蛹虫草培养基是怎样制备的? 蛹虫草常用的液体培养基是怎样的?

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4.\u706d\u83cc\u91c7\u7528\u9ad8\u538b\u84b8\u6c7d\u706d\u83cc\uff1a\u6e29\u5ea6121\uff5e126\u2103\uff0c\u65f6\u95f4\u4e3a40\uff5e60min\uff0c\u5e38\u538b\u706d\u83cc\uff1a\u6e29\u5ea6100\u2103\uff0c\u65f6\u95f4\u4e3a4\uff5e6h\u3002
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(1)\u7389\u7c73\u7c8930g\u9ec4\u8c46\u997c\u7c8920g\u9175\u6bcd\u7c8910g\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94bel.Og\u786b\u9178\u95410.5g\u86cb\u767d\u80e80.lg\u6c341000ml\u52a8\u7269\u8840\u6db20.5%(2)\u9a6c\u94c3\u85af\u716e\u6c411000ml\u8517\u7cd620g\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94be3g\u786b\u9178\u95411.5g\u7ef4\u751f\u7d2010ml\u589e\u4ea7\u70750.5mg(3)\u786b\u9178\u95410.3g\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94be1.25g\u6c2f\u5316\u94be0.5g\u786b\u9178\u94c1O.Olg\u5929\u95e8\u51ac\u9170\u94f5lg\u78f7\u9178\u94a00.5g\u8517\u7cd630g\u6c341000ml(4)\u86cb\u767d\u80e810g\u5929\u95e8\u51ac\u9178\u94f5lg\u7518\u6cb930g\u786b\u9178\u95410.5g\u78f7\u9178\u4e8c\u6c22\u94belg\u751f\u957f\u7d201\uff5e5ml\u6c341000ml.

培养基是人工配制的适合微生物生长的基质。根据培养基原料物质的来源可分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基三类。以培养基的物理状态又可划分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。在蛹虫草的菌种制备和栽培中大都使用天然培养基和半合成培养基,制备二级种和栽培种可使用液体培养基,而人工栽培目前都采用固体培养基。

1.常用配方母种培养基主要用于菌种的分离、扩大、保藏。常用的配方有:

(1)马铃薯200g葡萄糖20g磷酸二氢钾2g硫酸镁1g琼脂20g水1000mlpH6~7(2)麸皮100g马铃薯100g磷酸二氢钾1g硫酸镁0.5g蛋白胨5g琼脂20g蔗糖20g水1000mlpH6.0~7.0(3)蛋白胨2g玉米楂50g葡萄糖5g黄豆饼粉lg蚕蛹粉5g磷酸二氢钾lg硫酸镁0.5g琼脂20g水1000mlpH6~7(4)麦芽汁100ml葡萄糖10g蛋白胨2g蚕蛹粉20g硫酸二氢钾lg硫酸镁0.5g琼脂20g水1000ml(5)马铃薯200g麸皮50g蛋白胨2g酵母膏lg

磷酸二氢钾lg维生素B1少量琼脂20g蔗糖10g葡萄糖10g酵母膏2g硫酸镁0.5g水1000ml硫酸镁0.5g水1000ml玉米楂30g黄豆饼粉20g磷酸二氢钾lg亚硫酸铁O.Olg琼脂20g。

2.制备方法母种培养基的制备程序如下:

(1)称量按培养基配方计算,准确称量各种物质。

(2)煮制取汁蛹虫草培养基中都有天然物质,如马铃薯、麸皮、豆饼等。制备培养基之前,先要煮制取汁,即将这些天然物质放入一定量的水中煮沸之后,用文火维持15~20分钟,过滤即可。

(3)溶解将营养物质加入一定量的水中,然后加热使其溶解。如配制固体培养基,在琼脂溶化的过程中要不断搅拌,并控制火源以防培养基溢出或烧焦,待完全溶化后,补足所失水分。如果培养基配方中有淀粉一类的物质,则要先用少许冷水将淀粉调成糊状,并在火上加热搅拌,再加入所需水分及其他物质,待完全溶化后,补足所失水分。

(4)测定并调整酸碱度制备蛹虫草培养基时,通常将pH调至6.5~7.5,灭菌后为6.0~7.0。

(5)过滤各种物质溶解之后,用3~4层纱布过滤。

(6)分装将制备好的培养基趁热分装入试管或三角瓶内。分装时,装入量以试管高度的1/5左右为宜。分装三角瓶时,以不超过三角瓶容积的一半为合适。分装时不要使培养基粘在管(瓶)口上,以免引起污染。

(7)加棉塞培养基分装后,要塞上棉塞。棉塞要松紧适度,塞入长度为棉塞总长度的2/3左右,使之既有利于通气,又可防止杂菌侵入,且拔取方便。

(8)包扎与灭菌塞好棉塞后,将试管每7支捆扎成一束或放入试管篮内,在外面包一层牛皮纸或薄膜,进行灭菌。培养基灭菌条件一般为121~126℃,20~30min。

(9)冷却与摆斜面灭菌后在灭菌器压力表的指针回到零之后,便可慢慢打开灭菌器,取出试管搁成斜面,使斜面长度为试管的2/3为好。待凝固后就成斜面培养基。为了检查灭菌是否彻底,将斜面培养基放在37℃温度下培养48小时,若无杂菌菌落方可使用。



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