泛素化酵母双杂交原理
答：该系统利用酵母未折叠蛋白反应（UPR）的信号途径。ER中错误折叠蛋白的积累会诱导酵母ER I类跨膜蛋白（Ire1p）形成二聚体，后者诱导Hac1p转录，其产物可激活分子伴侣的转录。在SCINEX-P系统中，目的蛋白与缺少位于腔内的N末端寡聚化结构域的Ire1p突变蛋白（ΔIre1p）融合。两种杂合蛋白的互作会引起Ire...
答：酵母双杂交筛选到E3连接酶，RHA3A，并用pull down和Co—IP证明了与BIK1的互作。RHA3A的同源基因RHA3B也与BIK1互作，并且flg22的处理并不影响BIK1与RHA3A/B的互作。GST-RHA3A，而不是GST-RHA3A(I104A,保守的Ile位点)导致分子量上近似8kDa的差异。在rha3a/b突变体中，flg22诱导的BIK1的单泛素...
答：RIP是一种单肽链蛋白,分子量在30kDa左右,一般为碱性蛋白, 具有RNA N-糖苷酶或叫多核苷酸·腺苷糖苷酶(EC3．2．2．22)活性的细胞毒素。
答：（3） LC3 参与了自噬体膜的形成，包括相互转化的形式即LC3-I和LC3-II（细胞内新合成的LC3经过加工, 成为胞浆可溶形式的LC3-I, 后者经泛素化加工修饰, 与自噬体膜表面的PE结合, 成为膜结合形式的LC3-II。LC3-II定位于前自噬体和自噬体, 是 自噬体的标志分子 , 随自噬体膜的增多而增加）；检测...
答：比如酵母双杂交的互补实验 又如蓝白斑的互补实验 又如双分子荧光互补分析技术等等 双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation，BiFC)分析技术，是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。该技术巧妙地将荧光蛋白分子的两个互补片段分别与目标...
答：实验26 利用酵母双杂交技术分离调控基因的相互作用蛋白 实验27 利用泛素分离双杂交系统分离跨膜基因的相互作用蛋白 实验28 利用蛋白质组学技术分离相互作用蛋白 实验29 利用体内足迹法分析蛋白质-DNA的相互作用 实验30 利用抗体技术鉴定鸡胚基因的表达与功能 实验31 利用RNA酶保护法进行基因表达分析 实验32 ...
网友评论：
蒋详15537076981：
酵母双杂交的原理? -
6358朱促
： 酵母双杂交系统由 Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...
蒋详15537076981：
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
6358朱促
： 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
蒋详15537076981：
酵母双杂交系统原理的应用 -
6358朱促
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
蒋详15537076981：
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
6358朱促
：[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
蒋详15537076981：
酵母双杂交系统原理的优点 -
6358朱促
： 双杂交系统的另一个重要的元件是报道株.报道株指经改造的、含报道基因(reporter gene)的重组质粒的宿主细胞. 最常用的是酵母细胞, 酵母细胞作为报道株的酵母双杂交系统具有许多优点: 〈1〉 易于转化、便于回收扩增质粒. 〈2〉...
蒋详15537076981：
酵母双杂交系统的介绍 -
6358朱促
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
蒋详15537076981：
酵母双杂交法的原理? -
6358朱促
： 就利用AD和BD之间的位置接近,能够是某一报告基因激活而表现出某一特性而得到鉴定. 将检测蛋白结合到AD上,诱饵蛋白结合到BD上,如果检测蛋白与诱饵蛋白结合则AD和BD靠近,从而使BD结合到UAS上,AD结合到转录起始位点,使报告基因激活,显现出一些特性,而使人能够通过这些特性判断这两种蛋白有无结合能力.若无此特性出现则无结合力.
蒋详15537076981：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
6358朱促
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
蒋详15537076981：
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
6358朱促
： 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...
蒋详15537076981：
怎样确定一个蛋白是另一个物质的受体 -
6358朱促
： 一、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法.其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产...
