3-at酵母
答:4.酵母筛选和3AT条件优化 5.筛选结果的测序 6.筛选结果的回转验证 7.筛选结果递交:包括筛选报告,筛选结果的测序结果和blast结果,筛选结果克隆的质粒实物。 9.1.如何选择合适的文库构建方法进行建库? ※ 我们是市场上唯一可以同时提供3种文库构建方法的公司,这也足以看出我们公司的技术实力。 ※ 3种方法的比较如下:...
答:沸点:686.5ºC at 760mmHg,熔点:410ºC,闪点:369ºC。分子结构 1、摩尔折射率:40.92 2、摩尔体积(cm3/mol):82.3 3、等张比容(90.2K):273.9 4、表面张力(dyne/cm):122.7 5、极化率(10-24cm3):16.22 酵母是发面的必需品,它在0°-55°之间具有活性,...
答:酸性蔗糖酶也被其反应产物抑制, 葡萄糖是非竞争性抑制剂, 而果糖是竞争性抑制剂[3]。 另外, 植物...在拟南芥中, 酸性蔗糖酶至少由四个基因At be -ta fruc1, A t beta fruc2, At beta fruc3, At...在豌豆的子叶中表达酵母蔗糖酶导致蔗糖含量降低, 己糖积累。转基因植物的细胞中含有大的液泡, 而且能...
答:转录的终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因或操纵子的末端通常有一段终止序列即终止子;RNA合成就在这里终止。原核细胞转录终止需要一种终止因子ρ(四个亚基构成的蛋白质)的帮助。真核生物DNA上也可能有转录终止的信号。已知真核DNA转录单元的3′端均含富有AT的序列〔如AATAA(A...
答:该蛋白很可能有转录激活域,是个转录因子。可以通过基因重组切掉转录激活域,然后重新检测其是否自激活,但要注意重组也有可能破坏蛋白之间的互作。可以采用以下方法解决:1) 检测一下DNA的纯度,如果可以的话,重新用乙醇纯化。2) DNA-BD/诱饵蛋白很可能是有毒的。3) 不适当的培养基,重新配制培养基,...
答:种子液培养采用LB培养基,其组成为:10g/L蛋白胨,5g/L酵母膏,10g/L氯化钠,pH=7.0~7.2;经响应面法优化后的发酵培养基组成为:4.08g/L碳源,11.74g/L有...表3 地层离子和化学助剂对酶活力保持率的影响 3 生物破胶酶的破胶性能研究 3.1 生物酶破胶降黏性能研究 针对中、低温储层的特点,本实验中所使用的压裂...
答:内含子去除需要5'剪切位点、G75/G100U100A65AG65U保守序列、3'剪切位点、富含密啶NC66A100G100/G56保守序列和C72T98R77A100Y75保守序列。有效的加poly-A和mRNA剪切需要一个由两个部分组成的信号:加poly-A保守序列AAUAAA和在切割位点内的50个碱基的富含GT的序列。酵母真核转录终止序列(几个不同的富含AT序列,...
答:然而为了生产需要特异修饰、胞外分泌或有特异折叠需要的蛋白质,其他表达系统也是需要的。真核细胞在表达原核来源的基因、真核基因的cDNA拷贝或其他无内含子的基因时可能表现很多特异问题。富含AT的基因在很多真核细胞中表达时会遭遇很剧烈的障碍。主要的真核信号序列如 加poly-A的位点、酵母转录终止位点和...
答:在精编分子生物学实验指南上有一部分讲到了酿酒酵母,电转化具体过程如下:1)将转化用酵母菌株的单菌落接种于5ml YPD培养基中,30度过夜培养至饱和。2)转化前一天晚上,在装有500ml YPD培养基的2L无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液,于30度剧烈振摇,直到细胞密度达1*10的8次方(OD600约为1.3-1.5)...
答:5.3.3 微生物降解农药的机理 目前,对于微生物降解农药的研究主要集中于细菌上,因此对于细菌代谢农药的机理研究得比较清楚。 表2 常见农药的降解微生物农 药降 解 微 生 物甲胺磷 芽孢杆菌、曲霉、青霉、假单胞杆菌、瓶型酵母阿特拉津(AT) 烟曲霉、焦曲霉、葡枝根霉、串珠镰刀菌、粉红色镰刀菌、尖孢镰刀菌、斜...
网友评论:
倪伊18688677864:
酵母常用的合成培养基有哪些? -
13881里兔
: 1、YPDA培养基(完全培养基)液体:20 g蛋白胨、10 g酵母抽提物、2 g葡萄糖,适量双蒸水溶解.15 ml 0.2%腺嘌呤溶液,定容到1 L,120℃高压灭菌15 min,室温贮存.固体:YPDA液体培养基...
倪伊18688677864:
酵母sd固体培养基 加多少琼脂 -
13881里兔
: 酵母sd固体培养基的配制:SD液体培养基中加入2%的琼脂粉,120℃高压灭菌15 min,铺板,待凝固后4℃贮存.(若要加入3-AT 须在培养基自然冷却至约55℃加入所需量的1M 3-AT溶液,摇匀后铺板)
倪伊18688677864:
酵母双杂交筛库不加3 - at有什么影响 -
13881里兔
: 假阳性 非常多,你是 -LWH 3缺+ 3-AT 吗?
倪伊18688677864:
培养固体酵母曲为什么要液固结合 -
13881里兔
: 静置培养的话可能二氧化碳会停留在石蜡油和培养基之间的夹层,如果是想称量因二氧化碳而损失的质量,只要在称量前把三角瓶震荡几下就好了.
倪伊18688677864:
酵母双杂交实验有哪些注意事项 -
13881里兔
: 如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办?在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好.首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起.用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应.2.如果诱饵蛋白能直接激活报告基因的表达,该如何处理?该蛋白很可能有转录激活域,是个转录因子.可以通过基因重组切掉转录激活域,然后重新检测其是否自激活,但要注意重组也有可能破坏蛋白之间的互作.
倪伊18688677864:
酵母双杂交错用了pGADT7 - rec2对结果有没有影响 -
13881里兔
: 注意事项 (1)酵母双杂交对照的设定 常规的酵母双杂交操作时一般会设定阳性对照、阴性对照以及显色系统对照三种对照,以MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统为例: 阳性对照:pGADT7-T + pGBKT7-53,其中T蛋白和53蛋白是已经...
倪伊18688677864:
酵母双杂交过程中转化完菌长的特别多但是很小怎么办 -
13881里兔
: 去生物方面的论坛讨论吧!这种地方娱乐娱乐还行,专业的东西就别参考了. 比如小木虫就挺好. 你的双杂背景太多,在涂版时可适量加一些3-AT.现在的话,就等等看吧,从里面挑选出一些比较大的点.
倪伊18688677864:
酵母菌的种类,及它们各自的作用? -
13881里兔
: 工业用酵母菌分类 母菌是单细胞真核微生物,在自然界中普遍存在,主要分布于含糖质较多的偏酸性环境中,如水果、蔬菜、花蜜和植物叶子上,以及果园土壤中.石油酵母较多地分布在油田周图的土壤中.酵母菌大多为腐生.生长最适温度为...
倪伊18688677864:
tst活酵母刚开始是天天用还是隔天用一次 -
13881里兔
: 刚开始用的宝宝,是隔2天用一次...拿到的活酵母,不建议你们天天用!所有拿回去的,干性皮肤一周2-3次!油性,混合性一周3-4次.孕妇一周1-2次.用活酵母前记得拍上爽肤水,用完之后也要拍上爽肤水,接着按照平时护肤的步骤!第一次...
倪伊18688677864:
TST活酵母含有什么成分,主要是什么功效 -
13881里兔
: 啤酒酵母菌(SACCHAROMYCES CEREV)——抗衰、祛皱:取自于啤酒花和啤酒酵母发酵而来,是完全来自于啤酒酵母的天然原料,含有各种天然成分如氨基酸,蛋白质、多肽,矿物质,维生素等.蛋白质是生命的物质基础,其中胶原蛋白...