酵母双杂交的基本原理
答：深入解析GAL4系统酵母双杂交的奥秘 在分子生物学研究中，GAL4系统酵母双杂交（Yeast Two-Hybrid, Y2H）是一种强大的工具，用于检测和解析蛋白质之间相互作用。让我们逐一揭示其实验原理和关键步骤。原理揭秘 首先，GAL4系统的核心是真核生物中常见的转录激活因子GAL4，其结构独特，分为DNA结合域（BD, ...
答：Fields在1989年提出了酵母双杂交技术。这项技术的开发基于对真核生物转录因子，尤其是酵母转录因子GAL4的研究。GAL4由两个功能区域组成：N端的DNA结合域（DNA-BD）和C端的转录激活域（AD）。DNA-BD负责识别并结合到GAL4响应基因的上游激活序列（UAS），而AD则通过与转录机制中的其他组分相互作用来激活...
答：最近在做龙须菜高温胁迫表达cDNA文库的构建，选择的是CaM做诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM，利用SMART技术将重组质粒转化到酵母菌Y187中，搜集了部分资料找到了一份比较全的酵母双杂交实验操作步骤。一.酵母双杂交系统的原理 酵母的转录激活因子GAL4由两个可以分开的、功能上相互独立的结构域(domain)组成，N...
答：把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来，算是实验技巧分类目录的首篇。\x0d\x0a\x0d\x0a一、酵母双杂交系统\x0d\x0a酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结合于报道基因的启动子，启动报道...
答：酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid system）源于对真核生物转录起始调控过程的深入理解。在这个系统中，基因转录的启动需要反式转录激活因子的介入，如酵母转录因子GAL4。GAL4的结构具有模块化特性，由DNA结合域（DNA-BD）和转录激活域（DNA-AD）两个独立的结构域组成，每个域在单独存在时仍具备功能，但...
答：一、酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结合于报道基因的启动子，启动报道基因在酵母细胞内的表达，如果检测到报道基因的表达产物，则说明两者之间有相互作用，反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、...
答：酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段。实验中将A蛋白与转录激活因子连接，B蛋白与另一个转录因子（比如RNA聚合酶的alpha亚基）融合。如果A能够和B发生互作，那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录，从而使菌株产生某些特性（抗性或能够在基本培养基上生长），反之则不能。参考资料：http...
答：把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来，算是实验技巧分类目录的首篇。 一、酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结合于报道基因的启动子，启动报道基因在酵母细胞内的表达，如果检测...
答：1. 实验目的与背景 本次实验旨在构建龙须菜高温胁迫下的cDNA文库，并使用CaM作为诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM。通过SMART技术将重组质粒转化到酵母菌Y187中，以研究蛋白质之间的相互作用。2. 酵母双杂交系统原理 酵母双杂交系统基于酵母转录激活因子GAL4的结构特性。GAL4包含DNA结合域（BD）和转录激活域...
答：该系统通过将感兴趣的蛋白质分别与DNA绑定域（DNA-BD）和活化域AD融合，使其在约束条件下相互结合形成蛋白质复合物，并驱动酵母细胞中的报告基因的表达。因此，双杂交系统主要用于发现蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系。酵母单杂交系统和双杂交系统的原理和应用范围存在明显的差异，需要根据具体的研究课题...
网友评论：
齐致15776441789：
酵母双杂交系统原理 - 百科
58124乜兔
： 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
齐致15776441789：
酵母双杂交法的原理? -
58124乜兔
： 就利用AD和BD之间的位置接近,能够是某一报告基因激活而表现出某一特性而得到鉴定. 将检测蛋白结合到AD上,诱饵蛋白结合到BD上,如果检测蛋白与诱饵蛋白结合则AD和BD靠近,从而使BD结合到UAS上,AD结合到转录起始位点,使报告基因激活,显现出一些特性,而使人能够通过这些特性判断这两种蛋白有无结合能力.若无此特性出现则无结合力.
齐致15776441789：
论述酵母双杂交技术的原理和应用情况 -
58124乜兔
：[答案] 酵母双杂交技术研究进展张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取得了许多有价值的重要发现.作为一个完整的实验系统,...
齐致15776441789：
酵母双杂交系统原理的应用 -
58124乜兔
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
齐致15776441789：
酵母双杂交系统的介绍 -
58124乜兔
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
齐致15776441789：
酵母双杂交体系克隆基因的原理和方法 -
58124乜兔
： 酵母双杂交是验证蛋白质相互作用的实验体系,不是用来克隆基因的.如果你需要酵母双杂的相关资料,请留下你的邮箱.
齐致15776441789：
酵母双杂交 - 酵母双杂交两种菌杂交效率不高有哪些原因?
58124乜兔
： 酵母双杂交技术研究进展 张迪 霍克克 顾科隆 赵翔 李育阳 提 要 酵母双杂交技术是一种有效的真核活细胞内研究方法,在蛋白质相互作用的研究方面得到了广泛的应用并取...
齐致15776441789：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
58124乜兔
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
齐致15776441789：
酵母双杂交系统原理的优点 -
58124乜兔
： 双杂交系统的另一个重要的元件是报道株.报道株指经改造的、含报道基因(reporter gene)的重组质粒的宿主细胞. 最常用的是酵母细胞, 酵母细胞作为报道株的酵母双杂交系统具有许多优点: 〈1〉 易于转化、便于回收扩增质粒. 〈2〉...
