酵母双杂交二缺四缺
答:因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长。如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长。
答:酵母双杂交二缺、三缺、四缺的作用如下。1、二缺:可以帮助分离染色体的配对。2、三缺:可以用于研究基因重组的机理。3、四缺:可以用于研究基因邻接检测和构建不同基因之间在空间上的位置关系。
答:是酵母遗传学、细胞与分子生物学实验室的最佳选择,泛基诺产品驰名全国,享誉世界,其酵母选择营养培养基/缺素培养基广泛应用于酵母遗传、基因工程以及工具方法学(酵母双杂交、酵母单杂交)和动物、植物基因功能互补实验等的研究中,涵盖酵母研究的一切主要方面和一切主要过程。分类导航:营养缺陷型标记基因的...
答:没有。酷来博酵母二缺培养基经过双质粒酵母转化筛选,外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化免疫共沉淀,Y187和AH109酵母交配实验,接合型二倍体筛选完成,其中是不含琼脂粉的。
网友评论:
南瑞14792711687:
酵母双杂交中为什么在双缺板上长?酵母双杂交中为什么在双缺板上长,
37912融罚
: 你好,因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.酵母(saccharomyces) 是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞,培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便.酵母克隆载体的种类也很多.酵母菌也有质粒存在,这种2μm 长的质粒称为2μm 质粒,约6 300bp.这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外,利用2μm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒.酵母克隆载体都是在这个基础上构建的
南瑞14792711687:
请问 酵母双杂筛库在四缺培养基上显蓝斑后,提取prey(猎物质粒)时应用什么培养基摇菌比较好?为什么? -
37912融罚
: 因为转进去的两个质粒上具有合成两种氨基酸的基因,所以在两缺板子上能生长.如果两个蛋白能互作,报告基因被激活,所以能在三缺或四缺板子上生长,如果不能互作,就不生长.
南瑞14792711687:
酵母双杂交系统有哪些优缺点 -
37912融罚
: 1、高敏感性.原因:①采用高拷贝和强启动子的表达载体,使融合蛋白过量表达;②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物,之后又与启动子结合,此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定;③通过mRNA使信号放大;④检测的结果是基因表达产物的累积效应,可检测存在于蛋白质间的微弱或暂时的相互作用.2、真实性.检测在活细胞内进行,作用条件与作用力无需模拟,在一定程度上代表细胞内的真实情况.3、简洁性.融合蛋白相互作用后,减少了制备抗体和纯化蛋白质的繁琐步骤. 3、广泛性.采用不同组织器官细胞类型和分化时期的材料构建cDNA文库,能分析不同亚细胞部位和功能的蛋白质,适用于部分细胞质、细胞核及膜结合蛋白.
南瑞14792711687:
酵母双杂交的常见问题 -
37912融罚
: 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
南瑞14792711687:
酵母双杂交系统的介绍 -
37912融罚
: 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
南瑞14792711687:
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
37912融罚
: 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
南瑞14792711687:
酵母双杂交系统原理的应用 -
37912融罚
: 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
南瑞14792711687:
想知道酵母双杂交到底咋回事啊,看了半天书,晕,也看不明白,希望能用简单明了的通俗话帮我解释一下
37912融罚
: 听过破镜重圆的故事吧. 假如甲乙两个人各拿半块镜子,只有当他们两人在一起的时候这个镜子才可以拼成一个整个的. 酵母双杂交我没做过,我的理解就是这样的:你看到的BD和AD分别是两个半块的镜子,你想研究的两个蛋白则是甲乙两个拿镜子的人. 如果你的两个蛋白能相互作用,它们手上的镜子就能拼在一起,也就是BD和AD可以结合, 它们结合以后,就形成了一个完整的镜子:呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子,使启动子下游基因LacZ得到转录而报告出来...
南瑞14792711687:
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
37912融罚
: 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
南瑞14792711687:
酵母双杂交的原理? -
37912融罚
: 酵母双杂交系统由 Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...