈鏈夊绉嶄笉鍚岀殑鎶楀師琛ㄤ綅锛屽姞涔嬫墍鑾峰緱鐨勬姉琛娓呬篃鏈粡鍏嶇柅绾寲锛屽洜姝わ紝鑾峰緱鐨勬姉琛娓呭疄闄呬笂鏄惈澶氱鎶椾綋鐨勬贩鍚堢墿锛屽嵆澶氬厠闅嗘姉浣(polyclonal antibody)銆傜敤浜庡埗澶囨姉琛娓呯殑鍔ㄧ墿涔熷洜鎶椾綋闇姹傞噺鐨勫鍔犺屼粠灏忛紶銆佸ぇ榧犮佸厰銆佺緤鍒伴┈绛夊ぇ鍔ㄧ墿...
绛旓細鍒跺鍗曞厠闅鎶椾綋甯哥敤鐨勮瀵煎墏鏈夛細鍖栧璇卞鍓傗斺旇仛涔欎簩閱囷紙PEG锛夈佺敓鐗╄瀵煎墏鈥斺旂伃娲荤殑鐥呮瘨锛堝父鐢ㄧ伃娲荤殑浠欏彴鐥呮瘨锛夈傚悜宸﹁浆|鍚戝彸杞 鍏蜂綋鎿嶄綔鏂规硶濡備笅锛氾紙1锛変粰鍙扮梾姣掓硶铻嶅悎锛氣憼涓ょ缁嗚優鍦ㄤ竴璧峰煿鍏伙紝鍔犲叆鐥呮瘨锛屽湪4鈩冩潯浠朵笅鐥呮瘨闄勭潃鍦ㄧ粏鑳炶啘涓娿傚苟浣夸袱 缁嗚優鐩镐簰鍑濊仛锛涒憽鍦37鈩冧腑锛岀梾姣掍笌缁嗚優鑶滃彂鐢熷弽搴...
绛旓細浣愬墏鐨勭绫:鏃犳満浣愬墏銆佹湁鏈轰綈鍓傘佸悎鎴愪綈鍓傘佹补鍓 涓夈佸鍏嬮殕鎶椾綋鍒跺鐨勫熀鏈柟娉 1. 鎶楀師璁￠噺銆佸厤鐤斿緞涓庡厤鐤棩绋 鍏嶇柅鍔ㄧ墿鐨勬柟娉: 鍏嶇柅鍘熷艰: 鏃犱綈鍓傚厤鐤硶:閫傜敤浜庨绮掓ф姉鍘 寮楁皬浣愬墏鍏嶇柅娉:閫傜敤浜庡彲婧舵ф姉鍘 閾濅綈鍓傚厤鐤硶:閫傜敤浜庝汉鐨勫厤鐤 鍏嶇柅鍔ㄧ墿(涓鑸夋嫨闆屾у姩鐗,娓╅『骞朵笖鍙互鐢熶骇) 鐨唴鍏嶇柅娉 鐨笅鎴栬倢鑲夊厤...
绛旓細浜屻鏉備氦鐦ゆ妧鏈鍒跺鍗曞厠闅嗘姉浣撶殑涓昏姝ラ銆(1)鎶楀師鍒跺銆(2)鍏嶇柅鍔ㄧ墿銆(3)鍏嶇柅鑴剧粏鑳炲拰楠ㄩ珦鐦ょ粏鑳炵殑鍒跺銆(4)缁嗚優铻嶅悎銆(5)鏉備氦鐦ょ粏鑳炵殑閫夋嫨鍩瑰吇銆(6)鏉備氦鐦ょ粏鑳炵殑绛涢夈(7)鏉備氦鐦ょ粏鑳炵殑鍏嬮殕鍖栥(8)鍗曞厠闅嗘姉浣撶殑妫瀹氥(9)鍒嗘硨鍗曞厠闅嗘姉浣撴潅浜ょ槫缁嗚優绯荤殑寤虹珛銆(10)鍗曞厠闅嗘姉浣撶殑澶ч噺鍒跺銆
绛旓細閫夋嫨鎬у煿鍏 閫夋嫨鎬у煿鍏荤殑鐩殑鏄瓫閫夎瀺鍚堢殑鏉備氦鐦ょ粏鑳烇紝涓鑸噰鐢℉AT閫夋嫨鎬у煿鍏诲熀锛4銆佹潅浜ょ槫闃虫у厠闅嗙殑绛涢変笌鍏嬮殕鍖 閲囩敤鐏垫晱銆佸揩閫熴佺壒寮傜殑鍏嶇柅瀛鏂规硶锛岀瓫閫夊嚭鑳戒骇鐢熸墍闇鍗曞厠闅鎶椾綋鐨闃虫ф潅浜ょ槫缁嗚優锛屽苟杩涜鍏嬮殕鎵╁锛5銆佸崟鍏嬮殕鎶椾綋鐨勫ぇ閲鍒跺 鍗曞厠闅嗘姉浣撶殑澶ч噺鍒跺涓鑸噰鐢ㄥ姩鐗╀綋鍐呰鐢熸硶鍜屼綋澶栧煿鍏绘硶銆
绛旓細4銆佹潅浜ょ槫闃虫у厠闅嗙殑绛涢変笌鍏嬮殕鍖栵細鍦℉AT鍩瑰吇鍩轰腑鐢熼暱鐨勬潅浜ょ槫缁嗚優锛屽彧鏈夊皯鏁版槸鍒嗘硨棰勫畾鐗瑰紓鎬у崟鍏嬮殕鎶椾綋鐨缁嗚優锛屽洜姝わ紝蹇呴』杩涜绛涢夊拰鍏嬮殕鍖栥傞氬父閲囩敤鏈夐檺绋閲婃硶杩涜鏉備氦鐦ょ粏鑳炵殑鍏嬮殕鍖栧煿鍏汇5銆佸崟鍏嬮殕鎶椾綋鐨勫ぇ閲鍒跺锛氬崟鍏嬮殕鎶椾綋鐨勫ぇ閲忓埗澶囦富瑕侀噰鐢ㄥ姩鐗╀綋鍐呰鐢熸硶鍜屼綋澶栧煿鍏绘硶銆
