酵母双杂中的3at
答：用高温的水溶解就可以。酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因，分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子。如GAL4等的DNA结合结构域基因和转录激活因子（如GAL4等）激活结构域基因，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。
答：正和生物致力于科研的最前沿，在构建核体系酵母文库和膜体系酵母文库均有丰富的经验，熟练运用gateway和smart两套体系进行建库，通过多道工序，严格把控质量。文库质控：平均插入片段＞1200bp；文库原始库容量＞1*10^7CFU；文库空载率＜5%。
答：注意事项 （1）酵母双杂交对照的设定 常规的酵母双杂交操作时一般会设定阳性对照、阴性对照以及显色系统对照三种对照，以MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统为例：阳性对照：pGADT7-T + pGBKT7-53，其中T蛋白和53蛋白是已经明确在酵母细胞内能够发生结合并启动报告基因表达的两种蛋白。阴性对照：pGADT7...
答：不是酵母双杂交技术的基本原理1989年,Song和Field建立了第一个基于酵母的细胞内检测蛋白间相互作用的遗传系统。
答：最近做酵母双杂交,筛选到12个阳性克隆,编码同一个基因,但是翻译不通,请高手如何解释?载体是clontech 首先谢谢各位老师的回答。用的菌株是clontech的Y2HGOLD菌株,是他们公司新开发的。我们挑选的阳性克隆是既能显色,又能在四缺板加毒素AbA,和16mM的3-AT.经测序他们是5个不同的克隆,但... 首先谢谢各位老师的...
答：1.构建酵母双杂交载体 首先需要构建酵母双杂交载体，该载体包含两个重要的部分：一个携带蛋白质结构域的DNA结合域和一个携带转录激活域的DNA结合域。2.将两个蛋白质结构域克隆到载体中 将两个蛋白质结构域克隆到载体中，一个蛋白质结构域与转录激活域相连，另一个蛋白质结构域与DNA结合域相连。3.转...
答：去生物方面的论坛讨论吧！这种地方娱乐娱乐还行，专业的东西就别参考了。比如小木虫就挺好。你的双杂背景太多，在涂版时可适量加一些3-AT。现在的话，就等等看吧，从里面挑选出一些比较大的点。
答：酵母双杂交技术是一种在分子生物学研究中常用的技术，主要用于研究蛋白质之间的相互作用。这种技术的原理是基于真核生物的转录因子TFIID的结构，其中TFIID由TD和TBP两个亚基组成，它们之间通过一个名为helix-loop-helix的结构相互连接，形成稳定的复合物。在酵母双杂交系统中，TD和TBP被分别替换为两个目标...
答：存在相互作用。诱饵蛋白与AD上的目的蛋白存在相互作用，这样的酵母菌株可以在三缺及四缺的培养基上生长，并启动β-半乳糖苷酶的基因进行转录。
答：酵母双杂交二缺、三缺、四缺的作用如下。1、二缺：可以帮助分离染色体的配对。2、三缺：可以用于研究基因重组的机理。3、四缺：可以用于研究基因邻接检测和构建不同基因之间在空间上的位置关系。
网友评论：
贝胖15229421397：
酵母双杂交筛库不加3 - at有什么影响 -
47692袁卞
： 假阳性 非常多,你是 -LWH 3缺+ 3-AT 吗?
贝胖15229421397：
酵母双杂交的常见问题 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统应用中常遇到的问题一是假阳性较多,二是转化效率偏低.所谓假阳性就是:在待研究的两个蛋白间没有发生相互作用的情况下,报告基因被激活.主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独激活作用,或者这种融合蛋白的激活作...
贝胖15229421397：
酵母双杂 te buffer是什么意思 -
47692袁卞
： 你好 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 .典型的真核生物转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain).前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用, 启动它所调节的基因的转录. 希望对你有帮助
贝胖15229421397：
酵母菌双杂交到底是什么? 请解释一下 -
47692袁卞
： 100字有点困难,但是还是可以试试,如果有疑问可以追问.酵母双杂交是一种用于检测两种蛋白是否互作的一种手段.实验中将A蛋白与转录激活因子连接,B蛋白与另一个转录因子(比如RNA聚合酶的alpha亚基)融合.如果A能够和B发生互作,那么转录激活因子就可以激活报告基因的转录,从而使菌株产生某些特性(抗性或能够在基本培养基上生长),反之则不能.参考资料:http://baike.baidu.com/link?url=gzze1wAVvxbMwPcV8xUjouZsKo1gCjEVnSCm7QeV0m-3CW_1od9IqgWbY25byn91OzKfM5kGeMRah5KdaccKta
贝胖15229421397：
酵母双杂交的特点 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用,及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因.除上述的同仁回答外,还有其他的一些问题:假阳性较多,假阴性现象,转化效率也是关键点之一.
贝胖15229421397：
酵母双杂交系统原理的应用 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用,具有高度敏感性. 主要是由于: ①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达. ②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行, 而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤,降低了信号强度. ③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强,后者又与启动子DNA结合, 此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定. ④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大. 同时, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感.
贝胖15229421397：
酵母双杂交系统的介绍 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统.
贝胖15229421397：
酵母双杂交的局限性 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法, 有多方面的应用, 但仍存在一些局限性.⑴双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内, 而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等, 这些反...
贝胖15229421397：
关于酵母双杂交SYSTEM3的AH109菌株 -
47692袁卞
： 呵呵,我做Y2H很久了.pGBKT7和pGADT7不要同时转入细胞,要先转入一个,平板培养,挑单菌落做液体培养,再转入另一个质粒,同时转入两个质粒的效率太低.我做的时候转化率很高,从来没有出现过问题,转入第一个质粒(pGBKT7...
贝胖15229421397：
谁能解释一下酵母双杂交系统的基本原理和操作流程 -
47692袁卞
： 酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统,也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法.该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.
