酵母双杂交缺陷培养基
答：酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法，有多方面的应用，但仍存在一些局限性。⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内，而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等，这些反应在核内无法进行。另外有些蛋白的正确折叠和功能有赖于其他非酵母蛋白的辅助...
答：色氨酸 Trp 缩写是W -LEU/-TRP = -LW 就是2缺 培养基
答：没有。酷来博酵母二缺培养基经过双质粒酵母转化筛选，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化免疫共沉淀，Y187和AH109酵母交配实验，接合型二倍体筛选完成，其中是不含琼脂粉的。
答：（3）常见的问题及参考方案 转化效率过低—尽量使用新鲜的培养基以及新鲜的、且直径大小在2~3 mm左右的酵母克隆，以确保酵母的活力；可将用于转化的质粒在使用前进行乙醇沉淀，以提高质粒的纯度和浓度。杂交效率偏低—可能由于表达的融合蛋白对酵母细胞有毒性，在某些情况下在液体培养基中生长不好的酵母换...
答：基因不同。1、酵母氨基酸缺陷培养基是酵母转化和酵母杂交等所必须用到的培养基。2、用于酵母单杂交/酵母双杂交等的实验研究以及酵母遗传突变株的筛选等研究。
答：酵母双杂交实验有哪些常见问题和解决方法 可以采用以下方法解决：1) 检测一下DNA的纯度,如果可以的话,重新用乙醇纯化.2) DNA-BD/诱饵蛋白很可能是有毒的.3) 不适当的培养基,重新配制培养基,并做对照转化.
答：真菌孢子很难杀死。如果可能的话，挑酵母单细胞重新纯化培养，再做实验。
答：验证构建的诱饵载体：使用限制性内切酶消化和测序等方法，验证插入的诱饵基因是否正确并且方向正确。转化酵母细胞：将构建好的诱饵载体导入到酵母细胞中。常见的方法包括化学法、电穿孔法或减压法等。筛选：将转化后的酵母细胞进行筛选，一般使用选择培养基含有适当选择标记的培养基。仅表达诱饵蛋白的酵母细胞...
答：如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板，在30℃下温浴，直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆，并...
网友评论：
乜坚17324088959：
酵母双杂交,营养缺陷培养基长出菌落,但提质粒,没有 -
38674羿依
： 酵母双杂交,营养缺陷培养基长出菌落,但提质粒 发展起来的各种双杂交系统大多是以Fields等人建立的系统为基础的.这些新系统主要对报道基因、“诱饵”表达载体以及“猎物”表达载体等做了一些改进.其中一个重要改进是引入额外的报...
乜坚17324088959：
酵母双杂要用缺陷培养基摇菌吗 -
38674羿依
： 是的.如果不用缺陷培养基,细胞在没有胁迫的情况下质粒容易丢失.
乜坚17324088959：
有关酵母双杂交系统的几个问题本人为新手,有相关酵母双杂交系统的问题想要请教一下各位前辈1.在配置营养缺陷型培养基时,会有大量的气泡产生,这是... -
38674羿依
：[答案] 1.在配置营养缺陷型培养基时,会有大量的气泡产生,这是为什么? 培养基温度太低,SD不要从冰箱中取出就用. 用枪时小心打出液体,枪头中留一点点液体.最好冲向容器壁,而不是直接冲向液体. 2.进行了两次质粒转化酵母均不成功,在30度温浴...
乜坚17324088959：
酵母菌中,SD/–Ade,SD/–Leu/–Trp,SD/–Ura,是什么意思?是指SD培养基中缺少这些东西吗? -
38674羿依
： 是指SD培养基中缺少这些东西吗? -答:是的 这都是酵母单杂交或者双杂交实验中的各种氨基酸缺陷型培养基 Ade=Adenine腺嘌呤 Ura=uracil 尿嘧啶 YPDA是全营养培养基,主要是在实验前期 活化培养酵母细胞用的
乜坚17324088959：
酵母双杂交的具体过程是什么?(中文) -
38674羿依
： 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...
乜坚17324088959：
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
38674羿依
： 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
乜坚17324088959：
酵母双杂交的常见问题 -
38674羿依
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
乜坚17324088959：
酵母双杂交的局限性 -
38674羿依
： 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
乜坚17324088959：
酵母双杂交过程中筛选培养基上真菌污染严重是什么原因造成的,该怎么办 -
38674羿依
： 真菌孢子很难杀死.如果可能的话,挑酵母单细胞重新纯化培养,再做实验.
乜坚17324088959：
酵母培养用什么培养基好 -
38674羿依
： 常用的酵母菌培养基有:PDA琼脂培养基、沙保弱培养基、孟加拉红培养基、察氏培养基等等,如果没有真菌专用的培养基,那么在血琼脂培养基这样营养较高的培养基上也可以生长良好.
